抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,產(chǎn)品僅用于科研如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)最適溫度。
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白32抗體 別 名 Brctx; Ankrd32; Ankyrin repeat domain-containing protein 32; ANR32_HUMAN; BRCT domain-containing protein 1; Brctd1.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
英文名稱 Anti-ANKRD32
中文名稱 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白32抗體
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 121kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ANKRD32
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-F=1:100-500 IF=1:50-200
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
實(shí)驗(yàn)步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
產(chǎn)品僅用于科研如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體反應(yīng)特點(diǎn):
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴(kuò)散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
含試劑:
1、一抗(應(yīng)用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標(biāo)記二抗工作液:生物素標(biāo)記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
尿嘧標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:15mg 英文名稱:
萬乃韋相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:10mg 英文名稱:
萬乃韋相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:15mg 英文名稱:
D纈更昔韋標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:10mg 英文名稱:
柔比星分離度用混合物標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱:Valrubicin Resolution Mixture
纈沙坦相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:10mg 英文名稱:
萬古B標(biāo)準(zhǔn)品(含單二萬古) 規(guī)格:350mg 英文名稱:
鴨嘴花 規(guī)格:ea 英文名稱:
維庫銨相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
維庫銨相關(guān)物質(zhì)F標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:15mg 英文名稱:
司班20 進(jìn)口、國產(chǎn) Span20 含量:BS
司班40 進(jìn)口、國產(chǎn) Span40 含量:BR
司班60 進(jìn)口、國產(chǎn) Span60 含量:BS,85%
司班80 進(jìn)口、國產(chǎn) Span80 含量:AR,85%
司班85 進(jìn)口、國產(chǎn) Span85 含量:AR,87%
絲脂 進(jìn)口、國產(chǎn) phosphatidylserine 含量:BR,20%
四基硼 進(jìn)口、國產(chǎn) NaTBP 含量:CP,95%
四硼 進(jìn)口、國產(chǎn) Potassiumtetraphenylborate 含量:AR,98%
四銨 進(jìn)口、國產(chǎn) Tetrapropylammoniumbromide 含量:BR,98%
四醋鉛 進(jìn)口、國產(chǎn) Lead(IV)acetate 含量:CP,98.5%
G蛋白偶聯(lián)受體126抗體Cardenolide B-1中文名:別名:分子式:C30H44O8
G蛋白偶聯(lián)受體105抗體Drevogenin A中文名:別名:分子式:C28H42O7
G蛋白偶聯(lián)受體C5B抗體Dregeoside Ga1中文名:別名:分子式:C49H80O17
G蛋白偶聯(lián)受體33抗體Dregeoside Aa1中文名:別名:Drebyssoside 2分子式:C49H78O17
谷氨酸受體紅藻氨酸離子1抗體Tigogenin中文名:劍麻皂素別名:分子式:C27H44O3
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白32抗體 Shewanella putrefaciens種屬:Shewanella putrefaciens
分離基物:礦
提供形式:凍干粉
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。
生長條件:30℃,好氧腐敗希瓦氏菌