"Li-7細(xì)胞：人肝癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：人肝癌細(xì)胞株。這株細(xì)胞從裸鼠體外移植瘤中建立。
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見(jiàn)情況總結(jié)：細(xì)胞培養(yǎng)中最常見(jiàn)污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢？我們根據(jù)常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時(shí)間，有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí)，不開(kāi)紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開(kāi)始試驗(yàn)；２)器材或者溶液很久沒(méi)用，未檢測(cè)是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈；點(diǎn)了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗(yàn)；４)不帶手套，徒手操作；５)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面，東西太多太亂：超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)！這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來(lái)后全部堆在傳代細(xì)胞！一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里，細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好，啥時(shí)候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒(méi)清潔】細(xì)胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染，如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒(méi)了要記得加，還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤(pán)?！緜鞔?xì)胞人多口雜，難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細(xì)胞污染；超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí)，喜歡說(shuō)話聊著做試驗(yàn)，要是還不帶口罩，里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢！
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時(shí)，從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和，對(duì)細(xì)胞損傷較小，但是，價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì)，對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。４、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺(jué)得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大，但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。５、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。６、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理，我想是因細(xì)胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)是：對(duì)細(xì)胞損傷小，不需要中止或洗細(xì)胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過(guò)程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺(tái)上，很快細(xì)胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細(xì)胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無(wú)血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時(shí)盡可能溫和，使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
SU-DHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU-145細(xì)胞、H28細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞
BC-024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-UI細(xì)胞、SUM 159細(xì)胞、MV-1-Lu細(xì)胞
3T3-442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-MeWo細(xì)胞、PANC 327細(xì)胞、RKO-AS45-1細(xì)胞
Hep 3B2_1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMMC 7721細(xì)胞、QGP 1細(xì)胞、HEH2細(xì)胞
MPP-89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adeno-293細(xì)胞、COLO 738細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞
OVCAR432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU-65M細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞、H-2030細(xì)胞
HOS TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone M-3細(xì)胞、MDA-1386細(xì)胞、Pro-Lec1.3C細(xì)胞
SF-126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGSMC細(xì)胞、OCIAML2細(xì)胞、Lu-99A細(xì)胞
MFM223細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMD8細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞、P3J-HR-1細(xì)胞
H-2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-11細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞
S-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs578Bst細(xì)胞、Vero 76 clone E-6細(xì)胞、QGY 7701細(xì)胞
CW-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2066細(xì)胞、C-4 I細(xì)胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細(xì)胞
BHP10-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375-SM細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞
SKMel-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 207細(xì)胞、Hs 888.Lu細(xì)胞、A-498細(xì)胞
WM266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeT 5A細(xì)胞、OUMS23細(xì)胞、SGC7901細(xì)胞
KYSE-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bx-PC3細(xì)胞、S180細(xì)胞、H35細(xì)胞
KYSE-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bx-PC3細(xì)胞、S180細(xì)胞、H35細(xì)胞
HT1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-13細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞、OS-732細(xì)胞
H322T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676B細(xì)胞、MV-522細(xì)胞、U138MG細(xì)胞
MDA-453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JCA1細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞
HUT 125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP a2細(xì)胞、TPC1細(xì)胞、SW260細(xì)胞
SEG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1522細(xì)胞、CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞、AR4-2J細(xì)胞
RPMI 1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN8細(xì)胞、CMT64細(xì)胞、TE85細(xì)胞
RM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo K-1細(xì)胞、HOP-92細(xì)胞、159PT細(xì)胞
RBMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoTc2 4510細(xì)胞、G401細(xì)胞、IPLB-SF-21-AE細(xì)胞
COLO 206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA 802細(xì)胞、CCD 966 SK細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞
