"L-5178-Y細(xì)胞：小鼠淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：懸浮
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
細(xì)胞培養(yǎng)方面注意的幾點(diǎn)：無菌意識要強(qiáng)：實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺以紫外燈照射３０分鐘滅菌，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟超凈工作臺風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后，才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株，以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后，將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺，以７０%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暫時(shí)放置，其它個人實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)立即拿出。實(shí)驗(yàn)用品以７０%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在中央無菌區(qū)域，一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實(shí)驗(yàn)物品，避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口，亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后，以手夾住瓶蓋并握住瓶身，傾斜約４５°角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基：不同的細(xì)胞可能培養(yǎng)基不同，甚至不同的文獻(xiàn)可能對相同的細(xì)胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當(dāng)時(shí)培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞，有文獻(xiàn)就選用neurobase培養(yǎng)基，而我的實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹饕亲隹寡趸脱趸矫娴?，而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分，此時(shí)，我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:４℃冰箱全溶后再分裝，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指５６℃，３０分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到５６℃后，將血清放入，待溫度升高到５６℃后計(jì)時(shí)，一般５分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須，一般不要作此熱處理，因?yàn)闀斐沙恋砦镏@著增多，且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細(xì)胞的影響。
可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞不行了，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣的，大家爭取做到因材施教，比如試試下面的“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例），具體操作：1)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍（目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉）。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了）3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比)4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況把握）。
因?yàn)榧?xì)胞生長的時(shí)候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細(xì)胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細(xì)胞，單個細(xì)胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話，傳代后細(xì)胞是不能貼壁的，這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會死亡。所以，消化傳代的時(shí)候一定要將細(xì)胞消化成單個單個的獨(dú)立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因?yàn)樗麤]有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開，受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開。這個是很重要的一點(diǎn)。尤其是對于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-２細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長滿的時(shí)候才去消化傳代。要在細(xì)胞長到７０%左右的時(shí)候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時(shí)候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時(shí)候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞，你在洗的時(shí)候如果是用無血清１６４０去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細(xì)胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多，還會后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn)：傳代時(shí)PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時(shí)間，等到細(xì)胞一個個分離開來的時(shí)候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時(shí)間，不能時(shí)間太過了，要不然損傷細(xì)胞，細(xì)胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個的時(shí)候，或者臨時(shí)沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細(xì)胞。
P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN93細(xì)胞、Panc 2.03細(xì)胞、H-740細(xì)胞
HFSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：526-mel細(xì)胞、C4-I細(xì)胞、TE15細(xì)胞
RCC-JF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞、T47D細(xì)胞、EFM19細(xì)胞
HL-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-813細(xì)胞、CX-1細(xì)胞、KNS62細(xì)胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC2細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞
SNU368細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-4細(xì)胞、GM02219細(xì)胞、Detroit562細(xì)胞
P-815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞
S.B.細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7402細(xì)胞、HEK-293-EBNA細(xì)胞、DU 145細(xì)胞
SK-N-BE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNT8細(xì)胞、NCI-H676B細(xì)胞、SUM159細(xì)胞
PC14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LMTK-細(xì)胞、Sup T-1細(xì)胞、HOPC細(xì)胞
Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA157細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞、SNU119細(xì)胞
SK Mel 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Earle's L cells細(xì)胞、SNK-6細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞
RCK-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞、WC00079細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞
SW1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-GEO細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞
Chang liver細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS-7細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞
RT4-D6-P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI.1細(xì)胞、H-2196細(xì)胞、AR-42J細(xì)胞
RT4-D6-P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI.1細(xì)胞、H-2196細(xì)胞、AR-42J細(xì)胞
SR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1788細(xì)胞、CaEs17細(xì)胞、MALME.3M細(xì)胞
Hs 766.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH838細(xì)胞、HPMC細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞
SUM 52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKa-C-1細(xì)胞、HT 1376細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞
PL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PSN-1細(xì)胞、JM-Jurkat細(xì)胞、SK-N-FI細(xì)胞
