"HEK293-EBNA Cells|人胚腎細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
L-Wnt3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hk-2細胞、Hs1.Tes細胞、MUGCHOR1細胞
EHEB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-270細胞、SK-N-DZ細胞、Rh30細胞
RSC96細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG [Human lung carcinoma]細胞、H-322細胞、Y 1細胞
細胞生長:貼壁
培養(yǎng)細胞的凍存及復(fù)蘇:細胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-196℃液氮中,儲存時間幾乎是無限的。細胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融?!緝龃婕毎浚?選對數(shù)增生期細胞(證明無支原體污染),在凍存前1d換液;2)按常規(guī)方法把培養(yǎng)細胞制備成懸液,計數(shù),使細胞密度達5×10/ml左右密度,離心,去上清;3)加入配制好的凍存液(培養(yǎng)液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按與去上清相同的量一滴一滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。凍存細胞時培養(yǎng)液中加入保護劑10%二甲基亞砜(DMSO)或甘油,可使冰點降低,使細胞內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細胞外;4)分裝于無菌凍存管中,每管加1.5m懸液;5)旋好凍存管并仔細檢查,一定要蓋緊,做好標記;6)凍存:在特殊的儀器或簡易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min時間內(nèi),下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要適當掌握下降冷凍速度,過快能影響細胞內(nèi)水分透出,太慢則促進冰晶形成。操作時應(yīng)戴防護眼鏡和手套,以免液氮凍傷?!緩?fù)蘇細胞】1)從罐中取出凍存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不時搖動,使其急速融化,30~60s內(nèi)完成;3)凍存管用70%酒精擦拭消毒后,打開蓋子,用吸管將細胞懸液注入離心管中,再滴加10ml培養(yǎng)液;4)低速離心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培養(yǎng)液洗一次;5)用培養(yǎng)液適當稀釋后,裝入培養(yǎng)瓶37℃培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后,繼續(xù)培養(yǎng)。以后仍按常規(guī)進行培養(yǎng)。凍存細胞數(shù)量要充分,密度應(yīng)達到10/ml,在融后稀釋20倍時,仍能保持5×10/ml數(shù)量。
HEK293-EBNA Cells|人胚腎細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
Mouse Colon 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTC1細胞、SNU-484細胞、MDA-231細胞
HEC-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Oka-C1細胞、SK Col 1細胞、OEC33細胞
T/G HA VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:10T1/2細胞、AsPC-1細胞、HARAB細胞
D-283MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 Ad5細胞、KMS-18細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞
細胞傳代方法:1:4-1:10傳代;每周2次。
絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細胞。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37℃消化。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性。如果和標準形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細胞之后會對你越來越不好。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HEK293-EBNA Cells|人胚腎細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
SK Mel 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Earle's L cells細胞、SNK-6細胞、Mono Mac 6細胞
LK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAEC細胞、COLO 829細胞、A1847細胞
Rca-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT39細胞、MDA-MB 231細胞、NCI-H1792細胞
LTEP-sm細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H146細胞、293/EBNA細胞、HFL-I細胞
細胞傳代后放入培養(yǎng)箱沒有搖勻,或者放入時搖勻,但在細胞貼壁前,又移動了培養(yǎng)瓶,頻繁開關(guān)培養(yǎng)箱引起的振動或者培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液過少,培養(yǎng)箱擱板表面不平整,這些因素會導(dǎo)致細胞生長不均勻。研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。運輸過程對細胞有嚴重影響。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C 太久。一些懸浮細胞抱團生長是正?,F(xiàn)象,大部分懸浮細胞在細胞密度很高的情況下,很可能會出現(xiàn)部分細胞抱團生長的現(xiàn)象,聚團細胞很容易死亡并演化成絮狀物,殃及周圍的懸浮細胞,因此在培養(yǎng)懸浮細胞時需控制好細胞密度。如果出現(xiàn)了細胞團,可以通過細胞篩去掉部分較大的細胞團,也可以嘗試一下方法:將細胞懸液收集到15ml離心管中,靜置20min左右,小心取上層細胞上清培養(yǎng)(該方法只能去除部分較大的細胞團)。部分細胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐藥株等),這個是正?,F(xiàn)象。如果只有少數(shù)細胞有內(nèi)出現(xiàn)極少空泡,則很可能是細胞狀態(tài)不佳,可以通過調(diào)整血清濃度,控制消化,控制傳代比例及時間等方法來調(diào)整細胞狀態(tài);如果大部分細胞出現(xiàn)空泡,且單個細胞內(nèi)空泡數(shù)目偏多,則可能細胞代次較高,細胞老化所致,需更換代次較早的細胞。
NCI-SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-330細胞、D-341Med細胞、EOC20細胞
GS-9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-028細胞、Neukoplast細胞、OAW42細胞
BE2M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞
NGEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duke University 145細胞、TCam-2細胞、SF-763細胞
HSC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMC細胞、COLO 679細胞、SK-N-BE細胞
P3-NS1/1Ag 4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞
Onda 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞
K299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL34細胞、H-2347細胞、NK-92細胞
HEK293-EBNA Cells|人胚腎細胞系
AM-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK52E細胞、EBNA-293細胞、HN-6細胞
LIM 1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87細胞、DF1細胞、H1573細胞
Hs274T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1437細胞、CAOV3細胞、PC-9/S1細胞
CCD-1095Sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 9細胞、hFOB 1.19細胞、HCO細胞
QBC(939)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC(Human Schwann)細胞、ARPE-19細胞、MuM-2C細胞
