樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA試劑盒應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 產(chǎn)品僅用于科研標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
檢測原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗α Manase抗體包被于酶標(biāo)板上,實驗時樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的α Manase會與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗GF-β1抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素???alpha; Manase抗體與結(jié)合在包被抗體上的α Manase結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長處測OD值,α Manase濃度與OD450值之間呈正比,通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品中α Manase的濃度。
產(chǎn)品名稱:小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA試劑盒
英文名稱:Mouse α mannosidase,α Manase ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T
貨號:A105680
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
實驗流程:
1. 實驗前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
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AMSH 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體人前列腺成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基含量:
ASB3 錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體人狀腺濾泡上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基含量:
S100鈣結(jié)合蛋白P檢測試劑盒銅粉
S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B檢測試劑盒銅片
EIF2C1/Ago1 真核翻譯起始因子2C1抗體人胰腺星狀細(xì)胞完全培養(yǎng)基含量:
Anillin 胞蛋白肌動蛋白結(jié)合蛋白抗體人胰腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基含量:
S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A檢測試劑盒銅絲
S100鈣結(jié)合蛋白A8/A9復(fù)合物檢測試劑盒碳銅
BIN3 細(xì)胞骨架銜接蛋白BIN3抗體人淋內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基含量:
S100鈣結(jié)合蛋白A6/鈣粒蛋白A檢測試劑盒銅
CCDC11 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體人淋成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基含量:
S100鈣結(jié)合蛋白A12/鈣粒蛋白C檢測試劑盒銅鐵試劑
CDC3/CDC10/Septin 7 細(xì)胞周期調(diào)控因子3抗體人淋血管內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基含量:
注意事項:
1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2)實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6)洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7)底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。產(chǎn)品僅用于科研實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8)加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9)按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
關(guān)鍵字: 小鼠α甘露糖苷酶;α Manase;ELISA試劑盒;ELISA檢測試劑盒;ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒;
上海撫生實業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
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