檢測(cè)原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法。用抗sPLA2抗體包被于酶標(biāo)板上,實(shí)驗(yàn)時(shí)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品中的sPLA2會(huì)與包被抗體結(jié)合,游離的成分被洗去。依次加入生物素化的抗GF-β1抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素。抗sPLA2抗體與結(jié)合在包被抗體上的sPLA2結(jié)合、生物素與親和素特異性結(jié)合而形成免疫復(fù)合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物(TMB),TMB在辣根過(guò)氧化物酶的催化下呈現(xiàn)藍(lán)色,加終止液后變成黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)OD值,sPLA2濃度與OD450值之間呈正比,通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣品中sPLA2的濃度。
產(chǎn)品名稱:小鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒
英文名稱:Mouse secreted phospholipase A2,sPLA2 ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T
貨號(hào):A105447
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚(yú)、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100µL,37°C孵育1小時(shí);
3. 吸棄,加檢測(cè)溶液A100µL,37°C孵育1小時(shí);
4. 洗板3次;
5. 加檢測(cè)溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將小鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
3-(芐基氨基)丙乙酯
CDK2/CyclinA2激酶檢測(cè)系統(tǒng)
人粒細(xì)胞集落刺激因子((G-CSF))定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)
甲基丙烯乙醇酯
甲基丙烯乙醇酯
ERK1激酶檢測(cè)系統(tǒng)
人粒細(xì)胞集落刺激因子受體((G-CSF sR))定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)
甲基丙烯乙醇酯
六乙醇一甲醚
n-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 2 (ANGPTL2)
己四甲叉膦(HDTMPA)
n-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷ELISA Kit for Cytochrome P450 Reductase (CPR)
己四甲叉膦(HDTMPA)
對(duì)硝-N-酰-β-D-氨基葡萄糖苷ELISA Kit for C-Type Lectin Domain Family 3, Member B (CLEC3B)
小鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒免疫球蛋白重鏈可變區(qū)檢測(cè)試劑盒低聚異麥芽糖
Adenylosuccinate Lyase 腺苷琥珀裂解酶抗體小鼠膀胱上皮細(xì)胞含量:
Columbid Herpes Virus 1(CHV-1)鴿皰疹病毒1型LAMP試劑盒
免疫球蛋白重鏈檢測(cè)試劑盒三蔗糖
免疫球蛋白輕鏈lambda檢測(cè)試劑盒抗壞血-6-棕櫚酯
Contagious Pustular Dermatitis Virus(CPDV)傳染性膿皰皮炎病毒LAMP試劑盒
Cooperia curticei短古柏線蟲(chóng)LAMP試劑盒
免疫球蛋白輕鏈kappa檢測(cè)試劑盒低聚木糖
免疫球蛋白結(jié)合蛋白檢測(cè)試劑盒低聚半乳糖
HIPK2 Fas相互作用蛋白激酶2抗體小鼠表皮干細(xì)胞含量:
免疫球蛋白γ-1 鏈C 區(qū)檢測(cè)試劑盒赤蘚糖
Glutamine PRPP amidotransferase 谷酰胺核糖基焦酰胺基轉(zhuǎn)移酶小鼠腸神經(jīng)元細(xì)胞含量:
免疫球蛋白M檢測(cè)試劑盒L(-)巖藻糖
CROT/COT 過(guò)化物酶體肉酰基轉(zhuǎn)移酶抗體小鼠成骨細(xì)胞含量:
注意事項(xiàng):
1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2)實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6)洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7)底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8)加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9)按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
關(guān)鍵字: 小鼠分泌型磷脂酶A2;sPLA2;ELISA試劑盒;ELISA檢測(cè)試劑盒;ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)是一家生物企業(yè),主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。主營(yíng)產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測(cè)試劑盒、分光光度法檢測(cè)試劑盒、熒光定量PCR檢測(cè)試劑盒、細(xì)胞株、原代細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai?Fusheng?Industrial?Co.,?Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標(biāo)本齊全,有專門針對(duì)人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液等標(biāo)本的試劑盒;另有針對(duì)各種動(dòng)物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚(yú))的科研試劑。
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