"UACC-893 Cells|人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
Hs-343-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL83B細(xì)胞、RCK-8細(xì)胞、HCT FET細(xì)胞
LA 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/G HA-VSMC細(xì)胞、Fao細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞
BC-PAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMCG-1細(xì)胞、QG56細(xì)胞、WM 239A細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞傳代的一般方法:開(kāi)始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬(wàn)單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫(xiě)傳代記錄。
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細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
PG-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 5細(xì)胞、786-O細(xì)胞、Karpas299細(xì)胞
EBTr (NBL-4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep3B細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞、HHL5細(xì)胞
HCC0078細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144細(xì)胞、OVCAR-4細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞
GC-1spg細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.2細(xì)胞、NCI-H1299細(xì)胞、YES 2細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
養(yǎng)科研細(xì)胞是生物醫(yī)學(xué)研究的基本功。有三個(gè)小經(jīng)驗(yàn)可以和大家分享一下:1)不要燒瓶口。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關(guān)瓶子,覺(jué)得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時(shí)候,熾熱的空氣進(jìn)入瓶?jī)?nèi)。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養(yǎng)基中的碳酸就會(huì)轉(zhuǎn)化成二氧化碳,釋放出來(lái)。培養(yǎng)基中的碳酸少了,當(dāng)然會(huì)變堿。如果不燒瓶口的話,你會(huì)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會(huì)大大減慢。(當(dāng)然多多少少還是會(huì)有一點(diǎn)越用越堿,因?yàn)槭覝剡€是比冰箱內(nèi)的溫度高),其實(shí)燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會(huì)發(fā)現(xiàn)根本就不會(huì)燒疼。如果有細(xì)菌的話,這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細(xì)菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國(guó)內(nèi)從來(lái)就不燒瓶口。來(lái)以后發(fā)現(xiàn)這里更徹底,超凈臺(tái)內(nèi)根本就不點(diǎn)酒精燈;2)不要頻繁看細(xì)胞。對(duì)于初學(xué)者而言,養(yǎng)細(xì)胞就像養(yǎng)孩子一樣,有空就要去看看。細(xì)胞越是養(yǎng)不好,就越是經(jīng)常去看。實(shí)際上看細(xì)胞對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)沒(méi)有任何好處,特別是對(duì)原代細(xì)胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細(xì)胞。培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)因子是非常有限的。細(xì)胞好不容易自分泌一點(diǎn)兒促生長(zhǎng)的因子在其周圍,形成有利于生長(zhǎng)的局部環(huán)境。你跑去看細(xì)胞,培養(yǎng)瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經(jīng)??梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇?xì)胞,細(xì)胞老是長(zhǎng)不好。老手細(xì)胞一扔好幾天不管,細(xì)胞瘋長(zhǎng);3)不要怕消化。在傳代的時(shí)候,初學(xué)者往往生怕細(xì)胞消化過(guò)度,早早地終止消化。細(xì)胞沒(méi)下來(lái)就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來(lái),用力吹打?qū)?xì)胞的損傷比消化更大。我?guī)熜衷谧鲅芷交≡臅r(shí)候,37度消化過(guò)夜,細(xì)胞也沒(méi)事。我一般是等細(xì)胞完全變圓后才中止消化。細(xì)胞輕輕一晃就能下來(lái)。還有,動(dòng)作要輕柔,盡量不要產(chǎn)生氣泡。氣泡在破裂時(shí)的機(jī)械應(yīng)力相當(dāng)大,對(duì)細(xì)胞的傷害也是很大的。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
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細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
B16-F10-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.4細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NP69細(xì)胞
CaSki細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSF2細(xì)胞、EL 4細(xì)胞、KMS26細(xì)胞
LWnt3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2195細(xì)胞、NCI-H2330細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞
LLC-WRC 256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuNS1細(xì)胞、HEEpiC細(xì)胞、MHCC-LM3細(xì)胞
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng):1.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問(wèn)題:凍存液的配置已是常識(shí),在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會(huì)造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。4.離心問(wèn)題:目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè),去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對(duì)一般人來(lái)說(shuō),把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大,死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染,所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無(wú)異常。5.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題:教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)1ml細(xì)胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過(guò)多,細(xì)胞濃度過(guò)低,不利于細(xì)胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題:這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會(huì)比較大,就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),從以前的資料來(lái)看,DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響,還有一個(gè)說(shuō)法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
LCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRC-Y細(xì)胞、Tj-905細(xì)胞、CT-26細(xì)胞
NCIH2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoHH-2細(xì)胞、RH-30細(xì)胞、GP2-293細(xì)胞
CV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVISE細(xì)胞、HSC細(xì)胞、H-2110細(xì)胞
OSKM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMEC/D3細(xì)胞、Hs 839.T細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞
Ly3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H295R細(xì)胞、MDA-MB-330細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞
NCI-H1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC 145細(xì)胞、RCK8細(xì)胞、Hs888Lu細(xì)胞
HT1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-13細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞、OS-732細(xì)胞
SF539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K562細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞、3T3NIH細(xì)胞
UACC-893 Cells|人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR-1細(xì)胞、HPDE細(xì)胞、OKT3細(xì)胞
BHP 10-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:W133細(xì)胞、Jurkat clone A3細(xì)胞、RPMI 1788細(xì)胞
