"MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞：小鼠顱頂前骨細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞是從克隆的但是表型各異的MC３T３-E１細(xì)胞系中分離出一系列亞克隆。從含抗壞血酸培養(yǎng)基生長(zhǎng)的成骨細(xì)胞中選擇高或低成骨細(xì)胞分化、礦化的亞克隆。 MC３T３亞克?。矗ˋTCC CRL-２５９３）和MC３T３亞克隆１４（ATCC CRL-２５９４）在抗壞血酸和３到４mM無(wú)機(jī)鹽中生長(zhǎng)表現(xiàn)出高水平的成骨細(xì)胞分化。 它們１０天后形成一個(gè)礦化良好的細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）。MC３T３亞克?。玻矗ˋTCC CRL-２５９４）和MC３T３亞克?。常埃ˋTCC CRL-２５９６）在抗壞血酸中生長(zhǎng)表現(xiàn)出很差的成骨細(xì)胞分化
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散；３)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細(xì)胞密度達(dá)到８０%以后重復(fù)１項(xiàng)操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)７２小時(shí))；２)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí)，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇，因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落，對(duì)腫瘤細(xì)胞來(lái)說(shuō)，這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn)，直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細(xì)胞脫落。不過(guò)有人說(shuō)EDTA對(duì)細(xì)胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事；效果很好并且不損失細(xì)胞！
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享：支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長(zhǎng)，營(yíng)養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問(wèn)題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá)，又不能通過(guò)可視法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，而且它對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)率影響較小，不易引起注意。國(guó)內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無(wú)膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見(jiàn)的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的，國(guó)外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞，有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來(lái)源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來(lái)的污染和用來(lái)制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個(gè)方面來(lái)預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作；細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無(wú)菌；在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后，特別是重要的細(xì)胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒(méi)有細(xì)胞壁，一般來(lái)講，對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素，如萬(wàn)古霉素等完全不敏感；對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對(duì)支原體有較小抑制作用，所以常不用來(lái)作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
HGC27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK BR 03細(xì)胞、MDA-134細(xì)胞、Hep G2細(xì)胞
Rin-M-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T3細(xì)胞、HCC-1806細(xì)胞、EOC-20細(xì)胞
HPAF-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reh細(xì)胞、DMS114細(xì)胞、A375-SM細(xì)胞
GNM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW579細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、SK.MEL.5細(xì)胞
SW 620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-650細(xì)胞、SKMEL2細(xì)胞、Hs695細(xì)胞
KU-19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1.S細(xì)胞、SK-NEP-1細(xì)胞、HT細(xì)胞
786-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH716細(xì)胞、TOG細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞
HL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HK-2 [Human kidney]細(xì)胞、H1792細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞
D341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB1.19細(xì)胞、CAL-120細(xì)胞、KASUMI6細(xì)胞
FM88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BaF3細(xì)胞、NCTC-1469細(xì)胞、SKO007細(xì)胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293GP細(xì)胞、KY70細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞
Y1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaSki細(xì)胞、28SC細(xì)胞、LS-123細(xì)胞
118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-B1細(xì)胞、Detroit 562細(xì)胞、LM1細(xì)胞
DMS 273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN-3細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞、Hs940-T細(xì)胞
MFE 280細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞、SK ES 01細(xì)胞、HCC-1833細(xì)胞
OV 2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FOXNY細(xì)胞、HFF-1細(xì)胞、NCI-H78細(xì)胞
OV 2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FOXNY細(xì)胞、HFF-1細(xì)胞、NCI-H78細(xì)胞
JVM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-761細(xì)胞、MDA-MB-231細(xì)胞、SH-SY5Y細(xì)胞
HCC2935細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLC82細(xì)胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞
TE-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 741細(xì)胞、GM06141B細(xì)胞、SuperTube細(xì)胞
CWR-22rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-929細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞、DF-1細(xì)胞
SW-900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD11細(xì)胞、Hs68細(xì)胞、AMO1細(xì)胞
SNU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA436細(xì)胞、U-138MG細(xì)胞、U373-MG細(xì)胞
NCI-H1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD19-Lu細(xì)胞、CNE1-LUC細(xì)胞、Scott細(xì)胞
HEK 293 EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rca-B細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞
A2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK6細(xì)胞、HRIF細(xì)胞、H508細(xì)胞
Opossum Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 52細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、NHA細(xì)胞
