"GM12878細(xì)胞:人B淋巴細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:B淋巴細(xì)胞;EBV轉(zhuǎn)化;女性
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):懸浮
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮
細(xì)胞傳代注意事項(xiàng):①傳代培養(yǎng)時(shí)注意無菌操作并防止細(xì)胞間的交叉污染。所有操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作。每種細(xì)胞使用一套器材;②每天觀察細(xì)胞形態(tài),掌握好細(xì)胞是否健康的標(biāo)準(zhǔn):健康細(xì)胞的形態(tài)飽滿,折光性好,生長(zhǎng)致密時(shí)即可傳代;③如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染跡象,應(yīng)立即采取措施,一般應(yīng)棄置污染的細(xì)胞,如果必須挽救,可加含有抗生素的BBS或培養(yǎng)基反復(fù)清洗,隨后培養(yǎng)基中加入較大量的抗生素,并經(jīng)常更換培養(yǎng)基。傳代細(xì)胞的建系和維持:細(xì)胞系的維持通過換液傳代再換液、再傳代和細(xì)胞種子凍存來實(shí)現(xiàn)。對(duì)每一個(gè)細(xì)胞系來說都有其自身的特點(diǎn),要做好建系的維持必須記錄好細(xì)胞檔案,換液傳代和做好細(xì)胞系的管理工作。培養(yǎng)細(xì)胞的凍存及復(fù)蘇:細(xì)胞低溫凍存是培養(yǎng)室常規(guī)工作和通用技術(shù)。細(xì)胞凍存在-196℃液氮中,儲(chǔ)存時(shí)間幾乎是無限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的原則是慢凍快融。
有一些細(xì)胞是數(shù)量多一點(diǎn)比較好生長(zhǎng),生長(zhǎng)狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞。譬如內(nèi)皮細(xì)胞。而有一些是細(xì)胞是數(shù)量少一點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)會(huì)生長(zhǎng)的比較好,譬如巨噬細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞。尤其是巨噬細(xì)胞,生長(zhǎng)速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時(shí)就應(yīng)該留很少量的細(xì)胞,這樣細(xì)胞狀態(tài)會(huì)比較好。并且巨噬細(xì)胞比較喜歡扎堆生長(zhǎng),而堆與堆之間是有空間的。如果長(zhǎng)成相連在一起的一滿片的時(shí)候,細(xì)胞形態(tài)基本上就會(huì)差了,老化的會(huì)比較多,對(duì)后期實(shí)驗(yàn)結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候應(yīng)該摸索該細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)空間密度問題。這個(gè)其實(shí)是有一個(gè)方法可以改善的。對(duì)于貼壁細(xì)胞,如果細(xì)胞形態(tài)不好,(或者細(xì)胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時(shí)候進(jìn)行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進(jìn)行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時(shí)侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細(xì)胞建議只吹打,不消化)其次,把吹打下來的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個(gè)時(shí)間點(diǎn),已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺(tái),底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況以及形態(tài)。通常稱之為“二傳”。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞上乘形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長(zhǎng)得好的細(xì)胞你就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)候再傳。反之亦然。
細(xì)胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細(xì)胞死亡;細(xì)胞之接種密度為何?依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無法生長(zhǎng)之一重要原因;細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動(dòng)物細(xì)胞冷凍保存時(shí)最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細(xì)胞生長(zhǎng)用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時(shí)會(huì)放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級(jí)和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級(jí),必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機(jī)會(huì)。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細(xì)胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽vaporphase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。-20°C不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細(xì)胞欲冷凍保存時(shí),細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度?冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細(xì)胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。
UMRC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞、CMT-93細(xì)胞
PLCPRF5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-II細(xì)胞、QBC939細(xì)胞、L929(NCTC)細(xì)胞
GMK,BSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 85 ClF-5細(xì)胞、HEK-AD293細(xì)胞、HARA-B細(xì)胞
NCI-HUT-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J HR-1細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞、MF2059細(xì)胞
NCI-H2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H102細(xì)胞、Mouse podocyte細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞
PLA-801D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP1細(xì)胞、PMVEC細(xì)胞、NCIH64細(xì)胞
UACC 812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-952細(xì)胞、VMM5細(xì)胞、Tu212細(xì)胞
NIH3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE 37細(xì)胞、Hs294細(xì)胞、HCC38細(xì)胞
Tu212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FOX-NY細(xì)胞、RT4P細(xì)胞、H-1436細(xì)胞
RCC-JF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUVEC-C[HUVEC]細(xì)胞、T47D細(xì)胞、EFM19細(xì)胞
HS5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:huH 1細(xì)胞、PLB985細(xì)胞、COLO829細(xì)胞
Colo320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC/PRF/5細(xì)胞、RBL-I細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞
CORL88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1819細(xì)胞、Vx2細(xì)胞、MESSA/Dx5細(xì)胞
Rainbow Trout Embryo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupB15W細(xì)胞、BOWES細(xì)胞、TOG細(xì)胞
UPCISCC090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞、2PK-3細(xì)胞、3T3F442A細(xì)胞
Hs695細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB4細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞、M109細(xì)胞
Hs695細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB4細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞、M109細(xì)胞
LS-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO678細(xì)胞、ABC1細(xì)胞、K1735細(xì)胞
COLO-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS27細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞、SW900細(xì)胞
JB6 Cl 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞、HEY-A8細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞
Huh-7.5.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-cells細(xì)胞、NPA87細(xì)胞、SMA-560細(xì)胞
HMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)-M17細(xì)胞、SKGT4細(xì)胞、QGP 1細(xì)胞
