"FHC細(xì)胞：人正常結(jié)直腸粘膜細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：胎兒；結(jié)腸；自發(fā)永生；男性
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)：１)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決；２)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過(guò)２０%)，或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長(zhǎng)不均：貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長(zhǎng)，可將細(xì)胞進(jìn)行消化，重懸打散細(xì)胞，加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍，使瓶?jī)?nèi)沒有血清了，減少對(duì)胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細(xì)胞有些消化下來(lái)時(shí)，拿著瓶口，運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體，這樣細(xì)胞很快就下來(lái)了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團(tuán)、絮狀：消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話，一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng)，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來(lái)的趨勢(shì))，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無(wú)血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片)；消化過(guò)度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細(xì)胞，收集全部的細(xì)胞到以無(wú)菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過(guò)程中會(huì)死亡脫落，在換液的時(shí)候可以清除掉！
最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長(zhǎng)，用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來(lái)，很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣，消化下來(lái)也是一團(tuán)的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕，避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快，那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問(wèn)題我覺得有以下幾種可能：一、細(xì)胞消化后吹打不均勻，造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng)：二、細(xì)胞細(xì)化太過(guò)，細(xì)胞成片脫落，吹打時(shí)沒有受力點(diǎn)，細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化，將同次消化下來(lái)的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間，若胰酶處理太久，容易造成細(xì)胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng)，嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn)：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng)，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細(xì)胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
H-2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S-16細(xì)胞、hOMF細(xì)胞、BCaP 37細(xì)胞
TE 354.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFHIOSE-80細(xì)胞、EB-1細(xì)胞、RPMI 7951細(xì)胞
MIN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1568細(xì)胞、10RGB細(xì)胞、LS 123細(xì)胞
GC-1 spg細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H3255細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞、NMC-G1細(xì)胞
A2780CP70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞、THLE2細(xì)胞、B16 melanoma細(xì)胞
KNS-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1876細(xì)胞、RS1細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞
P 3 HR 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-31細(xì)胞、Monomac-1細(xì)胞、NCI-HUT-460細(xì)胞
DV90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、RenCa細(xì)胞、373 MG細(xì)胞
GM03569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA NPA-87-1細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞、BV2細(xì)胞
BCaP-37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-FET細(xì)胞、High Five細(xì)胞、H22-H8D8細(xì)胞
PL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U 266細(xì)胞、HT144-mel細(xì)胞、D10.G4.1細(xì)胞
SNU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA436細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞
SupT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HB611細(xì)胞、HCC1171細(xì)胞、H4-IIE-C3細(xì)胞
J-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293EBNA細(xì)胞、MDA-175細(xì)胞、NCI-H2172細(xì)胞
BLO 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L105細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞、MKN28細(xì)胞
H-510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT28細(xì)胞、Line 207細(xì)胞、McCoy細(xì)胞
H-510A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT28細(xì)胞、Line 207細(xì)胞、McCoy細(xì)胞
LAD2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC-1細(xì)胞、RGB細(xì)胞、WERIRb1細(xì)胞
HCT-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293E細(xì)胞、J-82細(xì)胞、U373 MG細(xì)胞
HR8348細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL10細(xì)胞、LS174T細(xì)胞、DMS153細(xì)胞
UO31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHH-CALL-2細(xì)胞、MV-4:11細(xì)胞、293 HEK細(xì)胞
HT29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 962細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞、HCT_116細(xì)胞
LLC-PK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG細(xì)胞、INS-1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞
MDA175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL28細(xì)胞、HN6細(xì)胞、MDA-MB-435細(xì)胞
H1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888.Lu細(xì)胞、H-2122細(xì)胞、LA795細(xì)胞
ME-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL-6細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞
CAL 120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV-1.K細(xì)胞、D562細(xì)胞、MRC9細(xì)胞
