"Loucy細(xì)胞：人淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：懸浮
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：２-３天換液１次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：懸浮生長
細(xì)胞傳代培養(yǎng)的胰酶消化法：傳代培養(yǎng)：是指細(xì)胞從一個培養(yǎng)瓶以１：２或１：２以上的比例轉(zhuǎn)移，接種到另一培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)。傳代細(xì)胞，可根據(jù)不同細(xì)胞采取不同的方法進(jìn)行細(xì)胞傳代。貼壁生長的細(xì)胞用消化法傳代，部分貼壁的細(xì)胞用直接吹打或用硅膠軟刮的刮除法傳代。懸浮細(xì)胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進(jìn)行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進(jìn)行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，確定細(xì)胞是否傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液３７℃下預(yù)熱；③超凈臺臺面應(yīng)整潔，用７５%酒精棉球擦拭清潔；④打開超凈工作臺的紫外燈照射臺面２０min左右，關(guān)閉紫外燈，打開風(fēng)機(jī)清潔空氣除去臭氧；⑤點燃酒精燈;取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮頭;過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)；⑥將培養(yǎng)用液瓶口用７５%酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上；⑦倒掉培養(yǎng)細(xì)胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去殘留的就培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每個大培養(yǎng)瓶加入１ml胰酶，小培養(yǎng)瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察。當(dāng)細(xì)胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細(xì)胞提早脫落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復(fù)吹打消化好的細(xì)胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成細(xì)胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋好瓶蓋，適度擰緊后稍回轉(zhuǎn)，以利于CO２的進(jìn)入，將培養(yǎng)瓶放回CO２培養(yǎng)箱；⑩對懸浮培養(yǎng)細(xì)胞，步驟７-９不做。直接將細(xì)胞懸液進(jìn)行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。
貼壁細(xì)胞凍存注意事項：細(xì)胞凍存液需提前配制，不可直接將DMSO加入細(xì)胞懸液中；不同細(xì)胞消化時間有差異，以實際鏡檢結(jié)果為準(zhǔn)，大部分細(xì)胞回縮變圓并有少量細(xì)胞脫落即可中止消化，消化時間不宜過長；應(yīng)選擇匯合度80%-90%左右，細(xì)胞處于對數(shù)生長期時進(jìn)行凍存操作，確保細(xì)胞凍存時狀態(tài)，凍存密度可根據(jù)細(xì)胞特性進(jìn)行調(diào)整；凍存細(xì)胞保存溫度應(yīng)低于-130℃，不可在-80℃長期保存。貼壁細(xì)胞凍存操作步驟：從培養(yǎng)箱中取出準(zhǔn)備凍存的細(xì)胞；顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)并拍照記錄；酒精消毒培養(yǎng)瓶后放入安全柜中；吸去多余的培養(yǎng)基，加人2~3ml(PBS緩沖液)潤洗一次；加入1ml胰酶，放入37℃消化；消化1min左右，在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況；消化完全后，加3ml完全培養(yǎng)基終止；將細(xì)胞懸液移入15ml離心管中離心，1000rpm/min（約200g）離心3-5min；吸去多余的液體，向細(xì)胞沉淀中加入適量的凍存液，輕輕吸打混勻；按比例分裝至凍存管中；貼好標(biāo)簽后放入梯度凍存盒中；將凍存盒放入-80℃，降溫過夜后，移入液氮中保存。貼壁細(xì)胞凍存實驗準(zhǔn)備事項：將15mL離心管、凍存管、PBS緩沖液、移液管、電動移液器等物品提前放入生物安全柜中，紫外照射30min消毒滅菌；細(xì)胞完全培養(yǎng)基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、細(xì)胞凍存液等從4℃冰箱中取出后，復(fù)溫至室溫，備用；程序降溫盒復(fù)溫至室溫備用。
細(xì)胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié)：懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細(xì)胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度，重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細(xì)胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細(xì)胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細(xì)胞死亡；細(xì)胞之接種密度為何？依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無法生長之一重要原因；細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細(xì)胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細(xì)胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機(jī)會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細(xì)胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細(xì)胞欲冷凍保存時，細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度？冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細(xì)胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細(xì)胞污染？細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。
NCI-H2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_08_13細(xì)胞、Hs606T細(xì)胞、3T3細(xì)胞
Hs 766.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH838細(xì)胞、HPMC細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞
NCIH2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL-22細(xì)胞、FHL-124細(xì)胞、ZYM-SVEC01細(xì)胞
NKT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MASMC細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞、SKMEL5細(xì)胞
JVM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE180細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞
LA 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA-VSMC細(xì)胞、Fao細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞
SP2-0-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-81細(xì)胞、Toledo細(xì)胞、MHH-CALL2細(xì)胞
U-266 AR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC1細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞、H1819細(xì)胞
Intestinal Porcine Epithelial細(xì)胞：-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-5細(xì)胞、A-101D細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞
Douglas Foster-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2227細(xì)胞、APRE-19細(xì)胞、NIH:OVCAR-3細(xì)胞
NCI-H1668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞、HOS TE85細(xì)胞
NCIH358細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOMO-1細(xì)胞、Giant Cell Tumor細(xì)胞、COS-1細(xì)胞
Kasumi 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2-11細(xì)胞、PC.3細(xì)胞、SK_N_FI細(xì)胞
CCRF/CEM-C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLMT-1細(xì)胞、COLO206細(xì)胞、SCCVII/St細(xì)胞
UPCI-SCC-090細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U20-S細(xì)胞、R3/1細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞
BC-021細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、BRL細(xì)胞、MDA-MB 453細(xì)胞
T 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB415細(xì)胞、ECC 10細(xì)胞、SUNE1細(xì)胞
Rat 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMrSV5細(xì)胞、NCI-H1792細(xì)胞、ACT-1細(xì)胞
SuperTube細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1930細(xì)胞、TGW-I-nu細(xì)胞、LM6細(xì)胞
B16BL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMQ細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞、H1755細(xì)胞
CCD-1112sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Carcinoma細(xì)胞、Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞、H727細(xì)胞
