"UACC-893 Cells|人乳腺導管癌細胞系
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài):上皮細胞樣
Hs-343-T細胞系相關產(chǎn)品:FL83B細胞、RCK-8細胞、HCT FET細胞
LA 4細胞系相關產(chǎn)品:T/G HA-VSMC細胞、Fao細胞、BC3H-1細胞
BC-PAP細胞系相關產(chǎn)品:NMCG-1細胞、QG56細胞、WM 239A細胞
細胞生長:貼壁
細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內,加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。
UACC-893 Cells|人乳腺導管癌細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
PG-4細胞系相關產(chǎn)品:SuDHL 5細胞、786-O細胞、Karpas299細胞
EBTr (NBL-4)細胞系相關產(chǎn)品:Hep3B細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞、HHL5細胞
HCC0078細胞系相關產(chǎn)品:HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞
GC-1spg細胞系相關產(chǎn)品:SK.MEL.2細胞、NCI-H1299細胞、YES 2細胞
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
養(yǎng)科研細胞是生物醫(yī)學研究的基本功。有三個小經(jīng)驗可以和大家分享一下:1)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進入瓶內。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養(yǎng)基中的碳酸就會轉化成二氧化碳,釋放出來。培養(yǎng)基中的碳酸少了,當然會變堿。如果不燒瓶口的話,你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿,因為室溫還是比冰箱內的溫度高),其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細菌的話,這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內從來就不燒瓶口。來以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底,超凈臺內根本就不點酒精燈;2)不要頻繁看細胞。對于初學者而言,養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣,有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好,就越是經(jīng)常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處,特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細胞。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,形成有利于生長的局部環(huán)境。你跑去看細胞,培養(yǎng)瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經(jīng)??梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎?,細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管,細胞瘋長;3)不要怕消化。在傳代的時候,初學者往往生怕細胞消化過度,早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來,用力吹打對細胞的損傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r候,37度消化過夜,細胞也沒事。我一般是等細胞完全變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有,動作要輕柔,盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時的機械應力相當大,對細胞的傷害也是很大的。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
UACC-893 Cells|人乳腺導管癌細胞系
細胞生長特性:貼壁生長
B16-F10-BL6細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR.4細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NP69細胞
CaSki細胞系相關產(chǎn)品:HSF2細胞、EL 4細胞、KMS26細胞
LWnt3A細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2195細胞、NCI-H2330細胞、SGC-7901細胞
LLC-WRC 256細胞系相關產(chǎn)品:HuNS1細胞、HEEpiC細胞、MHCC-LM3細胞
細胞復蘇相關注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉速和時間,轉的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候對一般細胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
LCMS細胞系相關產(chǎn)品:KRC-Y細胞、Tj-905細胞、CT-26細胞
NCIH2030細胞系相關產(chǎn)品:DoHH-2細胞、RH-30細胞、GP2-293細胞
CV1細胞系相關產(chǎn)品:OVISE細胞、HSC細胞、H-2110細胞
OSKM-1細胞系相關產(chǎn)品:CMEC/D3細胞、Hs 839.T細胞、CCD-841-CoTr細胞
Ly3細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H295R細胞、MDA-MB-330細胞、LLC-WRC 256細胞
NCI-H1693細胞系相關產(chǎn)品:MARC 145細胞、RCK8細胞、Hs888Lu細胞
HT1080細胞系相關產(chǎn)品:PK-13細胞、PANC.1細胞、OS-732細胞
SF539細胞系相關產(chǎn)品:K562細胞、SJ-Rh 30細胞、3T3NIH細胞