NCIH1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS TE85細(xì)胞、Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞、HCC1833細(xì)胞
HT 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM4細(xì)胞、G361-mel細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞
CCD19-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCD-MLA-144細(xì)胞、NG 108-15細(xì)胞、AAV-293細(xì)胞
BeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-5細(xì)胞、TE-3A細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞
KNS-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1876細(xì)胞、RS1細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞
UACC812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-719細(xì)胞、HAEC細(xì)胞、SW1990細(xì)胞
HBL-100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-I/1細(xì)胞、SKMel-28細(xì)胞、Hs27細(xì)胞
NCIH1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK-49F細(xì)胞、Hs343T細(xì)胞、NS-1細(xì)胞
MAVER1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-761細(xì)胞、HuNS1細(xì)胞、FF-WT-BJ細(xì)胞
MDA157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mink Lung細(xì)胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、UCLA NPA-87-1細(xì)胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293GP細(xì)胞、KY70細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞
SDBMSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hSCC-25細(xì)胞、HSAS4細(xì)胞、VMM39細(xì)胞
HIEC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JeKo-1細(xì)胞、Ramos-RA1細(xì)胞、LNCaP FGC細(xì)胞
Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21細(xì)胞、VP 267細(xì)胞、KBM5細(xì)胞
LTPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH244細(xì)胞、HT-55細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞
OVCAR433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL/FU細(xì)胞、HBZY-1細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞
NCI-H820細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31/FUJ細(xì)胞、Caco 2細(xì)胞、HHUA細(xì)胞
NCI-H510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1755細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞、BI-Mel細(xì)胞
DCS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM16136細(xì)胞、KMS-26細(xì)胞、DU_145細(xì)胞
HCe-8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-16細(xì)胞、UACC893細(xì)胞、OCIAML5細(xì)胞
IHH4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC929細(xì)胞、NCI-H1836細(xì)胞、VP267細(xì)胞
P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN93細(xì)胞、Panc 2.03細(xì)胞、H-740細(xì)胞
PNT1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE-1細(xì)胞、HCCLM6細(xì)胞、HLEC-SRA 01/04細(xì)胞
SW-837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR-1細(xì)胞、WM451Lu細(xì)胞、TCam-2細(xì)胞
GalK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞、HEB細(xì)胞、WiDr細(xì)胞
Capan-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1341細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞、NG10815細(xì)胞
TE 32.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 767細(xì)胞、WEHI-3B細(xì)胞、C1498細(xì)胞
CCD-966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63Ag8653細(xì)胞、H-1836細(xì)胞、PJ34細(xì)胞
EST81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1954細(xì)胞、WB-F344細(xì)胞、OVCAR.3細(xì)胞
HEK 293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266細(xì)胞、PaTu8988s細(xì)胞、LN382細(xì)胞
RGM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC_7860細(xì)胞、MDA436細(xì)胞、HCC-1143細(xì)胞
SK-CO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1734細(xì)胞、NCI-H1437細(xì)胞、CV 1細(xì)胞
CT26WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW-264.7細(xì)胞、hRMECs細(xì)胞、P3JHR-1細(xì)胞
Epstein-Barr-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HK2細(xì)胞、MLTC-1細(xì)胞、SKMES細(xì)胞
WI 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-346細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞
L-428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLS細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞、SNU-638細(xì)胞
HCC1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1588細(xì)胞、REC細(xì)胞、SNU-16細(xì)胞
T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bowes melanoma cells細(xì)胞、NCIH2347細(xì)胞、GP2d細(xì)胞
HIT T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 8細(xì)胞、DH82細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞
HA1800細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUSMC細(xì)胞、SUDHL-10細(xì)胞、K7M2-WT細(xì)胞
NCI-H1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A3細(xì)胞、Strain V細(xì)胞、B16細(xì)胞
H-841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 102PT細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞、CEM/0細(xì)胞
L5178Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD3細(xì)胞、RT-BM細(xì)胞、HK2細(xì)胞
GM3569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞、MDA-MB361細(xì)胞、KNS-81細(xì)胞
BRL 3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PFSK細(xì)胞、HCC366細(xì)胞、M210B4細(xì)胞
EM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WISH細(xì)胞、NCIH520細(xì)胞、SAOS 2細(xì)胞
3T3-442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-MeWo細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞、MN 60細(xì)胞
CWR22R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-442A細(xì)胞、H283細(xì)胞、Hep G2/C3A細(xì)胞
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