"MDBK細胞：牛腎細胞系

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

細胞生長：貼壁

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細胞傳代方法：１：２傳代

細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系

細胞生長特性：貼壁生長　

細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。

貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！

細胞傳代的一般方法：開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS洗液沖洗細胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。

LM TK negative細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1088細胞、P3J細胞、HR1K細胞

MCF-7/AdrR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI no 8226細胞、NCIH28細胞、HBE135-E6E7細胞

NCI-H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-146細胞、MDCK-II細胞、RSMC細胞

RBL2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：b.End3細胞、NCTC 929細胞、NCI-SNU-449細胞

OK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag123細胞、C-8161細胞、KU 812細胞

Lung cancer-1/squamous細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-3細胞、QBC-939細胞、H220細胞

OCILY-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888Lu細胞、Walker/LLC-WRC256細胞、P3X63 Ag8.653細胞

KM933細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi-2 DAP細胞、SK-Mel1細胞、BT549細胞

OVCAR-8/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞

U 937細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAHY-926細胞、N1S1細胞、HBdSMC細胞

OCI/AML-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC94細胞、SKNFI細胞、HC11細胞

J 774A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc4.03細胞、SKCol1細胞、KBM-5細胞

SK-N-BE(2C)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP8細胞、INS1E細胞、LM2-4175細胞

HEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1116細胞、KASUMI6細胞、NCI-446細胞

Transformed Human Liver Epithelial-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRCC細胞、TE-1細胞、S.B.細胞

Normal Rat, August 3, 1983細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60 clone15細胞、Rat 1細胞、HOK細胞

TCC-SUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞

SK-SH-SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY-7701細胞、SKO007細胞、RS4;11細胞

McArdle RH-7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WB F344細胞、786.O細胞、OVCAR-420細胞

MC/9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A7r5細胞、H-1355細胞、CMEC/D3細胞

SW 1088細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera2/D1細胞、Hs888T細胞、ECV 304細胞

HMEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-sm 1細胞、PCI-4B細胞、MDA-MB-134 VI細胞

SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2347細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、TPC1細胞

SK RC 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1-P細胞、3T3-J2細胞、P3X63Ag8細胞

32D clone3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9細胞、4T1-A細胞、PANC-02-03細胞

ATDC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L23/P細胞、RGC-6細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞

OCI/AML-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDST8細胞、293FT細胞、He La細胞

H-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1648細胞、NALM6細胞、H4IIE細胞

Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞

HEL299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV3細胞、SK.OV.3細胞、TGBC11T細胞

HFL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-SB細胞、RCC10RGB細胞、H196細胞

SW 1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774 A1細胞、T-T細胞、COLO-699細胞

CEM.C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：10RGB細胞、NCIH23細胞、MN-9D細胞

KMY1022細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-19細胞、CT26.CL25細胞、HCC0095細胞

H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HG2855細胞、SPCA-1細胞、MA-c細胞

Hs 600.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B 95.8細胞、SuDHL 1細胞、H1963細胞

MDA-MB-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H28細胞、3T3 L1細胞、HEK 293FT細胞

EL 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178Y細胞、Hs 294T細胞、HuH-28細胞

Epstein-Barr-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HK2細胞、MLTC-1細胞、SKMES細胞

SP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD1095Sk細胞、SW 13細胞、HPB-ALL細胞

ARIP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞

A375細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOUNH91細胞、NTC-200細胞、Lewis Lung Cancer細胞

SUM-102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1651細胞、NRK 49F細胞、SKN-AS細胞

MLE-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞

NPC-TW-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB231細胞、OV433細胞、LWnt3A細胞

L-M[TK-]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL 5細胞、H2286細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞

KLM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE1細胞、KALS1細胞、MEL細胞

Line 522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4IIEC3細胞、F442-A細胞、hMSC-BM細胞

HCT8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4細胞、G361mel細胞、MDA MB231細胞

MEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 111細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、SK Col 1細胞

RPMI-1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940.T細胞、NCI-HUT-125細胞、HUASMC細胞

MDA-MB-231-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：211H細胞、Co320細胞、HFF1細胞

HeLa-S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞、P3-X63-Ag8細胞、SW 579細胞

H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 299細胞、87MG細胞、MA 104細胞

CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUTU80細胞、HEL-92-1-7細胞、NCI-N87細胞

RPTEC/TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK-2細胞、H1819細胞、NT2細胞

E.G7-OVA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC20細胞、CAKI 1細胞、AD-293細胞

CAL51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB231細胞、HEK/293細胞、HSC細胞

MKN45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-671細胞、MCMEC細胞、SVG(P12)細胞

SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DBTRG-05MG細胞、BHT-101細胞、TE11細胞

COV362細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-1細胞、L5178YR細胞、P30 OHK細胞

Panc203細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCH細胞、HCASMC細胞、Human podocyte細胞

HOS/MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2347細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞、JROECL19細胞

Hs 895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 79細胞、SRA01/04細胞、HOP 92細胞

J774.A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS114細胞、UMR 106細胞、RGC-6細胞

SK-GT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-407細胞、KP-N-RT-BM-1細胞、H-774細胞

Onda 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞

PANC-08-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM102細胞、JROECL21細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細胞

JKT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEYA8細胞、NCI-SNU-449細胞、HCC0366細胞

118 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE3細胞、LK-2細胞、B16/F10細胞

AM38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8226/S細胞、SN12C-PM6細胞、CEM-C1細胞

Leghorn Male Hepatoma細胞：細胞系相關(guān)產(chǎn)品：2V6.11細胞、MX-1細胞、A2780/CP細胞

NCI-H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-146細胞、WEHI3B細胞、SUM 149細胞

SAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMU-S1細胞、DMS 53細胞、FDCP-1細胞

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