"J-111細(xì)胞:人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:?jiǎn)魏思?xì)胞白血病
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:懸浮
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性:懸浮
購買細(xì)胞注意事項(xiàng):1)收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系;2)仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等;3)用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次;4)建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。【細(xì)胞傳代操作步驟】一、貼壁細(xì)胞傳代:1)提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi);2)吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞;3)加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用;4)用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡;5)將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。二、懸浮細(xì)胞傳代:1)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min;2)棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液;3)將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
我們都知道世界宇宙浩瀚無極,除了我們知道的地球、太陽、月球、銀河系以外還有好多其他宇宙行星,這樣的世界對(duì)于很多人來說很陌生稀奇甚至無法想象,這樣的世界同樣也是我們無法觸摸的,然而還有一個(gè)微觀的世界也是我們無法接觸的,這個(gè)就是——細(xì)胞里的微觀世界。對(duì)于很多人來說,除了從書本上簡(jiǎn)單了解植物細(xì)胞的知識(shí)以外,在行業(yè)外人的意識(shí)里,細(xì)胞還是一個(gè)讓人一頭霧水的詞語,甚至都是一個(gè)無形的存在,更別提描述和看見這個(gè)東西,但是對(duì)于行業(yè)內(nèi)的生物科學(xué)研究者和醫(yī)學(xué)研究者,這是個(gè)經(jīng)常被運(yùn)用到的必需之物,用宇宙世界的包含于被包含的關(guān)系把細(xì)胞的微觀世界剖析開來,讓我們了解到細(xì)胞是什么樣的東西及應(yīng)用和未來世界細(xì)胞在生命中的重要作用。細(xì)胞發(fā)炎——心臟疾??;DNA受損——癌癥;細(xì)胞能量衰退——腎功能衰竭、關(guān)節(jié)炎、帕金森氏;老化蛋白堆積——糖尿病、癡呆癥、心腦血管疾?。凰械乃ダ虾图膊《际菣C(jī)體內(nèi)細(xì)胞開的損傷、衰老和死亡造成的。所以細(xì)胞在科學(xué)研究和醫(yī)學(xué)研究中有著重要的應(yīng)用作用,尤其是原代細(xì)胞,它是從機(jī)體組織中分離提取培養(yǎng),它可以作為一種科研材料幫助研究者進(jìn)行項(xiàng)目研究和課題研究,也可以幫助醫(yī)學(xué)者進(jìn)行疾病研究和疾病試驗(yàn),試想從人體組織中分離培養(yǎng)的細(xì)胞經(jīng)過醫(yī)學(xué)藥物的試驗(yàn)再運(yùn)用到人體身上,無論從功效還是結(jié)果上效果都是。
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題:可以這樣說,對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞,每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題,自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞,狀態(tài)越來越差勁了。對(duì)于這個(gè)問題,可以非常肯定地說,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細(xì)胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個(gè)問題就是,細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的,他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細(xì)胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察,待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對(duì)比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細(xì)胞間隙明顯,細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實(shí)際情況你自己把握)。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步,對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低,保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了,如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外,還有一個(gè)更重要的作用就是,可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài),不成片不連體。
UCLA RO-81A-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞、Hep3B細(xì)胞、M14-MEL細(xì)胞
SW1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE0520細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞、NCI-H719細(xì)胞
RPMI 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 53細(xì)胞、SR-786細(xì)胞、SN12C-PM6細(xì)胞
SJSA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L2細(xì)胞、CL34細(xì)胞、SHG44細(xì)胞
A172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 8細(xì)胞、SN12C-PM6細(xì)胞、RPMI-7951細(xì)胞
BV-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG IIIa細(xì)胞、INS1-E細(xì)胞、Mo7e細(xì)胞
C26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS123細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞、H9c2細(xì)胞
EU-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-11細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞、NCI-H1404細(xì)胞
BV173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC-5細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞、HS-445細(xì)胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs729T細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞
MC 3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUNE1細(xì)胞、WBF344細(xì)胞、OE19細(xì)胞
Ramos (RA 1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hESC細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞
JHH-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03671細(xì)胞、Hs_578t細(xì)胞、HBE 135-E6E7細(xì)胞
G-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-CH1細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞、H-647細(xì)胞
373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OEC19細(xì)胞、MAVER1細(xì)胞、NCIH295R細(xì)胞
Hs683T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1836細(xì)胞、PBL細(xì)胞、HTori3細(xì)胞
Hs683T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1836細(xì)胞、PBL細(xì)胞、HTori3細(xì)胞
3T6 Swiss Albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283-MED細(xì)胞、NCI H23細(xì)胞、TI-73細(xì)胞
MDA231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JURKAT E-61細(xì)胞、Panc813細(xì)胞、KU-812細(xì)胞
MDA-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC-1細(xì)胞、SO-Rb 50細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞
NCI-H1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-174細(xì)胞、H-889細(xì)胞、Jurkat-E6細(xì)胞
Ramos G6.C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-579細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞、MDA-MB-175VII細(xì)胞
hTERTHME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-3細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞、LY-R細(xì)胞
NCI-H2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1299細(xì)胞、OCI-LY-19細(xì)胞、H1435細(xì)胞