LK 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MZ-CRC-1細胞、LADMAC細胞、J774 A1細胞
MEG-01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H165細胞、CAL 33細胞、LOU-NH91細胞
PLA801C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBT-2細胞、CCD-19Lu細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞
PLA801C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBT-2細胞、CCD-19Lu細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞
OVCAR10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U 937細胞、LS-180細胞、SAOS 2細胞
SNU-C2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435細胞、H-82細胞、HuLEC-5a細胞
P-815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、Panc-327細胞
PANC.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293T/17細胞、Kupffer細胞、SCC 9細胞
SNU601細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0030細胞、WiDr-TC細胞、KPNRTBM1細胞
Lewis lung carcinoma line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA157細胞、IPEC-1細胞、SNU119細胞
IFRS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-423細胞、GM06141細胞、TE13細胞
KYSE 70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC細胞、Pt-K1細胞、Kit225-K6細胞
CHP126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC-11細胞、HCC2935細胞、LS174細胞
COLO-320細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-12細胞、LLCMK2細胞、SSP-25細胞
Onda 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞
FAK+/+細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1869細胞、Melanoma 14細胞、RD-ES細胞
JEG3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L428細胞、CCRF-CEM C1細胞、HuO9細胞
PA-TU S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H322T細胞、IMR 32細胞、NCI-ADR-RES細胞
MDA-MB-134 VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G292細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞、Plaepi 34細胞
H1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00346細胞、T98細胞、MT2細胞
A431細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS688AT細胞、H740細胞、HCC 94細胞
TOV112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKHEP-1細胞、DU145細胞、Hs683細胞
PANC0327細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3 L1細胞、EU-2細胞、Granta-519細胞
HCC-2935細胞系相關(guān)產(chǎn)品:746T細胞、MOLT4細胞、253JBV細胞
PG-BE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1792細胞、SUPT-1細胞、H510A細胞
NCIH2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/Taxo1細胞、CAOV4細胞、RKO_AS45細胞
Mel RM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFC細胞、HEK-293-F細胞、H2135細胞
VM-CUB-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHIN-3細胞、HFL 1細胞、HOS(TE85)細胞
RPE D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115F細胞、MGHU3細胞、SW-480細胞
CHAGOK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caov-3細胞、NCIH1417細胞、H322T細胞
OCI-Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166細胞、WERI-Rb-1細胞、PLA801D細胞
FAK+/+細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1869細胞、Melanoma 14細胞、RD-ES細胞
Hep-G2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha TC1-6細胞、BJA-B-1細胞、aTC1-6細胞
C26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS123細胞、TNC-1B12B4細胞、H9c2細胞
MDBK (NBL-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H378細胞、RIN-m細胞、COR-L23/P細胞
TE-85細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calf Pulmonary Artery 47細胞、MDCK Type II細胞、COLO-320細胞
KMM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF12F細胞、RPMI 2650細胞、CCRFCEM細胞
AN3CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB 157細胞、C6661細胞、Rat podocyte細胞
NCI-H2291細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1299細胞、OCI-LY-19細胞、H1435細胞
CCRF.CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML2細胞、SUDHL-16細胞、Hs 688(A).T細胞
KYSE 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S3細胞、HM1900細胞、Huh7.5.1細胞
Panc-08.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-I細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞、MCF 7細胞
MV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE7細胞、IHH-4細胞、RD-2細胞
Vx2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:697細胞、NCIH2196細胞、Psi-2 DAP細胞
NCI-H1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 2650細胞、COR-L105細胞、KOSC-2細胞
MDA-1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0細胞、VMM-5A細胞、SK BR 03細胞
HEK293-EBNA Cells|人胚腎細胞系
IM95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL279細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、LSECs細胞
MCF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MONO-MAC 6細胞、KP-N-YN細胞、H-1648細胞
BE2M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK-1細胞、NOMO1細胞、U-266 AR1細胞
NCIH3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-695-T細胞、Mel-624細胞、KMST6細胞
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