"CEM-T4細胞:人急性T淋巴細胞白血病細胞系
細胞背景資料:急性T淋巴細胞白血?。慌?/span>
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性:懸浮
細胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法:傳代培養(yǎng):是指細胞從一個培養(yǎng)瓶以1:2或1:2以上的比例轉(zhuǎn)移,接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細胞,可根據(jù)不同細胞采取不同的方法進行細胞傳代。貼壁生長的細胞用消化法傳代,部分貼壁的細胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代,或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟:①入無菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài),確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預(yù)熱;③超凈臺臺面應(yīng)整潔,用75%酒精棉球擦拭清潔;④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面20min左右,關(guān)閉紫外燈,打開風(fēng)機清潔空氣除去臭氧;⑤點燃酒精燈;取出無菌試管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi);⑥將培養(yǎng)用液瓶口用75%酒精消毒,過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上;⑦倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每個大培養(yǎng)瓶加入1ml胰酶,小培養(yǎng)瓶用量酌減,蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶,使細胞脫離胰酶,然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基,反復(fù)吹打消化好的細胞使其脫壁并分散,再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成細胞懸液,然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋,適度擰緊后稍回轉(zhuǎn),以利于CO2的進入,將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱;⑩對懸浮培養(yǎng)細胞,步驟7-9不做。直接將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清,加入新鮮培養(yǎng)基,然后分裝到各瓶中。
公司細胞庫凍存并保種有2300多種各類細胞系。針對每種不同的細胞系,公司摸索并積累了大量細胞培養(yǎng)條件和優(yōu)化參數(shù),為您的細胞實驗保駕護航。細胞培養(yǎng)是生命科學(xué)研究中最基礎(chǔ)、也是最常用的實驗手段。從凍存→復(fù)蘇→傳代→實驗,在每一次細胞培養(yǎng)的過程中我們都是精心呵護,小心培養(yǎng),心里都是默默承諾:我要護你一世周全!可是可是……無數(shù)次細胞都因污染而離我而去,投入的不只是我們貌美如花的青春,還有那一去不復(fù)返的經(jīng)費!在細胞生物學(xué),生物化學(xué),免疫學(xué),神經(jīng)生物學(xué),病理學(xué)……只要涉及細胞的研究領(lǐng)域,都面臨著支原體污染的威脅。在眾多污染物中,也就屬支原體最狡猾了,他最善于隱藏自己,因為被支原體污染的細胞不會馬上死亡,但會改變細胞的新陳代謝,甚至?xí)淖兗毎幕虮磉_譜,我們就這樣被欺騙了無數(shù)次,誰讓我們就是個看“顏值”的花癡了??墒俏覀兺ㄟ^被虐了幾百次的經(jīng)驗中總結(jié)出來,當(dāng)你的細胞出現(xiàn)了這些癥狀時:生長速率改變;活性減弱;形態(tài)改變;染色體畸變;轉(zhuǎn)染效率顯著降低;細胞復(fù)蘇后存活率降低……。那你就得千萬小心了,也許你的細胞已經(jīng)被支原體欺凌了!
