"NCI-H774 Cells|人小細胞肺癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
BT-20細胞系相關產品:Ramos (RA 1)細胞、H-1694細胞、MC-4細胞
HPAEpiC細胞系相關產品:Colon-38細胞、IMR-90細胞、hRPTC細胞
LI7細胞系相關產品:BxPC-3細胞、3T3 J2細胞、T173細胞
細胞生長:貼壁
細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內,加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
NCI-H774 Cells|人小細胞肺癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
U343MG細胞系相關產品:JM-Jurkat細胞、RPMI 1788細胞、U87-MG細胞
Hs940.T細胞系相關產品:293 HEK細胞、UMNSAH-DF 1細胞、IGROV細胞
HCC-2279細胞系相關產品:HPAEC細胞、UMRC2細胞、UO31細胞
CAL-148細胞系相關產品:253J-Bladder-V細胞、T-47-D細胞、COLO680N細胞
細胞傳代方法:每周換液2次。
動物細胞實驗室必備儀器進行簡單介紹:1)CO2培養(yǎng)箱:CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的必備儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、O2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要;2)烘箱(干燥箱):用于細胞培養(yǎng)的一些器械、器皿必須烘干后才能使用,玻璃器皿等須干熱消毒。干熱消毒時,烘箱內溫度一般要達到160℃以上,通常使用鼓風式烘箱。其優(yōu)點是溫度均勻、效果較好,缺點是升溫過程較慢。升溫時不能先升溫后鼓風而應鼓風與升溫同時開始,至100℃時,停止鼓風。需注意避免包裹器皿的紙或棉花燒焦,燒焦的碎屑可影響細胞的生長。消毒后不能立即打開箱門,以免驟冷導致玻璃器皿破裂,應等溫度自然下降至100℃以下后可開門。3)超凈工作臺/生物安全柜:細胞培養(yǎng)對無菌環(huán)境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質量條件下進行,因此超凈工作臺或生物安全柜就必須配備。4)液氮罐:為了保存細胞,特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株,要將細胞凍存。凍存的溫度一般為液氮溫度-196℃,因此,需要液氮罐。在此環(huán)境中,一般細胞可以保存十年具有活性。5)超低溫冰箱:細胞的凍存過程需要一系列程序降溫,一般4℃下存放30min,轉放-20℃ 1 hour,再轉入-70至-80℃過夜,之后才可以轉移到液氮內(-196℃),這時就必須配備一臺-86℃超低溫冰箱。一般超低溫冰箱保存細胞可達數(shù)月,對于不需要長期凍存的細胞,可暫時放于超低溫冰箱保存。6)恒溫水浴:從液氮或超低溫冰箱中取出細胞凍存管需要立即放于37℃水浴中快速復蘇之后才傳代培養(yǎng),因此,恒溫水浴也是細胞實驗室必備儀器。7離心機:細胞培養(yǎng)需要離心收集傳代細胞,所以需要配置低速的常溫離心機,對于后期細胞內容物的分離則需要高速冷凍離心機。除上述儀器外,移液器、高壓滅菌鍋、倒置顯微鏡、熒光顯微鏡也是細胞培養(yǎng)的必備儀器,發(fā)酵罐、轉瓶機等也常常見于細胞培養(yǎng)實驗室。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
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細胞生長特性:懸浮生長
GLC-82細胞系相關產品:C2C12細胞、NCI-H292細胞、1E8-H細胞
MUTZ3細胞系相關產品:Vero-76細胞、HCC202細胞、HUCCT1細胞
GH 3細胞系相關產品:HLCL9B10細胞、SP-2/0-AG14細胞、SU-DHL2細胞
RK13細胞系相關產品:CCLP1細胞、AMJ2C8細胞、H-2444細胞
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉!
