"NCI-H747 Cells|人盲腸癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
ssMCF-7細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-C1細胞、NCI.H522細胞、AZ 521細胞
PC615.3細胞系相關產(chǎn)品:HCC827細胞、LIM1215細胞、BEL7402細胞
MC3T3-E1 Subclone 4細胞系相關產(chǎn)品:RCF細胞、H184A1細胞、CAL 148細胞
細胞生長:貼壁
最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
NCI-H747 Cells|人盲腸癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
FHL124細胞系相關產(chǎn)品:GCT0404細胞、MADISON LUNG TA-109細胞、HeLa-229細胞
H1944細胞系相關產(chǎn)品:Giant Cell Tumor細胞、HFF1細胞、8505C細胞
OCI-Ly3細胞系相關產(chǎn)品:C8166細胞、WERI-Rb-1細胞、PLA801D細胞
J111細胞系相關產(chǎn)品:NCIH650細胞、Hs819T細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞
細胞傳代方法:1:2—1:4傳代,每周換液2次
細胞培養(yǎng)常見問題及解決方案:1)培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細胞極大可能會污染,所以我們會及時安排幫老師解決;2)細胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細胞生長至匯合度80%,進行消化傳代;如細胞還是不貼壁,將細胞離心收集轉到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術人員會一直跟蹤指導,直到問題解決;3)對于生長緩慢的貼壁細胞:可采用適當?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來保證細胞的狀態(tài)和生長速度;4)對于生長不均的貼壁細胞:在培養(yǎng)過程中若出現(xiàn)細胞分布明顯不均時(即某一區(qū)域細胞已重疊生長,而旁邊則為一塊空白),此時可將細胞進行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H747 Cells|人盲腸癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
RCC23細胞系相關產(chǎn)品:L 929細胞、BHK-21細胞、HCC-1438細胞
HNE1細胞系相關產(chǎn)品:RINm5F細胞、TE-14細胞、AX-Mel細胞
A172細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly 8細胞、SN12C-PM6細胞、RPMI-7951細胞
NEC-8細胞系相關產(chǎn)品:TE-10細胞、Panc2_03細胞、KTA7細胞
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
RS411細胞系相關產(chǎn)品:NT2-D1細胞、LAN-5細胞、HEK293-FT細胞
LS411N細胞系相關產(chǎn)品:H-510細胞、GM2219C細胞、MC-CAR細胞
H-748細胞系相關產(chǎn)品:Mel624細胞、MARC 145細胞、SK-RC 39細胞
HFL-1細胞系相關產(chǎn)品:CCRF-SB細胞、RCC10RGB細胞、H196細胞
U118MG細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2141細胞、TCCSUP細胞、SNU-878細胞
Walker-256細胞系相關產(chǎn)品:AR4-IP細胞、HCC0366細胞、HEL-92_1_7細胞
Panc02細胞系相關產(chǎn)品:P815細胞、KTA-7細胞、CHOS細胞
CHO-S細胞系相關產(chǎn)品:OPM-2細胞、NTera2 cl.D1細胞、KMB17細胞
NCI-H747 Cells|人盲腸癌細胞系
Psi-2-DAP細胞系相關產(chǎn)品:EAC-E2G8細胞、IEC-6細胞、OKa-C-1細胞
MNNG/HOS Cl #5細胞系相關產(chǎn)品:Chinese Hamster Lung細胞、CHP-212細胞、Hs 895 T細胞
WEHI 3細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H292細胞、Hs27F細胞、Clone 15 HL-60細胞
OUMS-27細胞系相關產(chǎn)品:KYSE270細胞、H774細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞
T-HEECs細胞系相關產(chǎn)品:QBI-HEK 293A細胞、MV4;11細胞、MDA134細胞
NBL-7細胞系相關產(chǎn)品:KU 812F細胞、M14細胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細胞
NCI-H87細胞系相關產(chǎn)品:7404細胞、RH-35細胞、COLO824細胞
WB-F344細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞
WB-F344細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H211細胞、Kit225/K6細胞、WM239A細胞
