"NCI-H2085 Cells|人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
MIA-PaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dakiki細(xì)胞、HSC3細(xì)胞、HCPEpiC細(xì)胞
HT1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-13細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞、OS-732細(xì)胞
MPVECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 239A細(xì)胞、PL-9細(xì)胞、Hs819.T細(xì)胞
細(xì)胞生長:貼壁
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細(xì)胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細(xì)胞生長挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長:二、細(xì)胞細(xì)化太過,細(xì)胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細(xì)胞聚團(tuán)生長。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來的細(xì)胞放在一個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時間可適當(dāng)放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
NCI-H2085 Cells|人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
H-596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-661細(xì)胞、CAL62細(xì)胞、Tb1Lu細(xì)胞
C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT4細(xì)胞、NUGC3細(xì)胞、MCF.10A細(xì)胞
Human Embryonic Skin細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BeWo細(xì)胞、UMUC3細(xì)胞、SUDHL1細(xì)胞
BC-021細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、BRL細(xì)胞、MDA-MB 453細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:3-1:6傳代
養(yǎng)科研細(xì)胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下:1)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進(jìn)入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳,釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,當(dāng)然會變堿。如果不燒瓶口的話,你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當(dāng)然多多少少還是會有一點越用越堿,因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高),其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細(xì)菌的話,這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細(xì)菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內(nèi)從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底,超凈臺內(nèi)根本就不點酒精燈;2)不要頻繁看細(xì)胞。對于初學(xué)者而言,養(yǎng)細(xì)胞就像養(yǎng)孩子一樣,有空就要去看看。細(xì)胞越是養(yǎng)不好,就越是經(jīng)常去看。實際上看細(xì)胞對細(xì)胞的生長沒有任何好處,特別是對原代細(xì)胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細(xì)胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細(xì)胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細(xì)胞,培養(yǎng)瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經(jīng)??梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇?xì)胞,細(xì)胞老是長不好。老手細(xì)胞一扔好幾天不管,細(xì)胞瘋長;3)不要怕消化。在傳代的時候,初學(xué)者往往生怕細(xì)胞消化過度,早早地終止消化。細(xì)胞沒下來就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來,用力吹打?qū)?xì)胞的損傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候,37度消化過夜,細(xì)胞也沒事。我一般是等細(xì)胞完全變圓后才中止消化。細(xì)胞輕輕一晃就能下來。還有,動作要輕柔,盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機(jī)械應(yīng)力相當(dāng)大,對細(xì)胞的傷害也是很大的。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H2085 Cells|人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
L-6TG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-2003細(xì)胞、A875細(xì)胞、GS-9L細(xì)胞
ID8/MOSEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGP1細(xì)胞、NCIN87細(xì)胞、ADR-RES細(xì)胞
COLO 201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞、HuP-T3細(xì)胞、Bovine Turbinate細(xì)胞
HIT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52細(xì)胞、PLA801C細(xì)胞、MEL-526細(xì)胞
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項:細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時收獲細(xì)胞,計數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實,細(xì)胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。
MOLT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HME-1細(xì)胞、VeroE6細(xì)胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞
Ra No. 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 852.T細(xì)胞、Li-7細(xì)胞、TCC-SUP細(xì)胞
Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRCC細(xì)胞、TE-1細(xì)胞、S.B.細(xì)胞
SNT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD33Co細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞、HP615細(xì)胞
SF767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780CP70細(xì)胞、TE14細(xì)胞、KE 37細(xì)胞
WTRL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV-293細(xì)胞、H-920細(xì)胞、DanG細(xì)胞
GOS-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-837細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞、OV-90細(xì)胞
P31/Fujioka細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B958細(xì)胞、SK BR 03細(xì)胞、D562細(xì)胞
NCI-H2085 Cells|人肺癌細(xì)胞系
CAOV3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEL細(xì)胞、ACHN細(xì)胞、B16-F1細(xì)胞
CAL-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 subline B78細(xì)胞、EA.hy 926細(xì)胞、MC-3T3-E1細(xì)胞
HOS(TE85)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAVSMC細(xì)胞、NCI-841細(xì)胞、NCIH2347細(xì)胞
OP9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU354細(xì)胞、P3X63 Ag8細(xì)胞、HCC-1187細(xì)胞
NCI-H2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、HOS (TE85)細(xì)胞
JurkatE6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-256-TC細(xì)胞、NR8383.1細(xì)胞、28SC細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LPC-H12細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞、Duke University 145細(xì)胞