DoTc2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 688(A).T細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞
HeLa S-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa 229細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞
Verda reno細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞、KG1A細(xì)胞
EAHY-926細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCPAN2細(xì)胞、RMS13細(xì)胞、RKOAS451細(xì)胞
SK Col 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC-2細(xì)胞、NCIH2228細(xì)胞、NCI H929細(xì)胞
H-1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A1847細(xì)胞、MDBK (NBL-1)細(xì)胞、D-341Med細(xì)胞
PC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-69細(xì)胞、NCIH2591細(xì)胞、P3X63NS1細(xì)胞
SCC90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO.205細(xì)胞、U-373MG ATCC細(xì)胞、W256細(xì)胞
NCI H69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU.86.86細(xì)胞、CAL51細(xì)胞、SNU-387細(xì)胞
C4 I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander cells細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞
C4 I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander cells細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞
TGBC-11-TKB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI7951細(xì)胞、J82 COT細(xì)胞、LC-1 sq細(xì)胞
SW962細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375.S2細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞、3T6-Swiss albino細(xì)胞
C38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL1細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞
BrCL18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ3細(xì)胞、SKMEL-2細(xì)胞、VK-2/E6E7細(xì)胞
H-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549-Taxol細(xì)胞、NCI-322細(xì)胞、UO-31細(xì)胞
BEP2D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT102細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞
Madison 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-BL2141細(xì)胞、SK RC 52細(xì)胞、H510細(xì)胞
AN3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi 1細(xì)胞、alpha TC1 clone 6細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞
MuM-2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs688(A)T細(xì)胞、Calu6細(xì)胞、OV2008細(xì)胞
GT39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H460細(xì)胞、RPMI8226細(xì)胞、HCC1588細(xì)胞
RBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGROV-1細(xì)胞、HEK 293 c18細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞
NCI.H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THP-1(ATCC)細(xì)胞、P3J HR-1細(xì)胞、NS-I/1細(xì)胞
H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T173細(xì)胞、CMK細(xì)胞、KRCY細(xì)胞
HCC-1806細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324 Med細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞、HCS2/8細(xì)胞
PANC-02-03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-EBNA細(xì)胞、MSTO211H細(xì)胞、MeWo細(xì)胞
HEK AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63.Ag8.653細(xì)胞、C918細(xì)胞、SF-767細(xì)胞
MOLM-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH8994細(xì)胞、Hs 766T細(xì)胞、L-428細(xì)胞
PIGI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL 16細(xì)胞、HS-683細(xì)胞、Y3細(xì)胞
Hep G2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa-229細(xì)胞、GM05887細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞
H1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jiyoye細(xì)胞、GM03671C細(xì)胞、GM2131細(xì)胞
FRTL 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞
K7M2 wt細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caov-4細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞
Hopkins-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKBr3細(xì)胞、H1650細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞
RC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-1細(xì)胞、HPDE細(xì)胞、OKT3細(xì)胞
CHO/dhFr-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK細(xì)胞、NOK細(xì)胞、HT 115細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY10細(xì)胞、RCC23細(xì)胞、CRFK細(xì)胞
HS-683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori3細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞
Panc4.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMG-1細(xì)胞、EB2細(xì)胞、Melanoma 14細(xì)胞
NIH-OVCAR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：251 MG細(xì)胞、Mono-Mac-6細(xì)胞、High-5細(xì)胞
SUM 102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss-3T3細(xì)胞、ID8/MOSEC細(xì)胞、NFS60細(xì)胞
NMCG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00215細(xì)胞、TE-32細(xì)胞、CAL 62細(xì)胞
MIMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780細(xì)胞、CCLP1細(xì)胞、SW-780細(xì)胞
MDA231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JURKAT E-61細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞、Ca9-22細(xì)胞
NCTC-1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-357細(xì)胞、X63-AG 8.653細(xì)胞、Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞
MIN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1568細(xì)胞、PLC/PRF5細(xì)胞、ARIP細(xì)胞
MDCK (NBL-2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAFII細(xì)胞、Tissue Culture-1細(xì)胞、Walker256細(xì)胞
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