"RPMI-8402細胞:人急性T淋巴細胞白血病細胞系
細胞背景資料:急性T淋巴細胞白血??;女性
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性:懸浮
細胞培養(yǎng)方面注意的幾點:無菌意識要強:實驗進行前,超凈臺以紫外燈照射30分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟超凈工作臺風扇運轉(zhuǎn)數(shù)分鐘后,才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株,以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后,將實驗物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。無菌操作工作區(qū)域應保持清潔及寬敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暫時放置,其它個人實驗用品用完應立即拿出。實驗用品以70%乙醇擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作應在中央無菌區(qū)域,一般勿在邊緣區(qū)域操作。小心取用無菌之實驗物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實驗。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。選擇正確的培養(yǎng)基:不同的細胞可能培養(yǎng)基不同,甚至不同的文獻可能對相同的細胞培養(yǎng)基成分也是可能不同的。如我當時培養(yǎng)神經(jīng)干細胞,有文獻就選用neurobase培養(yǎng)基,而我的實驗目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而這種培養(yǎng)基中含有抗氧化劑成分,此時,我就不得不選擇另外一種不含抗氧化劑的培養(yǎng)基。瓶裝血清一定要逐步解凍:4℃冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已完全解凍之血清。水浴鍋升到56℃后,將血清放入,待溫度升高到56℃后計時,一般5分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,一般不要作此熱處理,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響。
公司細胞庫凍存并保種有2300多種各類細胞系。針對每種不同的細胞系,公司摸索并積累了大量細胞培養(yǎng)條件和優(yōu)化參數(shù),為您的細胞實驗保駕護航。細胞培養(yǎng)是生命科學研究中最基礎、也是最常用的實驗手段。從凍存→復蘇→傳代→實驗,在每一次細胞培養(yǎng)的過程中我們都是精心呵護,小心培養(yǎng),心里都是默默承諾:我要護你一世周全!可是可是……無數(shù)次細胞都因污染而離我而去,投入的不只是我們貌美如花的青春,還有那一去不復返的經(jīng)費!在細胞生物學,生物化學,免疫學,神經(jīng)生物學,病理學……只要涉及細胞的研究領(lǐng)域,都面臨著支原體污染的威脅。在眾多污染物中,也就屬支原體最狡猾了,他最善于隱藏自己,因為被支原體污染的細胞不會馬上死亡,但會改變細胞的新陳代謝,甚至會改變細胞的基因表達譜,我們就這樣被欺騙了無數(shù)次,誰讓我們就是個看“顏值”的花癡了??墒俏覀兺ㄟ^被虐了幾百次的經(jīng)驗中總結(jié)出來,當你的細胞出現(xiàn)了這些癥狀時:生長速率改變;活性減弱;形態(tài)改變;染色體畸變;轉(zhuǎn)染效率顯著降低;細胞復蘇后存活率降低……。那你就得千萬小心了,也許你的細胞已經(jīng)被支原體欺凌了!
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
MFE-296細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIG1細胞、H-747細胞、A375mel細胞
H-2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞
KYSE520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-85細胞、Lewis lung carcinoma細胞、LC-2 ad細胞
HEK293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63Ag8.653細胞、SKG3A細胞、B4G12細胞
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 12細胞、NCI-H810細胞、Hs 578.T細胞
KOPN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1954細胞、FRO 81-2細胞、SW 1088細胞
HBdSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 52細胞、IHH細胞、H526細胞
HM1900細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 636.T細胞、RFL6細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞
MPC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL9細胞、MC 116細胞、H1355細胞
SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR8348細胞、OCI-Ly 1細胞、NCI-SNU-878細胞
AML-193細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU878細胞、KYSE 30細胞、Kelly細胞
NL-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RERF-LC-MS細胞、9L細胞、Hs832.Tc細胞
Hep 3B2_1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMMC 7721細胞、QGP 1細胞、HEH2細胞
D10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDLM2細胞、ACC-2細胞、AAV293細胞
SUM159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS153細胞、KMH2細胞、BJA-B-1細胞
NS20Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-782細胞、bEnd.3[BEND3]細胞、Mc Coy細胞
R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞
253J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3569細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞、RT4P細胞
PC3-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 611.T細胞、H-647細胞、HO-8910細胞
DU145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKN細胞、Mc Coy細胞、1.1B4細胞
HCe-8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-16細胞、UACC893細胞、OCIAML5細胞
UMNSAH-DF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC10細胞、BE(2)-M17細胞、CAL-12T細胞
DMS114細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2細胞、Nb 2細胞、HCC-9204細胞
SK Mel 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Earle's L cells細胞、SNK-6細胞、Mono Mac 6細胞
NIH-3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sup T-1細胞、B4G12細胞、RM1細胞
U138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT3細胞、Y3.AG.1.2.3細胞、MSTO-211 H細胞
RD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB231細胞、Hs281T細胞、KYSE0410細胞
