抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,產(chǎn)品僅用于科研通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-A4GNT
中文名稱 α1,4-N-乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)移酶α4Gn-T抗體
別 名 4-N-acetylglucosaminyltransferase; A4GCT_HUMAN; A4GNT; Alpha 1 4 N acetylglucosaminyltransferase; Alpha-1; Alpha4GnT; EC 2.4.1.; MGC149493.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 39kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human A4GNT (131-180aa)
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
產(chǎn)品僅用于科研當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
下列是α1,4-N-乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)移酶α4Gn-T抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
芴標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Lumefantrine
環(huán)酰相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
康唑相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:10mg 英文名稱:
華法林標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Warfarin
三正基氧標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱:Tributyl Phosphine Oxide
卡麥角林標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:125mg 英文名稱:Cabergoline
鹽阿夫唑嗪標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:150mg 英文名稱:Alfuzosin Hydrochloride
枸櫞鉍標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Bismuth Citrate
番瀉苷A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱:Sennoside A
膽標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:2g 英文名稱:Cholic Acid (AS)
2基1,3雜茂 進口、國產(chǎn) 2Methylimidazole 含量:CP
2基1嘧5基1(4三氧基基)1 進口、國產(chǎn) Flurprimidol 含量:高純,98%
2基8羥基 進口、國產(chǎn) 8Hydroxyquinaldine 含量:AR
2基 進口、國產(chǎn) oToluicacid 含量:超純,99%
2基吲哚 進口、國產(chǎn) 2Methylindole 含量:BR,4850℃
2氧基4基重1,5二磺鹽 進口、國產(chǎn) FastredBsalt1,5Naphthalenedisulfonate 含量:ACS,95%
2氧基茴香 進口、國產(chǎn) 2,4Dimethoxybenzaldehyde 含量:BR,MV>300萬
2 進口、國產(chǎn) LPhenylglycinol 含量:BR,99%
2莰 進口、國產(chǎn) Borneol 含量:AR,98%
2莰 進口、國產(chǎn) Camphore 含量:CP,96%
酪氨酸蛋白激酶B3抗體3',6'-Bis(diethylamino)-2-(4-nitrophenyl)spiro[isoindole-1,9'-xanthene]-3-one中文名:3',6'-雙(二乙氨基)-2-(4-硝基苯基)螺[異吲哚-1,9'-氧雜蒽]-3-酮別名:分子式:C34H34N4O4
磷酸化酪氨酸蛋白激酶受體B1+B2抗體1,3-Bis(4,5-dihydro-2-oxazolyl)benzene中文名:1,3-雙(4,5-二氫-2-惡唑)苯別名:分子式:C12H12N2O2
酪氨酸蛋白激酶受體B1+B2+B3+B4抗體2,5-Bis(4-diethylaminophenyl)-1,3,4-oxadiazole中文名:2,5-二(4-二乙基氨基苯基)-1,3,4-惡二唑別名:分子式:C22H28N4O
腫瘤相關(guān)表面抗原RCAS1抗體1,3-Bis[2-(4-aminophenyl)-2-propyl]benzene中文名:1,3-雙[2-(4-氨基苯基)-2-丙基]苯別名:分子式:C24H28N2
表皮生長因子樣重復(fù)折疊1結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體4,4'-Cyclohexylidenebisphenol中文名:4,4'-環(huán)亞己基雙苯酚別名:Bisphenol Z分子式:C18H20O2
α1,4-N-乙酰葡糖胺轉(zhuǎn)移酶α4Gn-T抗體 Listeria seeligeri種屬:Listeria seeligeri
提供形式:凍干粉
安全等級:1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:腦心浸液瓊脂(BHIA):牛腦浸粉 4.0g,牛心浸粉 4.0g,蛋白胨 5.0g,酪蛋白胨16.0g,NaCl 5.0g,葡萄糖 2.0g,磷酸氫二鈉 2.5g,瓊脂 20.0g,pH7.4 ± 0.2。121℃,15min。
生長條件:37℃,好氧斯氏李斯特氏菌