HuPT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU165細(xì)胞、624-mel細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞
NTERA2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC145細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞、H2195細(xì)胞
BHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEC細(xì)胞、I90細(xì)胞、H2085細(xì)胞
Bovine Turbinate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC-145細(xì)胞、TCC-PAN2細(xì)胞、RPMI-1846細(xì)胞
HCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-AD293細(xì)胞、AG 9細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞
NBL_S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL22細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細(xì)胞
6-10B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ChA-1細(xì)胞、OVCA8細(xì)胞、SU-86-86細(xì)胞
HL60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞、Farage細(xì)胞、MDA MB 436細(xì)胞
HNE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK ES 01細(xì)胞、SK 1細(xì)胞、HOS-MNNG細(xì)胞
A549/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2029細(xì)胞、SW 948細(xì)胞、COLO320 DM細(xì)胞
HSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-596細(xì)胞、Kasumi-1細(xì)胞、NCI-SNU-C2A細(xì)胞
MDA-1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0細(xì)胞、VMM-5A細(xì)胞、SK BR 03細(xì)胞
WM 239-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCP1細(xì)胞、H-2106細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞
H-1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1-Lu細(xì)胞、ES2細(xì)胞、EoL-1細(xì)胞
SNU484細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs819T細(xì)胞、NCIH64細(xì)胞、OV-2008細(xì)胞
COLO 357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB-49細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞、AR42J細(xì)胞
CL1.0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L 105細(xì)胞、M14-MEL細(xì)胞、MMAc-Serum Free細(xì)胞
Oka-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-719細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞、HHFK細(xì)胞
SW839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-2細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞、SNU182細(xì)胞
CF-PAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2452細(xì)胞、P30/Ohkubo細(xì)胞、NCC-IT細(xì)胞
IPLB-SF 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HITT15細(xì)胞、RIN Cl-5F細(xì)胞、CLL-CII細(xì)胞
8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCD細(xì)胞、HCC-4006細(xì)胞、293細(xì)胞
HTR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH2細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞
LS-174細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN-93細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞
Hs 746.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_N_BE2C細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞
210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32 [Human melanoma]細(xì)胞、QSG-7701細(xì)胞、NCIH650細(xì)胞
SBC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC-LM細(xì)胞、Soleus clone 8細(xì)胞、253J-Bladder-V細(xì)胞
SUDHL10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、B16 BL6細(xì)胞、SW1271細(xì)胞
PC-3M-2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GBC-SD細(xì)胞、HUT125細(xì)胞、Jurkat77細(xì)胞
OVCAR432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU-65M細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞、H-2030細(xì)胞
hUC-MSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH378細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞、MXI細(xì)胞
Hs 819.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPVECs細(xì)胞、NU-GC-3細(xì)胞、M3 Clone M-3細(xì)胞
Hs 895 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CP-70細(xì)胞、THP-1細(xì)胞、MLTC-1細(xì)胞
Melan-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC15細(xì)胞、HNE1細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞
Melan-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC15細(xì)胞、HNE1細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞
WM-239A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 410細(xì)胞、BRL-3A細(xì)胞、Mel-624細(xì)胞
H1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞、GM2131細(xì)胞
293c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH23細(xì)胞、UO31細(xì)胞、BC-023細(xì)胞
A.704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-EBNA細(xì)胞、16HBE140細(xì)胞、HSC-2細(xì)胞
CAL-51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 164細(xì)胞、HMVEC細(xì)胞、MC3T3細(xì)胞
SW 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD18Co細(xì)胞、UMUC-14細(xì)胞、CAOV4細(xì)胞
SW 982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Danio rerio Gill細(xì)胞、UWB1.289細(xì)胞、WERI-Rb 1細(xì)胞
MUTZ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKM1細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞、HIT-T15細(xì)胞
MFHL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal fibroblast-10細(xì)胞、KLN205細(xì)胞、H-2198細(xì)胞
SuDHL 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DH 82細(xì)胞、Ly7細(xì)胞、H378細(xì)胞
brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NH-6細(xì)胞、RPMI 7951細(xì)胞、OCI-Ly 3細(xì)胞
RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 266-4細(xì)胞、H-2195細(xì)胞、CCD-112 CoN細(xì)胞
Intestinal Porcine Epithelial細(xì)胞:-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-5細(xì)胞、A-101D細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞
Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:451Lu細(xì)胞、MCF-7/ADR細(xì)胞、REC 1細(xì)胞
NCIH747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 1細(xì)胞、E.G7-OVA細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞
GM637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly19細(xì)胞、NCI-H1563細(xì)胞、MLE 12細(xì)胞
Rat Lung-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-1細(xì)胞、H-508細(xì)胞、TE-85 clone 5細(xì)胞
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