"EoL-1細胞:人急性髓系白血病細胞系
細胞背景資料:急性髓系白血病;男性
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
細胞生長特性:懸浮
細胞培養(yǎng)實驗基本操作:①進無菌室前要徹底洗手,按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經過燒灼進行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內的培養(yǎng)液成分如蛋白質等燒焦后會產生有害物質,吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長,以免燒焦產生有毒氣體,危害培養(yǎng)細胞,同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶,開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位,避免直立,以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口,培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話,咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時,應專管專用,一旦發(fā)現吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去,以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應整理好工作臺面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面;防止細胞交叉污染:所有從別處轉來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備,一旦懷疑發(fā)生交叉污染,可做細胞遺傳學方面的鑒定,如發(fā)現原有的細胞遺傳物發(fā)生改變,可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應由兩人獨立進行;無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比,的優(yōu)點是便宜,而且可以稀釋50倍用,而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一種廣譜滅菌劑菌,其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉,熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
公司細胞庫凍存并保種有2300多種各類細胞系。針對每種不同的細胞系,公司摸索并積累了大量細胞培養(yǎng)條件和優(yōu)化參數,為您的細胞實驗保駕護航。細胞培養(yǎng)是生命科學研究中最基礎、也是最常用的實驗手段。從凍存→復蘇→傳代→實驗,在每一次細胞培養(yǎng)的過程中我們都是精心呵護,小心培養(yǎng),心里都是默默承諾:我要護你一世周全!可是可是……無數次細胞都因污染而離我而去,投入的不只是我們貌美如花的青春,還有那一去不復返的經費!在細胞生物學,生物化學,免疫學,神經生物學,病理學……只要涉及細胞的研究領域,都面臨著支原體污染的威脅。在眾多污染物中,也就屬支原體最狡猾了,他最善于隱藏自己,因為被支原體污染的細胞不會馬上死亡,但會改變細胞的新陳代謝,甚至會改變細胞的基因表達譜,我們就這樣被欺騙了無數次,誰讓我們就是個看“顏值”的花癡了。可是我們通過被虐了幾百次的經驗中總結出來,當你的細胞出現了這些癥狀時:生長速率改變;活性減弱;形態(tài)改變;染色體畸變;轉染效率顯著降低;細胞復蘇后存活率降低……。那你就得千萬小心了,也許你的細胞已經被支原體欺凌了!
細胞培養(yǎng)過程中相關問題總結:懸浮性細胞應如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度,重復前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉速,將造成細胞死亡;細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數據上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因;細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質,并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質濾膜;冷凍保存細胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內應有多少細胞濃度?冷凍管內細胞數目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細胞發(fā)生微生物污染時,應如何處理?直接滅菌后丟棄之。
SW 620細胞系相關產品:H-650細胞、SKMEL2細胞、Hs695細胞
MUTZ-3細胞系相關產品:H1915細胞、NCIH1734細胞、DV-90細胞
HDQP1細胞系相關產品:Tissue Culture-1細胞、HuP-T4細胞、Ect1/E6E7細胞
HS-5細胞系相關產品:HEK293-F細胞、HEK293細胞、TN5B14細胞
NCIH128細胞系相關產品:MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、EBTr (NBL-4)細胞、G361mel細胞
MV4II細胞系相關產品:Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、KYSE520細胞、HFLS-RA細胞
L 132細胞系相關產品:Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、MES-13細胞、H1694細胞
RLE-6TN細胞系相關產品:C3H10T1/2CL8細胞、U-251MG細胞、RWPE-1細胞
HIBEC細胞系相關產品:NCI-BL1339細胞、DOK細胞、NG-108-15細胞
C17細胞系相關產品:MDA-453細胞、SK-MEL-31細胞、Tn5B1-4細胞
NBL-S細胞系相關產品:CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞
THLE2細胞系相關產品:7860細胞、SCC90細胞、SNK-6細胞
LSECs細胞系相關產品:NCI-H295細胞、QGY7701細胞、DHL10細胞
CHO細胞系相關產品:MT-2細胞、EVSAT細胞、HECCL-1細胞
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BNL CL2細胞系相關產品:BT 20細胞、MDA2B細胞、Hs-600-T細胞
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Walker256-TC細胞系相關產品:WM239細胞、SW-954細胞、HN4細胞
Hs 839.T細胞系相關產品:NCI-H661細胞、HEK 293細胞、HEK293-A細胞
GM07404D細胞系相關產品:H1838細胞、NS20Y細胞、KP2細胞
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C4-2 Bone metastatic細胞系相關產品:H-82細胞、SW-527細胞、NBL-7細胞
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HEK 293細胞系相關產品:WM266細胞、PaTu8988s細胞、LN382細胞
High 5細胞系相關產品:PANC 327細胞、MA104細胞、MKN7細胞
ACT-1細胞系相關產品:LC-2-Ad細胞、SW1990細胞、H1688細胞
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Panc 05.04細胞系相關產品:QG-56細胞、RCC 786-O細胞、COLO 824細胞
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