BTI-TN5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HASMC細(xì)胞、NTera 2/cl.D1細(xì)胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞
GM03190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1092細(xì)胞、H69細(xì)胞、WiDr/S細(xì)胞
MDAPCa-2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV-112D細(xì)胞、U-373MG細(xì)胞、HS-683細(xì)胞
HEC1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK 2細(xì)胞、MIMVEC細(xì)胞、OE-21細(xì)胞
P3X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293A細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞、SNU407細(xì)胞
COLO-699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LI7細(xì)胞、CMT-64細(xì)胞、BSC-1細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Det. 562細(xì)胞、MV522細(xì)胞、MAC1細(xì)胞
Tissue Culture-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA-46細(xì)胞、HCC1419細(xì)胞、WC00059細(xì)胞
BERH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1-S細(xì)胞、HL-7702細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞
HT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDC-P1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞、OK細(xì)胞
Reh細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA922細(xì)胞、BT-474細(xì)胞、FHs74 Int細(xì)胞
LA-N-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1781細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞、KLN 205細(xì)胞
Ramos-RA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-740細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞、870細(xì)胞
High-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH446細(xì)胞、CL-40細(xì)胞、HCC-1359細(xì)胞
H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo16細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞、NCI-H1666細(xì)胞
HL-60 Clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHUA細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞、TE-6細(xì)胞
NRK52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1500細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞
PAN 02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFM-223細(xì)胞、MTEC1細(xì)胞、RAW-264.7細(xì)胞
C-643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD293細(xì)胞、RA.1細(xì)胞、Granta519細(xì)胞
SN-12C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL 3A細(xì)胞、KM.12細(xì)胞、MCF7細(xì)胞
DLM8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFH細(xì)胞、U-343細(xì)胞、CC-LP-1細(xì)胞
NCI-H498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE1-hTERT細(xì)胞、B16 subline B78細(xì)胞、22Rv-1細(xì)胞
HCT15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-3J細(xì)胞、HuT 102細(xì)胞、OVCAR 8細(xì)胞
Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEK細(xì)胞、HB 611細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞
PANC1005細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2198細(xì)胞、N-87細(xì)胞、MOLM-16細(xì)胞
OCI Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-3255細(xì)胞、M-20細(xì)胞、HCC70細(xì)胞
KPNRTBM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D clone3細(xì)胞、H 9細(xì)胞、CP-70細(xì)胞
Neuro 2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A10細(xì)胞、HCC-95細(xì)胞、OLN 93細(xì)胞
G-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-CH1細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞、H-647細(xì)胞
RH8994細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVGp12細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞
LM-TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTC細(xì)胞、ID8細(xì)胞、GC-2spd(ts)細(xì)胞
T47-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 1210細(xì)胞、EFM-19細(xì)胞、CAL 33細(xì)胞
KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL1細(xì)胞、H-2171細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞
LC-1 sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM/C1細(xì)胞、NCI-H1618細(xì)胞、Bac1 2F5細(xì)胞
HSC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP 92細(xì)胞、Dami細(xì)胞、SNU620細(xì)胞
HGSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE12細(xì)胞、RC92A細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞
COR-L 105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP212細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞
BPH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118MG細(xì)胞、MDA-MB-435-S細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞
CEMC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DK-MG細(xì)胞、H9c2 (2-1)細(xì)胞、MDCK.2細(xì)胞
NCI-H820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31/FUJ細(xì)胞、Caco 2細(xì)胞、HHUA細(xì)胞
H-226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSC96細(xì)胞、CAL 62細(xì)胞、NCI-H28細(xì)胞
SW480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAEpiC細(xì)胞、SK-LMS-1細(xì)胞、TK-1細(xì)胞
16-HBEo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞
Eca 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910/PM細(xì)胞、PC 12細(xì)胞、SNU869細(xì)胞
NCIH1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P 815細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞
HPMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-mock細(xì)胞、GEO細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞
NH6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac6細(xì)胞、GM05384細(xì)胞、SUPB15細(xì)胞
C32-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLAG-66細(xì)胞、SUDHL6細(xì)胞、GM01232E細(xì)胞
RPMI 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 53細(xì)胞、FLS細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞
HCE-2 [50.B1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMCG-1細(xì)胞、Hut292細(xì)胞、NUGC2細(xì)胞
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