SK-N-BE-2c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1915細(xì)胞、Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞、ABC-1細(xì)胞
IAR20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1222細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞
THEECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE2細(xì)胞、NTC200細(xì)胞、L-5178-Y-R細(xì)胞
SU-DHL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTA7細(xì)胞、KOSC-2 cl3-43細(xì)胞、Rainbow Trout Embryo細(xì)胞
Panc_02_03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-19細(xì)胞、HCC1954-BL細(xì)胞、KU1919細(xì)胞
RPMI1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1436細(xì)胞、UM-UC14細(xì)胞、NCI-H1436細(xì)胞
NS1-Ag4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2196細(xì)胞、OCI-Ly 3細(xì)胞、SW-626細(xì)胞
HCCLM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAEC細(xì)胞、Panc_03_27細(xì)胞、EB-3細(xì)胞
Jurkat E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH-2細(xì)胞、P3J-HR-1細(xì)胞、MOLM13細(xì)胞
87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B-1細(xì)胞、SK-RC 42細(xì)胞、GA10細(xì)胞
87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B-1細(xì)胞、SK-RC 42細(xì)胞、GA10細(xì)胞
Hs-611-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-202細(xì)胞、H-1618細(xì)胞、Sol8細(xì)胞
P-36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT_116細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、VM-CUB-1細(xì)胞
RGC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa.S3細(xì)胞、L- cell細(xì)胞、SW839細(xì)胞
HRPEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDQ-P1細(xì)胞、RSC-364細(xì)胞、QBI-HEK 293A細(xì)胞
Capan-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-1細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞、RPMI1846細(xì)胞
WM115mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc203細(xì)胞、HTori-3.1細(xì)胞、UCLA RO-81A-1細(xì)胞
Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305C_1細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞、MC116細(xì)胞
SUDHL-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC-MSB-1細(xì)胞、HPAC細(xì)胞、MDA-MB415細(xì)胞
Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NU-GC-4細(xì)胞、ND7/23細(xì)胞、H1792細(xì)胞
SNU-354細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 20細(xì)胞、Ketr-3細(xì)胞、NCTC-1469細(xì)胞
NCI-H920細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC-B3細(xì)胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞、CORL279細(xì)胞
MUG-Chor1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv1.Lu細(xì)胞、L細(xì)胞、SW 1783細(xì)胞
SVEC 4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-711細(xì)胞、RMG-1細(xì)胞、GLC-82細(xì)胞
H-292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI164細(xì)胞、PC3M細(xì)胞、NCI-H-128細(xì)胞
JB-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H322細(xì)胞、NCIH740細(xì)胞、COLO 824細(xì)胞
293GP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT.549細(xì)胞、H-23細(xì)胞、R3/1細(xì)胞
TOV21G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞、PANC-1細(xì)胞、SNU398細(xì)胞
NCIH295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TI-73細(xì)胞、NCIH1755細(xì)胞、NCI-H2591細(xì)胞
NCIH295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TI-73細(xì)胞、NCIH1755細(xì)胞、NCI-H2591細(xì)胞
RCC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM933細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞
NCI-H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS1728細(xì)胞、NCI-SNU-C2A細(xì)胞、GBC-SD細(xì)胞
LLC-WRC 256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuNS1細(xì)胞、HEEpiC細(xì)胞、MHCC-LM3細(xì)胞
H-1184細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES23.5細(xì)胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞、MH-22a細(xì)胞
HuT102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-801D細(xì)胞、RPMI-8226細(xì)胞、NCl-H157細(xì)胞
HOC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIXC-002細(xì)胞、H1092細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞
CAMA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Microglia Clone 3細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞、WERI細(xì)胞
LA795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero from pool #76細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞
HCT-GEO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 126細(xì)胞、H460細(xì)胞、NALM6細(xì)胞
GL261細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02131細(xì)胞、SK-N-MC細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞
HBL 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKOE6細(xì)胞、HCT 8細(xì)胞、ZR751細(xì)胞
NTERA-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCMK1細(xì)胞、FD-LSC-1細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞
C28/I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO/dhFr-細(xì)胞、Hos TE-85細(xì)胞、526 mel細(xì)胞
HEC-1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Oka-C1細(xì)胞、H-740細(xì)胞、253JB-V細(xì)胞
SW 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD18Co細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞
HPAF-II/CD18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSC細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞、H-1693細(xì)胞
RPTEC TERT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-510細(xì)胞、MRC5細(xì)胞、NCI-H125細(xì)胞
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