NCTC 1469細胞系相關產品:WiDrTC細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞、HCC-1171細胞
RCSMC細胞系相關產品:OVCAR.8細胞、H-2073細胞、LAN-5細胞
B 95-8細胞系相關產品:DHL-4細胞、HR8348細胞、OCI-Ly 8細胞
NCI-H747細胞系相關產品:C 6細胞、BIC-1細胞、MDAMB134VI細胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞系相關產品:Hs729T細胞、BMU-S1細胞、Rca-B細胞
HLF細胞系相關產品:HSC-T6細胞、NCI-H774細胞、SW-1222細胞
NIH:OVCAR-5細胞系相關產品:Ca9-22細胞、HCT-GEO細胞、Hs870T細胞
FTC-133細胞系相關產品:SNU-C1細胞、SNU-251細胞、NSC34細胞
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U-118-MG細胞系相關產品:KP4細胞、Hs611T細胞、NB-9細胞
HLE-B3細胞系相關產品:2PK-3細胞、HTSMC細胞、RPE-hTERT細胞
MN60細胞系相關產品:COLO-679細胞、VMRCRCZ細胞、WISH細胞
NCM460細胞系相關產品:Metastatic Variant 522細胞、Panc-02細胞、NCI-H774細胞
TM-4細胞系相關產品:OAC-P4C細胞、HEC-1-B細胞、CCD966SK細胞
P31/FUJ細胞系相關產品:SNUC2A細胞、NFS-60細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞
OCI-Ly03細胞系相關產品:L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞
EB-3細胞系相關產品:SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞
EB-3細胞系相關產品:SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞
SKMEL5細胞系相關產品:C57 Mouse Tumor 93細胞、PC-3M-1E8細胞、293-EBNA1細胞
HFT-8810細胞系相關產品:NCI-H1155細胞、TJ905細胞、Capan2細胞
CO115細胞系相關產品:SK.MEL.5細胞、PECAPJ34細胞、MADB-106細胞
H-1781細胞系相關產品:RD-2細胞、CHG-5細胞、HSC4細胞
OVCAR8/ADR細胞系相關產品:CTLA4 Ig-24細胞、RBL-2H3細胞、LN229細胞
L cell line細胞系相關產品:IBMF-7細胞、Hs839T細胞、SUM102PT細胞
NS-1細胞系相關產品:MADB 106細胞、MLOY4細胞、KYSE-140細胞
SR-786細胞系相關產品:OCI/AML-4細胞、EFM-192B細胞、SK-RC-52細胞
MGC-803細胞系相關產品:NMC-G1細胞、Leukemic 1210細胞、SKMEL-24細胞
LUDLU1細胞系相關產品:OCILY3細胞、CT-26 WT細胞、K562細胞
Daoy細胞系相關產品:KMB-17細胞、UMRC-2細胞、Rat-2細胞
McA-RH 7777細胞系相關產品:H157細胞、Gerner 7666細胞、COR-L279細胞
GLC82細胞系相關產品:NCTC 929細胞、Panc5.04細胞、TE-8細胞
U118-MG細胞系相關產品:SV-HUC細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞、GH 3細胞
CNE細胞系相關產品:JB6Cl30細胞、SP-2細胞、MC26細胞
SUM-159-PT細胞系相關產品:Sp2/0-Ag-14細胞、SW1271細胞、OVCAR4細胞
HCT-116細胞系相關產品:TGW-I-nu細胞、HS 1.Tes細胞、HCET細胞
TE-85 clone 5細胞系相關產品:TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞
NCIH522細胞系相關產品:Pa16C細胞、CAL 120細胞、OVCAR433細胞
SF295細胞系相關產品:H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞
NCI-H1417細胞系相關產品:KTCTL-140細胞、SNU-620細胞、HuT78細胞
LICR-HN-6細胞系相關產品:MB468細胞、38C-13細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞
OVCA433_Bast細胞系相關產品:AE 1201細胞、Bat lung細胞、T1-73細胞
HTR8svn細胞系相關產品:HCC-9204細胞、Panc3_27細胞、HT-144細胞
COLO320/DM細胞系相關產品:Pro-Lec1.3C細胞、Jurkat-FHCRC細胞、GOTO細胞
JEKO細胞系相關產品:H-520細胞、NCIH1975細胞、33604細胞
HTori:3細胞系相關產品:KBM-7/Hap8細胞、H4-II-E細胞、SCC7細胞
GM05372E細胞系相關產品:SNU423細胞、NBL-7細胞、L5178YR細胞
QGP-1細胞系相關產品:BALB 3T3 clone A31細胞、HSC-1細胞、JB6 Cl 30細胞
SACCLM細胞系相關產品:HEK 293細胞、HCT/Taxo1細胞、Det. 562細胞
H647細胞系相關產品:DMS-273細胞、FRhK4細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞
RWPE1細胞系相關產品:Walker-256細胞、mIMCD3細胞、P3-X63-Ag8.653細胞
PT-67細胞系相關產品:Sp 2/0-Ag 14細胞、C666-1細胞、NCI-SNU-620細胞
U-118MG細胞系相關產品:PK-15細胞、293EBNA細胞、HPDEC細胞
Tn-5B1-4細胞系相關產品:OSC-19細胞、MNNG-HOS細胞、HL-60 Clone 15細胞
RIN m5F細胞系相關產品:H-2141細胞、ROS-17/2.8細胞、SF 295細胞
293c18細胞系相關產品:NCIH23細胞、UO31細胞、BC-023細胞
NCI-ADR-RES細胞系相關產品:Wayne State University-Head and Neck 13細胞、RPMI1846細胞、WEHI164細胞
OVCA433_Bast細胞系相關產品:AE 1201細胞、Bat lung細胞、T1-73細胞
4175細胞系相關產品:OVCAR433細胞、MDCK II細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞
143TK-細胞系相關產品:BE(2)C細胞、SK Hep1細胞、WRL-68細胞
SUM 159細胞系相關產品:C8-D1A細胞、IALM細胞、NCI-H2066細胞
NCI-H774 Cells|人小細胞肺癌細胞系
8305C細胞系相關產品:MKN28細胞、WPMY-1細胞、C12細胞
HTR-8/SV neo細胞系相關產品:BDCM細胞、NB-4細胞、SKMEL3細胞
B 95-8細胞系相關產品:DHL-4細胞、SAOS 2細胞、Panc 02細胞
T47-D細胞系相關產品:H1048細胞、MDA-MB-134 VI細胞、PLC/PRF5細胞
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