"SU-DHL-1細(xì)胞:人間變性大細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:間變性大細(xì)胞淋巴瘤;胸腔積液轉(zhuǎn)移;男性
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:懸浮
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性:懸浮
細(xì)胞培養(yǎng)無菌操作的演示:凡是帶入超凈工作臺內(nèi)的酒精、PBS、培養(yǎng)基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表面;靠近酒精燈火焰操作。器皿使用前必須過火滅菌,繼續(xù)使用的器皿(如瓶蓋、滴管)要放在高處,使用時仍要過火。各種操作要靠近酒精燈,動作要輕、準(zhǔn)確,不能亂碰。如吸管不能碰到廢液缸。吸取兩種以上的使用液時要注意更換吸管,防止交叉污染。玻璃器械洗消:一、新的玻璃器皿的洗消:自來水刷洗,除去灰塵。烘干、泡:烤箱中烘干,然后再浸入5%稀中12小時以除去臟物、鉛、等物。刷洗、烘干:12小時后立即用自來水沖洗,再用洗滌劑刷洗,自來水沖干凈后用烤箱烘干;泡酸、清洗:用清潔液浸泡12小時,然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗15次,最后蒸餾水沖洗3-5次和用雙蒸水過3次。烘干、包裝:洗干凈后先烘干,然后用牛皮紙(油光紙)包裝。高壓消毒:包裝好的器皿裝入高壓鍋內(nèi)蓋好蓋子,打開開關(guān)和安全閥,當(dāng)蒸氣成直線上升時,關(guān)閉安全閥,當(dāng)指針指向15磅時,維持20-30分鐘。高壓消毒后烘干。二、舊的玻璃器皿的洗消:刷洗、烘干:使用過的玻璃器皿可直接泡入來蘇爾液或洗滌劑溶液中,泡過來蘇爾溶液(洗滌劑)的器皿要用清水刷洗干凈,然后烘干。泡酸、清洗:烘干后泡入清潔液(酸液),12小時后從酸缸內(nèi)撈出器皿立即用自來水沖洗(避免蛋白質(zhì)干涸后粘附于玻璃上難以清洗),再用蒸餾水沖洗3次。烘干、包裝:洗干凈的器皿烘干后取出用牛皮紙(油光紙)等包裝。
凍存和復(fù)蘇的原則:慢凍快融》當(dāng)細(xì)胞冷到零度以下,可以產(chǎn)生以下變化:細(xì)胞器脫水,細(xì)胞中可溶性物質(zhì)濃度升高,并在細(xì)胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍,可使細(xì)胞逐步脫水,細(xì)胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶;相反,結(jié)晶就大,大結(jié)晶會造成細(xì)胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標(biāo)準(zhǔn)程序:采用細(xì)胞凍存器》當(dāng)溫度在-25℃以上時,1~2℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時,5~10℃/min;當(dāng)溫度達(dá)-100℃時,可迅速放入液氮中。2.簡易程序:將冷凍管(管口要朝上)放入紗布袋內(nèi),紗布袋系以線繩,通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口,按每分鐘溫度下降1~2℃的速度,在40min內(nèi)降至液氮表面過夜,次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序:冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。細(xì)胞凍存方法:1.預(yù)先配制凍存液》(1)8%DMSO+細(xì)胞生長液(92%血清)2.取對數(shù)生長期細(xì)胞,經(jīng)胰酶消化后,加入適量凍存液,用吸管吹打制成細(xì)胞懸液(1×10(6)~5×10(6)細(xì)胞/ml)。3.加入1ml細(xì)胞于凍存管中,密封后標(biāo)記冷凍細(xì)胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細(xì)胞的復(fù)蘇方法:1.快速解凍》凍存細(xì)胞從液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,輕輕搖動冷凍管,使其在1分鐘內(nèi)全部融化(不要超過3分鐘)。2.解凍后的細(xì)胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng),24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液,以去除DMSO。3.如果細(xì)胞對冷凍保護(hù)劑特別敏感解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護(hù)劑,然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。
細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)問題總結(jié):冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37°C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管之爆裂;細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時,是否應(yīng)馬上去除DMSO?除少數(shù)特別注明對DMSO敏感之細(xì)胞外,絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞),在解凍之后,應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中,待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活;培養(yǎng)細(xì)胞時應(yīng)使用5%或10%CO2?或根本沒有影響?一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時,細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用10%CO2;當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時,則應(yīng)使用5%CO2培養(yǎng)細(xì)胞。何時須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?除于特殊篩選系統(tǒng)中外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。
293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1876細(xì)胞、T_T_細(xì)胞、MV4;11細(xì)胞
H-EMC-SS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC-40細(xì)胞、HS 683T細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞
B16-F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh7.5.1細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞、143B TK-細(xì)胞
PAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-8/V細(xì)胞、293/EBNA-1細(xì)胞、2B4-L細(xì)胞
OLN93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞、Panc 02.03細(xì)胞、SCC 15細(xì)胞
RASMCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2932細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞、SKNBE2C細(xì)胞
TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-1155細(xì)胞、H-2052細(xì)胞、Panc05.04細(xì)胞
Hs839.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC154細(xì)胞、VMM39細(xì)胞、Becker細(xì)胞
MHCC 97-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT-26 WT細(xì)胞、U-2OS細(xì)胞、Colon38細(xì)胞
HEK-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTPA細(xì)胞、VAESBJ細(xì)胞、NCIH747細(xì)胞
CNE1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE3A細(xì)胞、C643細(xì)胞、H-889細(xì)胞
AtT20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138MG細(xì)胞、HS-766T細(xì)胞、PA12細(xì)胞
NIH:OVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK 52E細(xì)胞、Epstein-Barr-2細(xì)胞、SR細(xì)胞
SW 620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-650細(xì)胞、SKMEL2細(xì)胞、Hs695細(xì)胞
RPMI-1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940.T細(xì)胞、NCI-HUT-125細(xì)胞、HUASMC細(xì)胞
HUTU80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-LMS-1細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞
HUTU80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-LMS-1細(xì)胞、IPECJ2細(xì)胞、PCI-SG231細(xì)胞
ketr 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTSMC細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞、OVCAR 4細(xì)胞
SW839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-2細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞、SNU182細(xì)胞
RPMI6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF/CEM-C7細(xì)胞、MPP89細(xì)胞、DH 82細(xì)胞
Hs 852.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IR 983F細(xì)胞、HS852.T細(xì)胞、NTC-200細(xì)胞
PG-4 S+L-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLMVEC細(xì)胞、SW-780細(xì)胞、HSC-3細(xì)胞
HOS (TE85)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-IIE-C3細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞
UPCI-SCC-090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U20-S細(xì)胞、R3/1細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞
MGc80-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B細(xì)胞、T98-G細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞
Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE30細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞、Farage細(xì)胞
149 PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578T細(xì)胞、H-9細(xì)胞、SNU878細(xì)胞
FRO81-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m細(xì)胞、SW1088細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞
AML-193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU878細(xì)胞、KYSE 30細(xì)胞、Kelly細(xì)胞
293E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS-1E細(xì)胞、LS 174 T細(xì)胞、SHP77細(xì)胞
NCI-H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-8910PM細(xì)胞、U87MG細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞
NCIH2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KS-SLK細(xì)胞、Mouse Colon 38細(xì)胞、Meat Animal Research Center-145細(xì)胞
NB1RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-2-LUC細(xì)胞、H-1819細(xì)胞、SHIN-3細(xì)胞
CC-LP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2279細(xì)胞、TE-11細(xì)胞、HEC1B細(xì)胞
58F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL CL2細(xì)胞、H1395細(xì)胞、NCI-H2135細(xì)胞
K562/ADP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJRH-30細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞
MB468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt-K2細(xì)胞、BT325細(xì)胞、HEK-293A細(xì)胞
P3-Jiyoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-NFS-60細(xì)胞、SHZ-88細(xì)胞、SK-RC-39細(xì)胞
CT26.CL25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-435細(xì)胞、H-64細(xì)胞、H2122細(xì)胞
A2780/Taxol細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT112細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞、HSC/mHSC細(xì)胞
MGECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKBR-3細(xì)胞、Hs 611.T細(xì)胞、QBC(939)細(xì)胞
H9c2(2-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE296細(xì)胞、PLCPRF5細(xì)胞、HCC0044細(xì)胞
W256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUC細(xì)胞、SNU-739細(xì)胞、SKMES1細(xì)胞
GM04671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HONE-1細(xì)胞、Karpas-299細(xì)胞、H735細(xì)胞
H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-12細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞、H810細(xì)胞
NCIH2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:74Int細(xì)胞、HPAFII細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞
Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172MG細(xì)胞、Tu177細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞
HCC-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞、DMS-273細(xì)胞
Ca759細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:130T細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞、OAC-P4C細(xì)胞
ABC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1869細(xì)胞、L 363細(xì)胞、NCIH1930細(xì)胞
MOLT.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295細(xì)胞、A2780S細(xì)胞、DCS細(xì)胞
CCC-HEH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-4細(xì)胞、Tn5 B1-4細(xì)胞、MESSADX5細(xì)胞
hSCC-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 295細(xì)胞、K1735細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞
HL-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-813細(xì)胞、CX-1細(xì)胞、KNS62細(xì)胞
TALL-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mino細(xì)胞、LTEP-sm 1細(xì)胞、HEK-293-EBNA細(xì)胞
MADB-106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞、MUTZ-1細(xì)胞、Caov-3細(xì)胞
CHOK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC20細(xì)胞、R 1610細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞
PBL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35細(xì)胞、RAW 264.7細(xì)胞、MA-782細(xì)胞
He La細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C81-61細(xì)胞、EST50細(xì)胞、M210B4細(xì)胞
THLE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human podocyte細(xì)胞、SKMES細(xì)胞、95D細(xì)胞
RS4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細(xì)胞、Colo741細(xì)胞、D10G41細(xì)胞
KM932細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-24細(xì)胞、Caco-2細(xì)胞、HRC-99細(xì)胞
SCC 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JTC-39細(xì)胞、RSC96細(xì)胞、Z-138細(xì)胞
Microbiological Associates-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR1K細(xì)胞、KG-1a細(xì)胞、LN 382細(xì)胞
MC3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Li-7細(xì)胞、BV2細(xì)胞、MES-SA-Dx5細(xì)胞
UO-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Kidney-2細(xì)胞、PC2細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞
LADMAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TO175T細(xì)胞、MRC 5細(xì)胞、FHCRC subclone 11細(xì)胞
TE 85 ClF-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV細(xì)胞、Neuro 2a細(xì)胞、NCI-SNU-886細(xì)胞
Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87-1細(xì)胞、Porcine Kidney-15細(xì)胞、IPLB-SF-21細(xì)胞
GM2219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AK細(xì)胞、REC1細(xì)胞、H295細(xì)胞
CNE1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE3A細(xì)胞、SW-1573細(xì)胞、HuP-T3細(xì)胞
B16-F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh7.5.1細(xì)胞、HM1900細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞
SUD4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero from pool #76細(xì)胞、SKNAS細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞
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