抗體反應(yīng)的因素:
1.電解質(zhì) :抗原抗體特異結(jié)合后,膠體粒便可發(fā)生脫水作用,此時易受電解質(zhì)影響,產(chǎn)品僅用于科研如有適當(dāng)濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負(fù)電荷而相互凝聚,于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。
2.酸堿度:合適的pH為6-8。
3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)最適溫度。
胎盤和前列腺相關(guān)蛋白DLG5抗體 別 名 Discs large homolog 5 (Drosophila); Discs large homolog 5; Discs large protein LP DLG; Discs large protein P dlg; Discs large protein P-dlg; Disks large homolog 5; DLG 5; DLG5; DLG5_HUMAN; KIAA0583; Large type of P DLG; LP DLG; P DLG5; PDLG; Placenta and prostate DLG.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
英文名稱 Anti-DLG5
中文名稱 胎盤和前列腺相關(guān)蛋白DLG5抗體
研究領(lǐng)域 腫瘤 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞骨架 細(xì)胞膜蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 214kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human DLG5
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
實驗步驟:
1、石蠟切片,常規(guī)脫蠟至水
2、蒸餾水沖洗,pbs 浸泡5 分鐘(如需采用抗原修復(fù),在此步驟后進(jìn)行)。
3、3%雙氧水去離子水(無色液體)孵育15-20 分鐘,以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。
4、滴加試劑A(藍(lán)色液體)室溫孵育15-20 分鐘,傾去,勿洗。
5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗,37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。
6、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
7、滴加試劑B(黃色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
8、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
9、滴加試劑C(橙色液體),室溫或37℃孵育15-20 分鐘。
10、PBS 沖洗,3 分鐘3 次。
11、顯色劑顯色(DAB 或AEC)
12、自來水充分沖洗。
13、如果需要,可進(jìn)行復(fù)染,脫水,透明。
14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄?/span>
抗體的鑒定:
1)抗體的效價鑒定:不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗來鑒定。
2)抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力??贵w的特異性高,它的識別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。
產(chǎn)品僅用于科研如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3)抗體親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol??贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。
抗體反應(yīng)特點:
1.高度特異性,特異性是抗原抗體反應(yīng)的最主要特征,特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合;
2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為:Ag+AbAg·Ab;
3.適當(dāng)濃度和比例;
4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時,化學(xué)比色法的敏感度為mg/ml水平,酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml,免疫測定中凝膠擴(kuò)散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。
含試劑:
1、一抗(應(yīng)用:IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 )
2、無色試劑:內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑
3、試劑A:封閉用正常山羊血清工作液
4、試劑B:生物素標(biāo)記二抗工作液:生物素標(biāo)記羊抗兔IgG
5、試劑C:辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液
6、顯色液D液 (棕色) 1ml
7、顯色液E液(白色)20ml
異維A英文名稱:Different dimension A acid保存:20℃,避光規(guī)格:100mg單鏈結(jié)合蛋白70一抗
鹽維拉帕米英文名稱:Vera Pammy hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:50mgRAS癌基因相關(guān)蛋白RAB17一抗
鹽羅通定英文名稱:Luo Tongding hydrochloride保存:20℃,避光規(guī)格:100mgG蛋白結(jié)合蛋白RAB38一抗
辛夷(望春花)英文名稱:Xinyi (wangchunhua)保存:20℃,避光規(guī)格:4gG蛋白結(jié)合蛋白RAB10一抗
五倍子英文名稱:Galla chinensis保存:20℃,避光規(guī)格:1gG蛋白結(jié)合蛋白RAB11a一抗
積雪草英文名稱:Centella asiatica保存:20℃,避光規(guī)格:1.2gG蛋白結(jié)合蛋白RAB6A一抗
救必應(yīng)英文名稱:It should save保存:20℃,避光規(guī)格:4g復(fù)制激活因子C1一抗
桑寄生英文名稱:Sang Jisheng保存:20℃,避光規(guī)格:5g復(fù)制激活因子C2一抗
萊菔子英文名稱:Semen Raphani保存:20℃,避光規(guī)格:1g膽酯酶抑制劑8一抗
胡黃連英文名稱:Picrorhiza保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g神經(jīng)元突觸膜胞外分泌調(diào)節(jié)蛋白1一抗
枸杞子英文名稱:The fruit of Chinese wolfberry保存:20℃,避光規(guī)格:0.5g神經(jīng)元突觸膜胞外分泌調(diào)節(jié)蛋白2一抗
狗脊英文名稱:Cibotium barometz保存:20℃,避光規(guī)格:2gRMND5B蛋白一抗
知母英文名稱:Rhizoma Anemarrhenae保存:20℃,避光規(guī)格:3gRNA結(jié)合蛋白15一抗
忍冬藤英文名稱:Ren Dongteng保存:20℃,避光規(guī)格:2g鋅指蛋白754一抗
杜仲葉英文名稱:Leaves of Eucommia ulmoides保存:20℃,避光規(guī)格:5g受體結(jié)合絲蘇激酶3一抗
蘇木英文名稱:Hematoxylin保存:20℃,避光規(guī)格:1g受體結(jié)合絲蘇激酶5一抗
牛膝英文名稱:Achyranthes bidentata保存:20℃,避光規(guī)格:1g垂體瘤細(xì)胞凋亡一抗
11號染色體開放閱讀框21抗體prim-O-Glucosylcimifugin中文名:升麻苷別名:升麻素苷分子式:C22H28O11
11號染色體開放閱讀框24抗體Salidroside中文名:紅景天苷別名:分子式:C14H20O7
11號染色體開放閱讀框53抗體Gastrodin中文名:天麻素別名:分子式:C13H18O7
11號染色體開放閱讀框57抗體7',8'-Dihydroobolactone中文名:別名:分子式:C19H20O4
11號染色體開放閱讀框65抗體trans-2,3-Dihydro-3-ethoxyeuparin中文名:別名:分子式:C15H18O4
胎盤和前列腺相關(guān)蛋白DLG5抗體 Chitinophagarupis種屬:Chitinophagarupis
分離基物:懸崖土
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:2
生長條件:30℃Chitinophagarupis