UACC-893 Cells|人乳腺導管癌細胞系
RC-2細胞系相關產(chǎn)品:HR-1細胞、HPDE細胞、OKT3細胞
BHP 10-3細胞系相關產(chǎn)品:W133細胞、Jurkat clone A3細胞、RPMI 1788細胞
NCIH2073細胞系相關產(chǎn)品:BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞
H-2171細胞系相關產(chǎn)品:H-2030細胞、MO59J細胞、HIT T-15細胞
CAMA細胞系相關產(chǎn)品:CAL 51細胞、TSU-Pr1細胞、H929細胞
BEAS 2B細胞系相關產(chǎn)品:NTERA-2細胞、MM1.S細胞、NCI-HUT-125細胞
COLO 205細胞系相關產(chǎn)品:H4-II-E細胞、SUM 102PT細胞、COLO_320DM細胞
NCI-SNU-C2A細胞系相關產(chǎn)品:SU 86.86細胞、TE4細胞、TE4細胞
NCI-SNU-C2A細胞系相關產(chǎn)品:SU 86.86細胞、TE4細胞、TE4細胞
H548細胞系相關產(chǎn)品:Jurkat, Clone E6-1細胞、CCD18Co細胞、TSCCa細胞
Capan2細胞系相關產(chǎn)品:H-460細胞、KMB 17細胞、DI TNC1細胞
HEEpiC細胞系相關產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、BE(2)-C細胞、JCA1細胞
RH-30細胞系相關產(chǎn)品:IAR-20細胞、SK-N-BE2C細胞、CMT 93細胞
HEL299細胞系相關產(chǎn)品:SKOV3細胞、SK.OV.3細胞、TGBC11T細胞
IAR 20細胞系相關產(chǎn)品:NG-108-15細胞、N9細胞、293 F細胞
BT483細胞系相關產(chǎn)品:SN-12C細胞、RPMI8226/S細胞、NCI-H1648細胞
YH細胞系相關產(chǎn)品:NL-20細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、NCIH596細胞
AKR細胞系相關產(chǎn)品:PA-TU S細胞、RS 4;11細胞、184A1細胞
NK-92MI細胞系相關產(chǎn)品:SLMT1細胞、SUPB-15細胞、NCI-SNU-407細胞
HCC-2935細胞系相關產(chǎn)品:746T細胞、MOLT4細胞、253JBV細胞
U251細胞系相關產(chǎn)品:Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞
PLA-802細胞系相關產(chǎn)品:BC-025細胞、H1930細胞、SK-ChA1細胞
RMS1598細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1355細胞、T2細胞、Ramos 1細胞
NCI-H847細胞系相關產(chǎn)品:Namalwa細胞、NCI-H-128細胞、IPLB-SF 21AE細胞
Lu-65細胞系相關產(chǎn)品:LO2細胞、NCIH661細胞、MDAMB175細胞
CV 1細胞系相關產(chǎn)品:hADSCs細胞、BALL-1細胞、Z310細胞
Ha Fe細胞系相關產(chǎn)品:HCC1008細胞、AN3CA細胞、OVCAR.8細胞
EB-3細胞系相關產(chǎn)品:SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞
CCRF-CEM C1細胞系相關產(chǎn)品:HIMEC細胞、FaDu細胞、HCT-GEO細胞
SK-UT-1細胞系相關產(chǎn)品:TE-14細胞、3-LL細胞、HPAEpiC細胞
HLEC細胞系相關產(chǎn)品:50.B1細胞、HEK293A細胞、KE-39細胞
CMT 93細胞系相關產(chǎn)品:FaDu細胞、Hs445細胞、P3/NS-1細胞
CTLL2細胞系相關產(chǎn)品:HeLa-S3細胞、CCRF SB細胞、NCI-H125細胞
Hepa-RG細胞系相關產(chǎn)品:SF 763細胞、DHL4細胞、NCIH1373細胞
Panc-1-P細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H460細胞、GM03570E細胞、PLA801-95D細胞
H-446細胞系相關產(chǎn)品:U251-MG細胞、Hs 888.T細胞、A9(Hamprecht)細胞
MA 104細胞系相關產(chǎn)品:IHHA-1細胞、NCIH1876細胞、NCI-H1568細胞
MA 104細胞系相關產(chǎn)品:IHHA-1細胞、NCIH1876細胞、NCI-H1568細胞
SCL2細胞系相關產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、4175細胞、TFK-1細胞
OCM1細胞系相關產(chǎn)品:CTV-1細胞、hTERTHME1細胞、CL-11細胞
JOSK-M細胞系相關產(chǎn)品:SKNO-1細胞、Colo699細胞、HcaF細胞
RINm-5F細胞系相關產(chǎn)品:Capan-2細胞、NCIH1781細胞、hs 68細胞
Hs-940細胞系相關產(chǎn)品:UCLA RO-81-A-1細胞、SK-Hep1細胞、751-NA-15細胞
Hs940-T細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2228細胞、SNU-886細胞、DMS 79細胞
KP-4細胞系相關產(chǎn)品:ES-2細胞、IR983F細胞、P-19細胞
IOSE 80細胞系相關產(chǎn)品:H2330細胞、NALM-6細胞、FHC細胞
PGLH7細胞系相關產(chǎn)品:CHL-11細胞、293 EBNA細胞、OACP4C細胞
Hep 3B2_1-7細胞系相關產(chǎn)品:SMMC 7721細胞、QGP 1細胞、HEH2細胞
NCI-H1836細胞系相關產(chǎn)品:GRSL細胞、WM 266-4細胞、Jurkat 77細胞
SKMES細胞系相關產(chǎn)品:THLE2細胞、HcerEpic細胞、hFOB1.19細胞
Z310細胞系相關產(chǎn)品:NCI660細胞、NCI-H2122細胞、TE354.T細胞
UACC-893 Cells|人乳腺導管癌細胞系
H-1436細胞系相關產(chǎn)品:PNT1/A細胞、PLA-802細胞、C41細胞
BC3H-1細胞系相關產(chǎn)品:769P細胞、MES 13細胞、Calu3細胞
CV1細胞系相關產(chǎn)品:OVISE細胞、NCIH2052細胞、SUM-102細胞
RAW2647細胞系相關產(chǎn)品:Balb/c3T3細胞、NCIH647細胞、TN5B14細胞
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