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
H2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alphaTC clone 6細胞、Med 341細胞、MKN74細胞
Hs1.Tes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hCMEC/D3細胞、UT7細胞、RPTEC/TERT 1細胞
GT38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOG細胞、CoCL3細胞、Mv 1 Lu細胞
Dami細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1954細胞、SK-NMC細胞、U-138MG細胞
MDA1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-549細胞、CEM/C1細胞、MN-60細胞
GH3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC090細胞、HCT15細胞、293T細胞
AM-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK52E細胞、EBNA-293細胞、HN-6細胞
P3JHR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMC7細胞、ECC-10細胞、JB6Cl30細胞
GL261細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02131細胞、SK-N-MC細胞、HuH-1細胞
EBNA-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE(1)細胞、QBC(939)細胞、GP5d細胞
VM-CUB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC4細胞、MSCs(mUCMSCs)細胞、SW-948細胞
NCI-H711細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63/Ag8細胞、BEL-7405細胞、EoL-1-cell細胞
ME180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1-a細胞、L78細胞、Fetal Human Colon細胞
NCIH1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHG-5細胞、293-GP細胞、JIII細胞
APRE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuTu-80細胞、RAW2647細胞、OCI-LY-1細胞
HCC1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE280細胞、A549-Taxol細胞、SKO3細胞
HCC1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE280細胞、A549-Taxol細胞、SKO3細胞
C-127細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McARH7777細胞、TOV112細胞、BPH-1細胞
ARH77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-9細胞、SNU407細胞、P19細胞
hTERT RPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY-7703細胞、CCRFCEM細胞、G519細胞
NCIH1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC5細胞、PLA801-95D細胞、HRA19細胞
WERI-Rb1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GCT細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、CAOV3細胞
OCIAML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BetaTC6細胞、GM2132細胞、HS-5細胞
WM115mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc203細胞、HTori-3.1細胞、UCLA RO-81A-1細胞
SUM149細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM7細胞、PA317細胞、SP-2/0-AG14細胞
CEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FCCH1024細胞、U266S細胞、H-2342細胞
PC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lec1細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞、H2141細胞
A 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC-SRA 01/04細胞、MMAc-SF細胞、MSB1細胞
SK.MEL.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Strain KB細胞、NIH-3T3-L1細胞、95-D細胞
H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1882細胞、SK N SH細胞、CEM.C1細胞
VAESBJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ELD-1細胞、NCI-H322T細胞、MyLa2059細胞
PBL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35細胞、RAW 264.7細胞、MA-782細胞
G292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb 2細胞、HS940細胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞
Sp2/0-Ag14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL5細胞、OCI-Ly 8細胞、CEMO-1細胞
NCI-H2342細胞系相關(guān)產(chǎn)品:174xCEM.T2細胞、NCIH889細胞、hEEC細胞
SK-LU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 3細胞、LN 382細胞、211H細胞
Epstein-Barr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG44細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞、NEC-8細胞
CEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、343 MG細胞、MALME 3M細胞
CX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA-Pa-Ca-2細胞、BV-2細胞、GM03320細胞
C33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly03細胞、A-498細胞、NGP細胞
MDCKII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H774細胞、EoL-1-cell細胞、HCE細胞
CEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、343 MG細胞、MALME 3M細胞
WEHI-279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31FUJ細胞、LICCF細胞、PC14細胞
HUT-226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC23細胞、COLO-699細胞、OVCAR10細胞
HCC1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA420細胞、GM03569細胞、COV-434細胞
AZ521細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6 Swiss Albino細胞、X63Ag8-653細胞、Uhth-74細胞
U937細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kasumi-6細胞、Rat Lung-65細胞、SF 126細胞
PLA801D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388-D1細胞、LU-65M細胞、LTEP-a-2細胞
138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-9724細胞、A-204細胞、C2BBe1細胞
MC-116細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC3細胞、NPA87-1細胞、H-510細胞
COLO-738細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、M3 Clone M-3細胞、GM05862細胞
FL-83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW954細胞、Hi-5細胞、MDA175細胞
GTL 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FO [Mouse myeloma]細胞、UPCISCC154細胞、MDAMB436細胞
JG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC9細胞、High5細胞、MFE-296細胞
H-2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori 3細胞、PANC3.27細胞、C1R細胞
HCC-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞
PC-9/GR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞
RPMI-2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-021細胞、NHLF細胞、H-1648細胞
A375.S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-153細胞、NH6細胞、NOZAWA細胞
Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIM 1215細胞、HMC-1細胞、HuH28細胞
LAN-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10細胞、HCC941122細胞、HEM-L細胞
H1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye細胞、GM03671C細胞、GM2131細胞
hEEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa017C細胞、A-2780細胞、MM.1S細胞
SK.OV.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HME1細胞、NUGC2細胞、Emory University-2細胞
SSP-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH 3T3細胞、MDCK細胞、MCF10-A細胞
HL-60 Clone 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHUA細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞、TE-6細胞
McA-RH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1373細胞、SUM-149細胞、SMC-1細胞
SU-DHL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH8994細胞、NPC-TW 01細胞、H184A1細胞
H865細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293FT細胞、B16F0細胞、R-1059-D細胞
RenCa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIE 115細胞、SVOG細胞、MT-2細胞
NCIH69細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD 2細胞、Panc 08.13細胞、P3J.HR1K細胞
AR-42J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC4細胞、Swiss 3T6細胞、Huh7.5.1細胞
GT1-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LY-R細胞、H1703細胞、mIMCD3細胞
TPC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7703細胞、Panc327細胞、870細胞
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