Hs 636 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNG-M細(xì)胞、Hs.27細(xì)胞、A-101D細(xì)胞
NOMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Keio University-19-19細(xì)胞、Evsa T細(xì)胞、Kit 225 K6細(xì)胞
SVHUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2052細(xì)胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞
KMS26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kuramochi細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞、3T3 Swiss Albino細(xì)胞
COR-L23/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-E6細(xì)胞、AtT 20細(xì)胞、NALM-6細(xì)胞
SuDHL 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC-M細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞、SK-MEL-28細(xì)胞
NCTC-3960細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM-2細(xì)胞、HuT102細(xì)胞、TPC-1細(xì)胞
Co320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOMEC細(xì)胞、H-508細(xì)胞、SU-DHL1細(xì)胞
MM1.S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TKB1細(xì)胞、LM8細(xì)胞、V-79細(xì)胞
MMQ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞、PANC0504細(xì)胞、EBTr (NBL-4)細(xì)胞
COC1/CDDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA RO-81A-1細(xì)胞、IFRS1細(xì)胞、DHL-6細(xì)胞
HCT FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLAN5T細(xì)胞、MDCK supertube細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞
EPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059J細(xì)胞、SPCA1細(xì)胞、HCC1419細(xì)胞
ANA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBE4細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞
LC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1836細(xì)胞、JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞、CO115細(xì)胞
ONS76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCam 2細(xì)胞、He-La細(xì)胞、MG63細(xì)胞
Farage細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK clone 52E細(xì)胞、NTera2/D1細(xì)胞、H-1522細(xì)胞
RC-4B/C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-948細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞、SK Mel28細(xì)胞
JM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-HU-3細(xì)胞、MOLT 4細(xì)胞、S3-HeLa細(xì)胞
Glioma-261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHP 10-3細(xì)胞、H2141細(xì)胞、COLO 205細(xì)胞
JB-6 Cl 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343 MG細(xì)胞、EC-109細(xì)胞、V79細(xì)胞
hTERT-HPNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8/ADR細(xì)胞、LUDLU1細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞
HIMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-157細(xì)胞、2V6.11細(xì)胞、SCL-2細(xì)胞
UCW 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT 1細(xì)胞、SW839細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞
NCI-H2195細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞、HEK 293 EBNA細(xì)胞、VMCUB1細(xì)胞
COLO 684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-620細(xì)胞、AtT-20細(xì)胞、SKMEL2細(xì)胞
HCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-AD293細(xì)胞、AG 9細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞
BV2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 520細(xì)胞、HCC-2108細(xì)胞、SKG3A細(xì)胞
ZR75_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML193細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞
P30OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat-2細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞、SK-MEL-5細(xì)胞
MDA-330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A-1細(xì)胞、H87細(xì)胞、10RGB細(xì)胞
Fetal Human Lens-124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEnd.3[BEND3]細(xì)胞、A375-S2細(xì)胞、A-431細(xì)胞
MZCRC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT-1A細(xì)胞、YD15細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞
Hs606細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH7細(xì)胞、HDMEC細(xì)胞、Panc 8.13細(xì)胞
MA104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ONS-76細(xì)胞、MOLM16細(xì)胞、HSC1細(xì)胞
SW-1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N-1細(xì)胞、MCF.7細(xì)胞、BEAS2B細(xì)胞
Kit-225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-420細(xì)胞、H4IIEC3細(xì)胞、ABE­8.1/2細(xì)胞
DU-4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1359細(xì)胞、CCD 841 CoTr細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞
RAT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat 2細(xì)胞、Walker256細(xì)胞、P31 FUJ細(xì)胞
W133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN 4細(xì)胞、UPCISCC090細(xì)胞、Sp2/0細(xì)胞
HT-1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞、KBM7細(xì)胞
DV-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca-109細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞
JM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI No. 1846細(xì)胞、Clone Y-1細(xì)胞、H7721細(xì)胞
J-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293EBNA細(xì)胞、MDA-175細(xì)胞、NCI-H2172細(xì)胞
Caco-2 BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 6666細(xì)胞、Human Lung Microvascular Endothelial細(xì)胞：-5a細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞
DoTc2 4510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO201細(xì)胞、SACC-83細(xì)胞、T-47-D細(xì)胞
IPI-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞、TE-14細(xì)胞
LICCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Emory University-3細(xì)胞、DB細(xì)胞、EJ1細(xì)胞
P815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL2細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞
DV90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、H-2087細(xì)胞、H187細(xì)胞
H-2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC 786-O細(xì)胞、FT-293細(xì)胞、HCC-202細(xì)胞
NCIH2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KCL-22細(xì)胞、FHL-124細(xì)胞、hEEC細(xì)胞
HSCT6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC4細(xì)胞、CHG-5細(xì)胞、SUDHL1細(xì)胞
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