"CCD-1095Sk細胞：人乳腺浸潤性導管癌旁皮膚細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉速和時間，轉的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結構特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
MUM2B細胞系相關產(chǎn)品：EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞
HeLa S-3細胞系相關產(chǎn)品：HeLa 229細胞、RFL 6細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞
SNUC2B細胞系相關產(chǎn)品：PaTu 8988 S細胞、H-727細胞、C-28/I2細胞
T47-D細胞系相關產(chǎn)品：L 1210細胞、EFM-19細胞、CAL 33細胞
Hs819T細胞系相關產(chǎn)品：HS-766-T細胞、U2OS細胞、INS1-E細胞
HCC2279細胞系相關產(chǎn)品：HuCC-T1細胞、NCIH446細胞、LIM-1215細胞
HT 1376細胞系相關產(chǎn)品：PG-4(S+L-)細胞、Panc-327細胞、NCIH1993細胞
PLA801C細胞系相關產(chǎn)品：MBT-2細胞、CCD-19Lu細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞系相關產(chǎn)品：A 375細胞、RLE-6TN細胞、NCM-460細胞
MDBK細胞系相關產(chǎn)品：ECC10細胞、U-hth74細胞、HBZY1細胞
G 401細胞系相關產(chǎn)品：PC-9細胞、HO8910細胞、HEB細胞
LM3細胞系相關產(chǎn)品：HCC1500細胞、UCLA-SO-M14細胞、H-35細胞
U937細胞系相關產(chǎn)品：Kasumi-6細胞、Rat Lung-65細胞、SF 126細胞
Hep3B細胞系相關產(chǎn)品：P3J-HR-1細胞、OCI-AML3細胞、IPI-2I細胞
MGH-UI細胞系相關產(chǎn)品：ASH3細胞、Bovine Turbinate細胞、SK-MEL3細胞
TC-1 [Mouse lung]細胞系相關產(chǎn)品：Hs 274細胞、HuH-28細胞、NCIH2023細胞
HGMC細胞系相關產(chǎn)品：MFE 296細胞、DSL-6A/C1細胞、OVCAR-8細胞
U-87-MG細胞系相關產(chǎn)品：MFHL-2細胞、A375細胞、T98 G細胞
GT39細胞系相關產(chǎn)品：NCI.H460細胞、RPMI8226細胞、HCC1588細胞
H-1238細胞系相關產(chǎn)品：ARH77細胞、Anip[973]細胞、THLE-3細胞
NCIH1092細胞系相關產(chǎn)品：RCC-JF細胞、D283細胞、SK-OV-433細胞
A2008細胞系相關產(chǎn)品：OsACL細胞、AU-Mel細胞、H-35 Reuber細胞
FTC-133細胞系相關產(chǎn)品：SNU-C1細胞、SNU-251細胞、NSC34細胞
CWR22-Rv1細胞系相關產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、Hs822T細胞、Panc203細胞
K7M2 wt細胞系相關產(chǎn)品：Caov-4細胞、J-774A.1細胞、Jeko1細胞
Mono-Mac-6細胞系相關產(chǎn)品：KP-N-NS細胞、OSA細胞、P 815細胞
NFHIOSE-80細胞系相關產(chǎn)品：Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞、RBL2H3細胞、COLO394細胞
67NR細胞系相關產(chǎn)品：Hs839T細胞、H2195細胞、LLCMK2細胞
C8166細胞系相關產(chǎn)品：T 84細胞、Pa17C細胞、L-929細胞
Colo320細胞系相關產(chǎn)品：PLC/PRF/5細胞、RBL-I細胞、TERT-RPE1細胞
EST50細胞系相關產(chǎn)品：CCD-1095Sk細胞、GLRK 13細胞、SKES1細胞
U138細胞系相關產(chǎn)品：EJ-1細胞、SW-1353細胞、EC-9706細胞
RL-952細胞系相關產(chǎn)品：B16細胞、BEND細胞、TE3A細胞
NRK-52E細胞系相關產(chǎn)品：Wistar Institute, Susan Hayflick細胞、Mia PACA 2細胞、PC9細胞
AML 12細胞系相關產(chǎn)品：Kit225 K6細胞、NCI-H1882細胞、NCIN87細胞
BHT101細胞系相關產(chǎn)品：NBL-7細胞、MB231細胞、UMUC-3細胞