S37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE135-E6E7細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞、NCIH716細胞
WC00079細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549ATCC細胞、MKN74細胞、D 407細胞
HCT-FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 50細胞、H3255細胞、HCT-8細胞
MCF7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHG5細胞、GES-1細胞、L132細胞
P388D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7ADR細胞、LTEP-sm細胞、HCC-70細胞
H35 Reuber細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-1細胞、RN細胞、MMAc-SF細胞
G361-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-5細胞、TK-1細胞、REC 1細胞
Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS852.T細胞、NCI-H146細胞、Giant Cell Tumor細胞
T1-73細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PM6細胞、C12細胞、CL MC/9細胞
HUSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-847細胞、Hep G2細胞、COLO 320F細胞
C17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-453細胞、SK-MEL-31細胞、Tn5B1-4細胞
H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUD-4細胞、MDA MB 231細胞、SUM-52PE細胞
OVCAR.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2052細胞、LCLC103H細胞、NS1-Ag4細胞
HepG2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-102PT細胞、HUCCT1細胞、LS411細胞
SHI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAG細胞、U266 Bl細胞、LIM1215細胞
AHH-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Be Wo細胞、3T6-Swiss albino細胞、WEHI231細胞
BBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kupffer細胞、Y1細胞、HuCCT-1細胞
NTERA-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCMK1細胞、FD-LSC-1細胞、NCI-H378細胞
A 375細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 746T細胞、MCF-7/ADR細胞、451Lu細胞
NW-MEL-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2(LLc1)細胞、D324 Med細胞、NCIH1944細胞
SK MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Colon細胞、NP69細胞、HREC細胞
32D/cl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-II-E-C3細胞、Hs746-T細胞、EM-3細胞
HUASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC11細胞、SKLU01細胞、hTERT-HME1細胞
L細胞:細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IBMF-7細胞、Hs839T細胞、SUM102PT細胞
SNK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 966SK細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-2085細胞
8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB1細胞、BMDC細胞、WM 2664細胞
SGC7901細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Daoy細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDA-415細胞
H524細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-60細胞、H1781細胞、GM3569細胞
VP267細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adult Retinal Pigment Epithelial細胞:-19細胞、COV-434細胞、H2029細胞
SW-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B35細胞、RH35細胞、MCF-7B細胞
HuTu 80細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT483細胞、MPC-83細胞、Nakata-1細胞
NCI-H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-H細胞、NCI660細胞、JVM3細胞
LLC-MK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-9細胞、SN12CPM6細胞、NCI-H1734細胞
GES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293FT細胞、Hs832.Tc細胞、MG-HU-3細胞
NCI-HUT-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J HR-1細胞、RS(4;11)細胞、MF2059細胞
Huh7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H716細胞、MM96L細胞、LoMeT-ccRcc細胞
C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-024細胞、NCI-H1693細胞、MDAMB453細胞
MDCK supertube細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MF2059細胞、NCIH1693細胞、NBL-4細胞
BEAS2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞
CoCL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1355細胞、H2228細胞、T-ALL1細胞
BC3H1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T9細胞、OC 316細胞、NS-20Y細胞
HONE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2 (174 x CEM.T2)細胞、TR-146細胞、Rin-M-5F細胞
B-CPAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MuM-2C細胞、SW 527細胞、KYSE 30細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YH-13細胞、MS-751細胞、LK2細胞
SW-579細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML3細胞、P30/0HK細胞、CAL 78細胞
KYSE-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bx-PC3細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞、Bovine ENDometrial cells細胞
NT2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FC33細胞、16-HBE細胞、RA-FLSs細胞
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