NCIH2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCECs細(xì)胞、L23/P細(xì)胞、ECC1細(xì)胞
H-2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2030細(xì)胞、MO59J細(xì)胞、HIT T-15細(xì)胞
CAMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 51細(xì)胞、TSU-Pr1細(xì)胞、H929細(xì)胞
BEAS 2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞、NCI-HUT-125細(xì)胞
COLO 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-II-E細(xì)胞、SUM 102PT細(xì)胞、COLO_320DM細(xì)胞
NCI-SNU-C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU 86.86細(xì)胞、TE4細(xì)胞、TE4細(xì)胞
NCI-SNU-C2A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU 86.86細(xì)胞、TE4細(xì)胞、TE4細(xì)胞
H548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞、CCD18Co細(xì)胞、TSCCa細(xì)胞
Capan2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-460細(xì)胞、KMB 17細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞
HEEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞、BE(2)-C細(xì)胞、JCA1細(xì)胞
RH-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IAR-20細(xì)胞、SK-N-BE2C細(xì)胞、CMT 93細(xì)胞
HEL299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKOV3細(xì)胞、SK.OV.3細(xì)胞、TGBC11T細(xì)胞
IAR 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG-108-15細(xì)胞、N9細(xì)胞、293 F細(xì)胞
BT483細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN-12C細(xì)胞、RPMI8226/S細(xì)胞、NCI-H1648細(xì)胞
YH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL-20細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞、NCIH596細(xì)胞
AKR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU S細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞、184A1細(xì)胞
NK-92MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SLMT1細(xì)胞、SUPB-15細(xì)胞、NCI-SNU-407細(xì)胞
HCC-2935細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:746T細(xì)胞、MOLT4細(xì)胞、253JBV細(xì)胞
U251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞、H-2444細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞
PLA-802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-025細(xì)胞、H1930細(xì)胞、SK-ChA1細(xì)胞
RMS1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1355細(xì)胞、T2細(xì)胞、Ramos 1細(xì)胞
NCI-H847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Namalwa細(xì)胞、NCI-H-128細(xì)胞、IPLB-SF 21AE細(xì)胞
Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LO2細(xì)胞、NCIH661細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞
CV 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hADSCs細(xì)胞、BALL-1細(xì)胞、Z310細(xì)胞
Ha Fe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1008細(xì)胞、AN3CA細(xì)胞、OVCAR.8細(xì)胞
EB-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1783細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞、Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞
CCRF-CEM C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIMEC細(xì)胞、FaDu細(xì)胞、HCT-GEO細(xì)胞
SK-UT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-14細(xì)胞、3-LL細(xì)胞、HPAEpiC細(xì)胞
HLEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:50.B1細(xì)胞、HEK293A細(xì)胞、KE-39細(xì)胞
CMT 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FaDu細(xì)胞、Hs445細(xì)胞、P3/NS-1細(xì)胞
CTLL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa-S3細(xì)胞、CCRF SB細(xì)胞、NCI-H125細(xì)胞
Hepa-RG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 763細(xì)胞、DHL4細(xì)胞、NCIH1373細(xì)胞
Panc-1-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H460細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞、PLA801-95D細(xì)胞
H-446細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251-MG細(xì)胞、Hs 888.T細(xì)胞、A9(Hamprecht)細(xì)胞
MA 104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHHA-1細(xì)胞、NCIH1876細(xì)胞、NCI-H1568細(xì)胞
MA 104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHHA-1細(xì)胞、NCIH1876細(xì)胞、NCI-H1568細(xì)胞
SCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞、4175細(xì)胞、TFK-1細(xì)胞
OCM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTV-1細(xì)胞、hTERTHME1細(xì)胞、CL-11細(xì)胞
JOSK-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNO-1細(xì)胞、Colo699細(xì)胞、HcaF細(xì)胞
RINm-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan-2細(xì)胞、NCIH1781細(xì)胞、hs 68細(xì)胞
Hs-940細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA RO-81-A-1細(xì)胞、SK-Hep1細(xì)胞、751-NA-15細(xì)胞
Hs940-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2228細(xì)胞、SNU-886細(xì)胞、DMS 79細(xì)胞
KP-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ES-2細(xì)胞、IR983F細(xì)胞、P-19細(xì)胞
IOSE 80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2330細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞、FHC細(xì)胞
PGLH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-11細(xì)胞、293 EBNA細(xì)胞、OACP4C細(xì)胞
Hep 3B2_1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMMC 7721細(xì)胞、QGP 1細(xì)胞、HEH2細(xì)胞
NCI-H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GRSL細(xì)胞、WM 266-4細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞
SKMES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THLE2細(xì)胞、HcerEpic細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞
Z310細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI660細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞、TE354.T細(xì)胞
UACC-893 Cells|人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
H-1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1/A細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞、C41細(xì)胞
BC3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:769P細(xì)胞、MES 13細(xì)胞、Calu3細(xì)胞
CV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVISE細(xì)胞、NCIH2052細(xì)胞、SUM-102細(xì)胞
RAW2647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Balb/c3T3細(xì)胞、NCIH647細(xì)胞、TN5B14細(xì)胞
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