DLM8細胞系相關產(chǎn)品：TFH細胞、U-343細胞、CC-LP-1細胞
NCI-H740細胞系相關產(chǎn)品：LA-N-6細胞、AM細胞、Panc_08_13細胞
AN3細胞系相關產(chǎn)品：Kasumi 1細胞、alpha TC1 clone 6細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞
D407細胞系相關產(chǎn)品：NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞
MDA-MB-134 VI細胞系相關產(chǎn)品：G292細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞、Plaepi 34細胞
HOEC細胞系相關產(chǎn)品：HT(H9)細胞、GDM1細胞、EA. hy 926細胞
HP615細胞系相關產(chǎn)品：Panc 8.13細胞、HPASMC細胞、PIG1細胞
FLC-7細胞系相關產(chǎn)品：B16 F10細胞、B95-8細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞
LA-795細胞系相關產(chǎn)品：NR 8383細胞、HTori 3細胞、DHL6細胞
H378細胞系相關產(chǎn)品：McA-RH 8994細胞、H-929細胞、293H細胞
SMA560細胞系相關產(chǎn)品：Kit 225 K6細胞、CEM/0細胞、PECAPJ34細胞
LC-2/ad細胞系相關產(chǎn)品：TE-85 clone 5細胞、SDBMSC細胞、AG 9細胞
SUM 52PE細胞系相關產(chǎn)品：OKa-C-1細胞、HT 1376細胞、NCI-H2198細胞
EO771細胞系相關產(chǎn)品：NCIH841細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞、Hs 852.T細胞
H1869細胞系相關產(chǎn)品：PA12細胞、SW900細胞、H283細胞
PC9細胞系相關產(chǎn)品：CNE1細胞、HME-1細胞、SU-DHL-6細胞
SRS-82細胞系相關產(chǎn)品：BIC-1細胞、MDA-MB415細胞、UMNSAH-DF-1細胞
SW1353細胞系相關產(chǎn)品：GP293細胞、L5178Y細胞、CAL-51細胞
CCD-966SK細胞系相關產(chǎn)品：P3X63Ag8653細胞、H-1836細胞、PJ34細胞
Nakata-1細胞系相關產(chǎn)品：H2172細胞、JVM-2細胞、NCIADRRES細胞
ATDC-5細胞系相關產(chǎn)品：KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞
McCoy細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1373細胞、HAVSMC細胞、CA-46細胞
JB6 [Mouse]細胞系相關產(chǎn)品：NRK49F細胞、CL1-5細胞、ST-2細胞
ST細胞系相關產(chǎn)品：HGF-1細胞、THPI細胞、RGM-1細胞
OVCAR-433細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-435 S細胞、BC3H1細胞、Hs578Bst細胞
CAMA細胞系相關產(chǎn)品：CAL 51細胞、TSU-Pr1細胞、H929細胞
SK-MEL-3細胞系相關產(chǎn)品：HBZY-1細胞、GM07404D細胞、Strain L-929細胞
SK-N-BE-2細胞系相關產(chǎn)品：ID8/MOSEC細胞、BpRc1細胞、SK-CO-1細胞
SK RC 20細胞系相關產(chǎn)品：OV1-P細胞、3T3-J2細胞、P3X63Ag8細胞
HCT 8細胞系相關產(chǎn)品：KNS42細胞、P-388D1細胞、WEHI 231細胞
U-2932細胞系相關產(chǎn)品：Hs 839.T細胞、P3HR1細胞、NRK52E細胞
HD11細胞系相關產(chǎn)品：GM05887細胞、RPMI-6666細胞、SKNDZ細胞
A20細胞系相關產(chǎn)品：HNE2細胞、HME1細胞、95C細胞
CHO-S細胞系相關產(chǎn)品：OPM-2細胞、NTera2 cl.D1細胞、KMB17細胞
BPH-1細胞系相關產(chǎn)品：H711細胞、HPAF-II/CD18細胞、NCI-H2444細胞
HIT T-15細胞系相關產(chǎn)品：CORL23細胞、HRMC細胞、YAC細胞
SNUC2B細胞系相關產(chǎn)品：PaTu 8988 S細胞、Capan-1細胞、H-2009細胞
ME-1 [Human leukemia]細胞系相關產(chǎn)品：L2細胞、L2細胞、hRMECs細胞
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