CAL 12T細胞系相關產(chǎn)品:HOS-TE85細胞、SW-1990細胞、MES-SA/Dx-5細胞
JCA1細胞系相關產(chǎn)品:NCI-Hut 125細胞、Sp2/O細胞、H-64細胞
NT2細胞系相關產(chǎn)品:T1-73細胞、C 643細胞、NFHIOSE-80細胞
GA-10 clone 4細胞系相關產(chǎn)品:P388.D1細胞、Hs 636 T細胞、SNU-869細胞
HEM細胞系相關產(chǎn)品:SW 1116細胞、KASUMI6細胞、NCI-446細胞
GM637細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly19細胞、DMS273細胞、H865細胞
RAEC細胞系相關產(chǎn)品:HCC2279細胞、NCIH2122細胞、HM06.A1細胞
H647ell細胞系相關產(chǎn)品:SMMC-7721細胞、C3H10T1/2細胞、OCIAML4細胞
EA hy 926細胞系相關產(chǎn)品:GM00637B細胞、SUDHL-6細胞、HS-68細胞
TE-11細胞系相關產(chǎn)品:HuPT4細胞、COV434細胞、RPMI6666細胞
D-283MED細胞系相關產(chǎn)品:293 Ad5細胞、KMS-18細胞、P3-NS1/1-Ag4-1細胞
138 MG細胞系相關產(chǎn)品:HCC-9724細胞、A-204細胞、C2BBe1細胞
MDA-MB-175細胞系相關產(chǎn)品:293T/17細胞、MDA-MB-453細胞、UCH-1細胞
NCI-H2030細胞系相關產(chǎn)品:TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、H-2591細胞、BIU-87/Adr細胞
OsACL細胞系相關產(chǎn)品:Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞
MSCs(mUCMSCs)細胞系相關產(chǎn)品:NCIH64細胞、NIH:OVCAR4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞
MDBK細胞系相關產(chǎn)品:ECC10細胞、U-hth74細胞、HBZY1細胞
HEK-A細胞系相關產(chǎn)品:LTPA細胞、VAESBJ細胞、NCIH747細胞
H-2452細胞系相關產(chǎn)品:S-16細胞、hOMF細胞、BCaP 37細胞
RIN Cl-5F細胞系相關產(chǎn)品:SNB19細胞、HCC9204細胞、GM15452細胞
MHCC 97-H細胞系相關產(chǎn)品:NIT-1細胞、SW-626細胞、16HBEo-細胞
L5178-R細胞系相關產(chǎn)品:Karpas-299細胞、GM3190細胞、P3X63-Ag8.653細胞
MV-1-Lu細胞系相關產(chǎn)品:BIU-87/Adr細胞、NOZC-1細胞、T 98 G細胞
NCIH2023細胞系相關產(chǎn)品:CHP 100細胞、COLO 206細胞、Glioma-261細胞
Ramos-RA1細胞系相關產(chǎn)品:H-740細胞、H2052_MM細胞、870細胞
MEL細胞系相關產(chǎn)品:RS411細胞、QGP1細胞、TE 85 ClF-5細胞
TK 10細胞系相關產(chǎn)品:MC-116細胞、AG06814-N細胞、CAL851細胞
NCL-H548細胞系相關產(chǎn)品:MOLM13細胞、HH [Human lymphoma]細胞、BEAS 2B細胞
NCIH1581細胞系相關產(chǎn)品:H-125細胞、EB-2細胞、Soleus clone 8細胞
L-363細胞系相關產(chǎn)品:H2342細胞、MCF-7細胞、SK ES 01細胞
Fetal Rhesus Kidney-4細胞系相關產(chǎn)品:IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞
HTori3細胞系相關產(chǎn)品:GM637A細胞、MDA330細胞、P30/Ohkubo細胞
SBC3細胞系相關產(chǎn)品:L-M[TK-]細胞、RPE1細胞、WERI Rb-1細胞
VMRCRCZ細胞系相關產(chǎn)品:BE(2)-C細胞、SL1細胞、NU-GC-3細胞
A2780/Taxol細胞系相關產(chǎn)品:RT112細胞、OVMANA細胞、HSC/mHSC細胞
HO-8910細胞系相關產(chǎn)品:H2081細胞、LA-795細胞、SUM159PT細胞
HuT-102細胞系相關產(chǎn)品:102PT細胞、SK-UT-1細胞、P3-X63Ag8細胞
H2141細胞系相關產(chǎn)品:Reuber H-35細胞、LP-1細胞、NCI-Hut 125細胞
NeHepLxHT細胞系相關產(chǎn)品:SNU-C2A細胞、SLMT1細胞、SNU449細胞
MDA-436細胞系相關產(chǎn)品:RKOAS451細胞、BNL-CL.2細胞、HUT28細胞
THPI細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-BE(2C)細胞、NBL-12細胞、HS940細胞
SNU520細胞系相關產(chǎn)品:H2170細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、MPASMC細胞
NCI-H747 Cells|人盲腸癌細胞系
T_T_細胞系相關產(chǎn)品:BN-CL2細胞、PK (15)細胞、L 540細胞
OAW42細胞系相關產(chǎn)品:EAC細胞、HEK-293-FT細胞、KU812-F細胞
H747細胞系相關產(chǎn)品:SUD-4細胞、R D細胞、HCC827細胞
OVCAR-5細胞系相關產(chǎn)品:MKN 28細胞、3T3J2細胞、MILE SVEN 1細胞
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