CTLA4Ig-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-H細(xì)胞、NCTC-929細(xì)胞、A2008細(xì)胞
CTLA4Ig-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-H細(xì)胞、NCTC-929細(xì)胞、A2008細(xì)胞
TCam-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMES-1細(xì)胞、NB-9細(xì)胞、HFF細(xì)胞
HBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 52細(xì)胞、IHH細(xì)胞、H526細(xì)胞
COV 504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGBEC細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞、L-132細(xì)胞
CCD 841 CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320HSR細(xì)胞、CHP212細(xì)胞、C3H-10T1/2細(xì)胞
SGC-7901細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH596細(xì)胞、NK-92細(xì)胞、V-79-4細(xì)胞
RAW264.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK MEL 5細(xì)胞、U-266細(xì)胞、Panc02-H0細(xì)胞
MES-SA-Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-39細(xì)胞、3T3細(xì)胞、38C13細(xì)胞
QG-56細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SY5Y細(xì)胞、Tu-686細(xì)胞、SB細(xì)胞
GM04680細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL11細(xì)胞、KYSE270細(xì)胞、WSU-HN13細(xì)胞
A2780CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞、B16 melanoma細(xì)胞
CF PAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL(2)細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞、TE12細(xì)胞
H-441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:769-P細(xì)胞、OVCAR 5細(xì)胞、SUM-190PT細(xì)胞
LNCaP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y79細(xì)胞、CCK81細(xì)胞、PE/CA-PJ34細(xì)胞
S3-HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hi-five細(xì)胞、RPTEC/TERT 1細(xì)胞、HNTEC細(xì)胞
SN12PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO679細(xì)胞、HeLa細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞
JB-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H322細(xì)胞、NCIH740細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞
CTX TNA2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB-6 Cl 30細(xì)胞、USMC細(xì)胞、C-32細(xì)胞
H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas 299細(xì)胞、87MG細(xì)胞、MA 104細(xì)胞
TOV-112D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECGI10細(xì)胞、HEK293-H細(xì)胞、Hs68細(xì)胞
H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-6細(xì)胞、L 132細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞
RS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 144細(xì)胞、MSTO-211細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞
MS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1522細(xì)胞、MS-751細(xì)胞、YES-2細(xì)胞
Hepatoma 22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190A細(xì)胞、NCI-H1563細(xì)胞、OCILY-19細(xì)胞
NCI-BL2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UO31細(xì)胞、H3255_DA細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞
TMK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU3細(xì)胞、SF 295細(xì)胞、BOWES細(xì)胞
SK Mel 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK2細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞、GH3細(xì)胞
A10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL2細(xì)胞、alphaTC clone 6細(xì)胞、OV90細(xì)胞
T98 G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon38細(xì)胞、MMQ細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞
H820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-100細(xì)胞、PC 61細(xì)胞、IAR-20細(xì)胞
JHH-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03671細(xì)胞、Hs_578t細(xì)胞、HBE 135-E6E7細(xì)胞
SNU-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1648細(xì)胞、H-460細(xì)胞、TE-3A細(xì)胞
IOSE-80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、LO2細(xì)胞、H1781細(xì)胞
KOSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW42細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞
N-2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL16細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞、NCI.H226細(xì)胞
Hs 578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-AS細(xì)胞、F98細(xì)胞、WM 239-A細(xì)胞
MDA-MB 361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 6666細(xì)胞、HUASMC細(xì)胞、SF-126細(xì)胞
SKBR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 1846細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞、RT-BM-1細(xì)胞
LN-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGCs細(xì)胞、786-0細(xì)胞、hSCC-25細(xì)胞
AM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS-RA細(xì)胞、GLC-15細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞
CAL-120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ishikawa細(xì)胞、RAT2細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞
NCI-SNU-216細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL4細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞
HOP-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LK2細(xì)胞、HUTU80細(xì)胞、T24細(xì)胞
NCI-H2085 Cells|人肺癌細(xì)胞系
EU-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FUOV1細(xì)胞、Jurkat FHCRC細(xì)胞、HGSMC細(xì)胞
KYSE-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:95-D細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞、K1735細(xì)胞
Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRCC細(xì)胞、108CC15細(xì)胞、PF382細(xì)胞
OVCAR-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Lu-65細(xì)胞、U-373-MG細(xì)胞、SKMES1細(xì)胞
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