抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、產(chǎn)品僅用于科研進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
英文名稱 Anti-ABCG8
中文名稱 三磷酸腺苷結合轉運蛋白G超家族成員8抗體
別 名 ATP binding cassette sub family G (WHITE) member 8 (sterolin 2); ATP binding cassette sub family G member 8; MGC142217; Sterolin 2; STSL; ABCG8_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領域 腫瘤 細胞生物 免疫學 轉錄調(diào)節(jié)因子 轉運蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 76kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ABCG8
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.產(chǎn)品僅用于科研用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
下列是三磷酸腺苷結合轉運蛋白G超家族成員8抗體 的相關熱銷產(chǎn)品:
葑 2,4Diaminoisopropoxy,3,5triazine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)鋅指蛋白913一抗
楊梅苷 2,4Diamino,3,5triazine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)鋅指蛋白749一抗
L鼠李糖 2,4Diaminomethoxy,3,5triazine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)鋅指蛋白450一抗
人參皂苷Ro 2,4Diaminodimethylamino,3,5triazine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)鋅指蛋白20D3一抗
三白草 Ethylene Glycol Bis[4(ethoxycarbonyl)phenyl] Ether 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)鋅指蛋白804A一抗
3,5二基 Ethylene Glycol Bis(4carboxyphenyl) Ether 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)負調(diào)控因子白細胞介素2一抗
兔抗綿羊IgG (純化... 9,9Bis[4(2hydroxyethoxy)phenyl]fluorene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)鋅指蛋白BED3一抗
兔抗大鼠IgG (純化... preELM1 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)鋅指蛋白379一抗
羊抗兔IgG (純化一抗) Pyromellitic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)鋅指蛋白431一抗
羊抗小鼠IgG (純化... 1,4Bis[(1Himidazolyl)methyl]benzene 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)鋅指蛋白185一抗
兔抗猴IgG (純化一抗) 2,2'Diamino,4'bithiazole 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)鋅結合醇脫氫酶結構域蛋白2一抗
羊抗人白蛋白 (純化... 1HImidazole,5dicarboxylic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(HPLC)(T)鋅指蛋白909一抗
羊抗人IgM (μ鏈特... 2,6Naphthalenedicarboxylic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)γ基丁A受體相關膜蛋白3
羊抗人IgG (純化一抗) 1,4Naphthalenedicarboxylic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T)鋅指蛋白288一抗
兔抗人IgG F(ab)2 (... Pyrazine 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)鋅指蛋白ZBTB38一抗
羊抗人IgA (α鏈特... 2,3Pyrazinedicarboxylic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)鋅指蛋白693一抗
羊抗人IgG/A/M (純... pAnisil 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)鋅指蛋白ZBTB12一抗
磷酸化原癌蛋白CBL2抗體Isomartynoside中文名:異地黃苷別名:分子式:C31H40O15
細胞分裂周期蛋白25抗體Gallic acid中文名:沒食子酸別名:3,4,5-Trihydroxybenzoic acid分子式:C7H6O5
半胱胺酸蛋白酶蛋白9-p10抗體5,7-Dihydroxychromone中文名:5,7-二羥基色原酮別名:分子式:C9H6O4
CRX抗體Orcinol中文名:苔黑酚別名:5-Methyl-1,3-benzenediol; 地衣酚分子式:C7H8O2
環(huán)腺苷酸應答元件結合蛋白抗體Antiarol rutinoside中文名:別名:3,4,5-Trimethoxyphenyl rutinoside分子式:C21H32O13
三磷酸腺苷結合轉運蛋白G超家族成員8抗體 Salmonella meleagridis種屬:Salmonella meleagridis
提供形式:凍干物
安全等級:2
模式菌株:no
應用領域:研究、質(zhì)量控制
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。
生長條件:36℃,好氧
存儲條件:真空冷凍干燥法火雞沙門氏菌