"PK-15細胞：豬腎細胞系
細胞背景資料：PK-１５細胞建系于１９５５（Stice,E）。是PK-１a細胞的克隆系。該細胞系可用于多種病毒的增值及特性研究。另外，電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，PK-１５細胞內(nèi)有C-型病毒顆粒存在，是研究C-型病毒的材料。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，原因比較復(fù)雜，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳；解凍過程錯誤；冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心；懸渾細胞誤認為死細胞；培養(yǎng)溫度使用錯誤；細胞置于-８０℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進行細胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００×g(約１O(jiān)OOrpm),５-１０分鐘，轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離；rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)；RCF(relative centrifugal force)為相對離心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍數(shù)來表示單位。
細胞株(系)的使用，為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細胞失去原有的遺傳特性，有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞，以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前，細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍，細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高，pH值改變，部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性，引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變，使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷，而致細胞死亡。因此，細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分，減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)分子量小，溶解度大，易穿透細胞，可以使冰點下降，提高細胞膜對水的通透性，且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外，減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會，從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞傳代的一般方法：開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS洗液沖洗細胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
SUD-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHOK1細胞、H4-II-E-C3細胞、CHL-IU細胞
RS 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC5細胞、H-1404細胞、D-341 Med細胞
MDA-kb2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-699細胞、ketr 3細胞、P3/NS1/1-Ag4-1細胞
Transformed Human Liver Epithelial-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OKT3細胞、MOLM-13細胞、RAW264細胞
HEH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC256細胞、SNU119細胞、Huh-7.5細胞
OVCAR-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WML2細胞、MBT2細胞、H-2591細胞
Mv1Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63-Ag8.653細胞、KU-812細胞、BIU-87細胞
NCI.H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THP-1(ATCC)細胞、P3J HR-1細胞、NS-I/1細胞
OCI-LY-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-18Co細胞、A-427細胞、NCIH2452細胞
SU4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞
MSTO-211 H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1666細胞、L5178Y-R細胞、Intestinal Porcine Epithelial細胞：-J2細胞
DF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、H838細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞
HTori 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.653細胞、MEC1細胞、PGLH7細胞
Strain KB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：6-T CEM細胞、RPMI 8226細胞、H-1792細胞
NCI-H661細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231細胞、NCI H295R細胞、RetroPack PT67細胞
KYSE270細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2780CP細胞、P3JHR1細胞、BALB/3T3細胞
KYSE270細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2780CP細胞、P3JHR1細胞、BALB/3T3細胞
KY70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 4細胞、SNU398細胞、Malme-3M細胞
231-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTT739細胞、HCC-2185細胞、RPE1-hTERT細胞
Ej138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞
ST 486細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞
MF2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266mel細胞、HBL 100細胞、SU.86細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-869細胞、SK-Col-1細胞、D341細胞
8305-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞
HEH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC256細胞、SNU119細胞、Huh-7.5細胞
NCI-HUT-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
NTC200細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPB15細胞、SK-ES細胞、P815細胞
H-2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VB細胞、KE-39細胞、KP-N-RT-BM細胞
VMM-5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-I細胞、AtT20細胞、PL-9細胞
L-132細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL851細胞、EVSA/T細胞、OCI/AML5細胞
KRC-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Foreskin Fibroblast細胞、EAC細胞、Y3M細胞
SW-579細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI/AML3細胞、M-G63細胞、MAVER細胞
KU 812F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226S細胞、MRC-9細胞、HCC1171細胞
IPEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2C細胞、hFOB細胞、Mel526細胞
PANC0813細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293c18細胞、P3/ag細胞、BRL-3A細胞
DMS273細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞
huH 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis lung carcinoma細胞、D283 Med細胞、343MG細胞
SK-N-BE(2C)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP8細胞、INS1E細胞、LM2-4175細胞
MARC-145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-26細胞、HUVEC細胞、HOMEC細胞
NPC-TW039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison lung細胞、HCC-1954細胞、Ramos (RA)細胞
Cloudman S91 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 206細胞、CAL39細胞、NCI-522細胞
ST486細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GalK1細胞、BNCL-2細胞、CHP100細胞
SNT-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero E-6細胞、HPAEC細胞、HET-1A細胞
ACC-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF10-A細胞、NFS60細胞、HN13細胞
Huh-7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-H細胞、NCI-H510細胞、MA104細胞
NCI-H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DV90細胞、TGBC11T細胞、ISHI細胞
V 79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Liver-02細胞、LS 123細胞、Microbiological Associates-104細胞
GM05384細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RWPE1細胞、MCF10-A細胞、SW403細胞
GM05372細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 774A.1細胞、HF-91細胞、FaDu細胞
H-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH295R細胞、HEL 299細胞、PG-BE1細胞
RPMI No. 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2081細胞、MDA-MB-231 #4175細胞、SK-OV-3細胞
NCI-H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H820細胞、RA細胞
MKN7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 1細胞、HS-445細胞、WM266mel細胞
COLO-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep. #2細胞、HOC1細胞、rRTEC細胞
SK-MEL28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 606.T細胞、Hs863T細胞、FRTL-5 Cl 2細胞
NCI-H820細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31/FUJ細胞、Caco 2細胞、HHUA細胞
H-1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI:SG-231細胞、JROECL 33細胞、BC-019細胞
MN9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251n細胞、Vero from pool #76細胞、HAPI細胞
Calu-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-378細胞、OP-9細胞、Hs 611.T細胞
LS-174T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-EC3細胞、NCIH1869細胞、SKCol1細胞
GM-346細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVHM細胞、KM H-2細胞、NBLS細胞
IEC 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H865細胞、alpha-TC1-6細胞、CL-40細胞
NCI-H1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1668細胞、BAC1.2F5細胞、SKMEL-31細胞
SKMEL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞
hEM15A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2591細胞、U-251_MG細胞、M-14細胞
IPLB-SF-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z-138細胞、COLO320 DM細胞、786O細胞
H-295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-182細胞、HCMEC細胞、UCH1細胞
N1E115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST-2細胞、Calu-6細胞、Kit225 K6細胞
U-118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-15細胞、293EBNA細胞、HPDEC細胞
LLC-MK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-9細胞、SN12CPM6細胞、NCI-H1734細胞
LS411N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-510細胞、NPA87-1細胞、P30-OHK細胞
MLE-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA361細胞、RMC-1細胞、L-929細胞
MDA-kb2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-699細胞、T-T細胞、COLO 320HSR細胞
NCI-H-295細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2141細胞、GM03320細胞、RT4細胞
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