MDCKII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H774細(xì)胞、EoL-1-cell細(xì)胞、HCE細(xì)胞
SBC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-LM細(xì)胞、Soleus clone 8細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞
OVCAR.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM細(xì)胞、BeWo細(xì)胞、MDCC MSB1細(xì)胞
BHK-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGP 1細(xì)胞、U266-B1細(xì)胞、SUM-190細(xì)胞
AX-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCMK-1細(xì)胞、OCUM-1細(xì)胞、AE 1201細(xì)胞
HLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-T6細(xì)胞、NCI-H774細(xì)胞、SW-1222細(xì)胞
NCI-SNU-449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-330細(xì)胞、D-341Med細(xì)胞、EOC20細(xì)胞
V 79-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHs 74 Int細(xì)胞、K 562細(xì)胞、AU-565細(xì)胞
HCC-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCaBER細(xì)胞、MOLP8細(xì)胞、HO1-N1細(xì)胞
MM.1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1419細(xì)胞、C-4I細(xì)胞、F36P細(xì)胞
H-1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H841細(xì)胞、HLE細(xì)胞、YH細(xì)胞
DLD-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1419細(xì)胞、BGC-823細(xì)胞、LS1034細(xì)胞
ELD-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP-1細(xì)胞、22Rv-1細(xì)胞、BT-483細(xì)胞
Huh 7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM(TK-)細(xì)胞、SuDHL 2細(xì)胞、UM2細(xì)胞
TKB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Lung-1細(xì)胞、AMC-HN-8細(xì)胞、KYSE270細(xì)胞
U138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT3細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、MSTO-211 H細(xì)胞
NCI-841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-2細(xì)胞、Rat1細(xì)胞、LS180細(xì)胞
WIL2S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW細(xì)胞、HOC細(xì)胞、SF-539細(xì)胞
HepG2-luc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNO1細(xì)胞、TE 671細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞
C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 32細(xì)胞、PIG1細(xì)胞、RPMI-8402細(xì)胞
OVCA433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-9706細(xì)胞、JCA-1細(xì)胞、NCI-H2029細(xì)胞
HOS/MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2347細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞
FL-83B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW954細(xì)胞、Hi-5細(xì)胞、MDA175細(xì)胞
MDCK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR-3細(xì)胞、PNEC30細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞
GM-3573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD18細(xì)胞、COLO-394細(xì)胞、CCRF-CEM C7細(xì)胞
DHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IALM細(xì)胞、CALU 1細(xì)胞、GDM1細(xì)胞
H1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM.1S細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞、HeLa229細(xì)胞
SW480E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-361細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞
H-1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-10細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞
B78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI6666細(xì)胞、SW-1783細(xì)胞、ASH3細(xì)胞
CTX TNA2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB-6 Cl 30細(xì)胞、USMC細(xì)胞、C-32細(xì)胞
T-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-ML2細(xì)胞、Walker 256細(xì)胞、BL-6細(xì)胞
TCCSUP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DiFi細(xì)胞、FOX-NY細(xì)胞、KYSE-70細(xì)胞
H-358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M細(xì)胞、H-2126細(xì)胞、MG-63細(xì)胞
OC316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320HSR細(xì)胞、WEHI-279細(xì)胞、Human Embryo Kidney-2細(xì)胞
Colon-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN 382細(xì)胞、PM6細(xì)胞、COLO 357細(xì)胞
NCI-H1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC-6細(xì)胞、SKO-007細(xì)胞、RPE1細(xì)胞
ASPC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-144細(xì)胞、TE671/RD細(xì)胞、MFM223細(xì)胞
MDA MB 436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266-B1細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞
UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Kidney-2細(xì)胞、TSCCa細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞
M3 Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMy2.CIR細(xì)胞、HN-6細(xì)胞、T/G HA-VSMC細(xì)胞
TE5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN-9D細(xì)胞、NCI-H2066細(xì)胞、TE-5細(xì)胞
DHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 BL6細(xì)胞、HCC-366細(xì)胞、PL-12細(xì)胞
FDC-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT-93細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞
Hs604T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSCCa細(xì)胞、P3X63細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞
LTEP-sm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H146細(xì)胞、293/EBNA細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞
HEK 293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ESC-410細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞、RGC5細(xì)胞
293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-34細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞、RBL-2H3細(xì)胞
Ramos-2G6-4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 549細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞、COS7細(xì)胞
SUM 159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132細(xì)胞、OCILY10細(xì)胞、NCIH1563細(xì)胞
MDA-175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn-5細(xì)胞、H920細(xì)胞、Hs-281-T細(xì)胞
RCC-JF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞、H1618細(xì)胞、TOV112細(xì)胞
SW756細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-1386細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞、HUT-125細(xì)胞
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