"MC3T3-E1 Subclone 14細胞：小鼠顱頂前骨細胞系
細胞背景資料：該細胞是從克隆的但是表型各異的MC３T３-E１細胞系中分離出一系列亞克隆。從含抗壞血酸培養(yǎng)基生長的成骨細胞中選擇高或低成骨細胞分化、礦化的亞克隆。 MC３T３亞克隆４（ATCC CRL-２５９３）和MC３T３亞克?。保矗ˋTCC CRL-２５９４）在抗壞血酸和３到４mM無機鹽中生長表現(xiàn)出高水平的成骨細胞分化。 它們１０天后形成一個礦化良好的細胞外基質(zhì)（ECM）。MC３T３亞克隆２４（ATCC CRL-２５９４）和MC３T３亞克?。常埃ˋTCC CRL-２５９６）在抗壞血酸中生長表現(xiàn)出很差的成骨細胞分化
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通常控制在１-２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當(dāng)天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
HGC27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK BR 03細胞、MDA-134細胞、Hep G2細胞
Rin-M-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T3細胞、HCC-1806細胞、EOC-20細胞
HPAF-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞
GNM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW579細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、SK.MEL.5細胞
SW 620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-650細胞、SKMEL2細胞、Hs695細胞
KU-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1.S細胞、SK-NEP-1細胞、HT細胞
786-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH716細胞、TOG細胞、NCIH2291細胞
HL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HK-2 [Human kidney]細胞、H1792細胞、OCI-Ly7細胞
D341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB1.19細胞、CAL-120細胞、KASUMI6細胞
FM88細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BaF3細胞、NCTC-1469細胞、SKO007細胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293GP細胞、KY70細胞、CHO-ori細胞
Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞
118MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-B1細胞、Detroit 562細胞、LM1細胞
DMS 273細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN-3細胞、OCI-Ly7細胞、Hs940-T細胞
MFE 280細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57 Mouse Tumor 64細胞、SK ES 01細胞、HCC-1833細胞
OV 2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FOXNY細胞、HFF-1細胞、NCI-H78細胞
OV 2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FOXNY細胞、HFF-1細胞、NCI-H78細胞
JVM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-761細胞、MDA-MB-231細胞、SH-SY5Y細胞
HCC2935細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLC82細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞、OC-3-VGH細胞
TE-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 741細胞、GM06141B細胞、SuperTube細胞
CWR-22rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-929細胞、Hs 606細胞、DF-1細胞
SW-900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD11細胞、Hs68細胞、AMO1細胞
SNU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA436細胞、U-138MG細胞、U373-MG細胞
NCI-H1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD19-Lu細胞、CNE1-LUC細胞、Scott細胞
HEK 293 EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rca-B細胞、Hs 683.T細胞、CHL-CL-11細胞
A2780CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK6細胞、HRIF細胞、H508細胞
Opossum Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 52細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、NHA細胞
SK-N-BE-2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1915細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞、ABC-1細胞
IAR20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1222細胞、WIL2-S細胞、NCIH1573細胞
THEECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE2細胞、NTC200細胞、L-5178-Y-R細胞
SU-DHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTA7細胞、KOSC-2 cl3-43細胞、Rainbow Trout Embryo細胞
Panc_02_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-19細胞、HCC1954-BL細胞、KU1919細胞
RPMI1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1436細胞、UM-UC14細胞、NCI-H1436細胞
NS1-Ag4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2196細胞、OCI-Ly 3細胞、SW-626細胞
HCCLM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAEC細胞、Panc_03_27細胞、EB-3細胞
Jurkat E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH-2細胞、P3J-HR-1細胞、MOLM13細胞
87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B-1細胞、SK-RC 42細胞、GA10細胞
87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B-1細胞、SK-RC 42細胞、GA10細胞
Hs-611-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-202細胞、H-1618細胞、Sol8細胞
P-36細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT_116細胞、Chinese Hamster Ovary細胞、VM-CUB-1細胞
RGC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa.S3細胞、L- cell細胞、SW839細胞
HRPEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDQ-P1細胞、RSC-364細胞、QBI-HEK 293A細胞
Capan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-1細胞、SNU-520細胞、RPMI1846細胞
WM115mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc203細胞、HTori-3.1細胞、UCLA RO-81A-1細胞
Sarcoma OSteogenic-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305C_1細胞、MZ-CRC-1細胞、MC116細胞
SUDHL-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC-MSB-1細胞、HPAC細胞、MDA-MB415細胞
Wayne State University-Head and Neck 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NU-GC-4細胞、ND7/23細胞、H1792細胞
SNU-354細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 20細胞、Ketr-3細胞、NCTC-1469細胞
NCI-H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC-B3細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、CORL279細胞
MUG-Chor1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv1.Lu細胞、L細胞、SW 1783細胞
SVEC 4-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-711細胞、RMG-1細胞、GLC-82細胞
H-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI164細胞、PC3M細胞、NCI-H-128細胞
JB-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H322細胞、NCIH740細胞、COLO 824細胞
293GP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT.549細胞、H-23細胞、R3/1細胞
TOV21G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PANC-1細胞、SNU398細胞
NCIH295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TI-73細胞、NCIH1755細胞、NCI-H2591細胞
NCIH295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TI-73細胞、NCIH1755細胞、NCI-H2591細胞
RCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM933細胞、NCI-SNU-423細胞、HEK 293-F細胞
NCI-H1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS1728細胞、NCI-SNU-C2A細胞、GBC-SD細胞
LLC-WRC 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuNS1細胞、HEEpiC細胞、MHCC-LM3細胞
H-1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES23.5細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞、MH-22a細胞
HuT102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-801D細胞、RPMI-8226細胞、NCl-H157細胞
HOC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIXC-002細胞、H1092細胞、OVCA420細胞
CAMA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Microglia Clone 3細胞、PC3M-IE8細胞、WERI細胞
LA795細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero from pool #76細胞、HLF-a細胞、OVCAR-5細胞
HCT-GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 126細胞、H460細胞、NALM6細胞
GL261細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02131細胞、SK-N-MC細胞、HuH-1細胞
HBL 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKOE6細胞、HCT 8細胞、ZR751細胞
NTERA-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCMK1細胞、FD-LSC-1細胞、NCI-H378細胞
C28/I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO/dhFr-細胞、Hos TE-85細胞、526 mel細胞
HEC-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Oka-C1細胞、H-740細胞、253JB-V細胞
SW 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD18Co細胞、HEK-AD 293細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞
HPAF-II/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSC細胞、MV(4;11)細胞、H-1693細胞
RPTEC TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-510細胞、MRC5細胞、NCI-H125細胞
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