"YT細胞:人NK細胞白血病細胞系
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
常見培養(yǎng)細胞預(yù)防污染的有效措施:體外培養(yǎng)的細胞受到嚴重污染時,有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此,防止污染,預(yù)防是關(guān)鍵。只有將預(yù)防措施貫穿于整個細胞培養(yǎng)的始終,才能將發(fā)生污染的可能性降到最小程度。一般預(yù)防可從以下幾方面著手:1)添加抗生素:各種抗生素性質(zhì)不同,對各種微生物的作用也不同,聯(lián)合應(yīng)用比單用效果好,預(yù)防性應(yīng)用比污染后使用好(但迄今尚無對抗支原體特效抗生素)。但反復(fù)使用抗生素會使微生物產(chǎn)生耐藥性,且對細胞本身也有一定影響,因此為避免誘導(dǎo)抗藥細菌,應(yīng)定期更換培養(yǎng)系統(tǒng)中的抗生素,或盡可能不用抗生素處理;2)從物品、用品消毒滅菌著手:細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要徹底,各種溶液滅菌除菌要仔細,并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時,在無菌過濾操作中,隨著濾過體積的增大,濾膜破損的可能性增加,故應(yīng)選擇最后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進行消毒。具體操作:75%的酒精搽拭培養(yǎng)箱后,使用可移動的紫外燈至少消毒30min,加入高壓滅菌過的超純水于培養(yǎng)箱水槽中保持濕度。也可配制300ml的飽和酸銅加3L滅菌超純水混合成酸銅溶液加入水槽中。
絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可。吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細胞。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37℃消化。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育。不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性。如果和標準形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至完全吹打成單細胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細胞的特性,是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細胞之后會對你越來越不好。
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
LCLC-103H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Forestomach Carcinoma細胞、RPMI 7666細胞、PA-TU-8988S細胞
RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL細胞、LTEP a2細胞、SK-MES細胞
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BNCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞
KU 812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8226S細胞、MRC-9細胞、HCC1171細胞
K-562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GFP-Olig2細胞、Colo205細胞、H3255細胞
XWLC-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1770細胞、V79-1細胞、Hela-mock細胞
CHP212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTV1細胞、T-98細胞、Farage Original Line細胞
HT144mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB435細胞、HPAF細胞、CHL1細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB361細胞、SW-837細胞、Cloudman M3細胞
SNU182細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266細胞、CC-LP-1細胞、hTERT-RPE1細胞
IHH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS5細胞、Jurkat-E6細胞、LPC-H12細胞
SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2347細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、TPC1細胞
Hs746-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU 4475細胞、NCI-H2126細胞、KY-270細胞
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Mel526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-MS細胞、KCL-22細胞、KRC/Y細胞
FTC133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1395細胞、HSAS1細胞、HCA 7細胞
HNE3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04678細胞、KYSE-410細胞、LM-TK-細胞
Blotchy fibroblast-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mevo細胞、OCI-AML-3細胞、UMC11細胞
DHL10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1793細胞、TB-1 Lu細胞、32D CL3細胞
NCI-H1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 85.T細胞、CMT 167細胞、RAG細胞
H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HM細胞、C32 [Human melanoma]細胞、NCIH526細胞
NCIH2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190細胞、RCF細胞、MN 60細胞
H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞
TKB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryo Lung-1細胞、AMC-HN-8細胞、KYSE270細胞
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NCI-H1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 85.T細胞、CMT 167細胞、RAG細胞
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3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag 4/1細胞、LTEP-a2細胞、CCD1112Sk細胞
NBLAN5T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KFB細胞、HEL-299細胞、CEK細胞
APRE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuTu-80細胞、RAW2647細胞、OCI-LY-1細胞
AM38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI8226/S細胞、VMRCLCD細胞、Co 205細胞
UACC-893細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGC27細胞、NCIH810細胞、NB19細胞
PC-3M 2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE510細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞
H-711細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03570細胞、SNK1細胞、NIT-1細胞
PE/CA-PJ-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-OV-433細胞、SUM52細胞、S-16細胞
NB19-RIKEN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MODE-K細胞、NCI-H2342細胞、IPEC-J2細胞
alpha TC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Namalva細胞、H-1688細胞、NCIH2228細胞
hEEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa017C細胞、A-2780細胞、MM.1S細胞
GM04678細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388細胞、L cells (TK-)細胞、GCT細胞
J774 A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-1040細胞、F-81細胞、MCA205細胞
NIH:OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca9-22細胞、HCT-GEO細胞、Hs870T細胞
A431/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2135細胞、MCF12F細胞、LMTK-細胞
SK-MES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624-mel細胞、BBE細胞、MPP 89細胞
M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-1細胞、COLO-320細胞、MDA-MB-435S細胞
WM-2664細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mahlavu細胞、SNUC2B細胞、MDCK supertube細胞
SW.620細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-215細胞、MCCAR細胞、SK-NMC細胞
H1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-14細胞、QGY7703細胞、NE1-E6E7細胞
Scott and White No. 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H735細胞、MCF-7ADR細胞、NCIH740細胞
HR8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL10細胞、LS174T細胞、DMS153細胞
OLN93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical Research Council cell strain-5細胞、Panc 02.03細胞、SCC 15細胞
KP-N-RT-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-116細胞、190PT細胞、VERO C 1008細胞
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CCD-18Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW 01細胞、NCI-157細胞、A2780 CP70細胞
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OVCA-420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m5F細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞、Pa14C細胞
hRMECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAS4細胞、LSECs細胞、NCI-H1672細胞
TE-85 clone 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞
YD38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-J細胞、OVCAR-8/ADR細胞、143B細胞
NS1-1 Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1238細胞、PANC1005細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞
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A549 ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit 225細胞、MHH-CALL-2細胞、CAL12T細胞
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