"TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞：小鼠肺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個(gè)說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請(qǐng)勿超過一個(gè)月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀?huì)阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會(huì)使此沈淀物增多，更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè)，又沒有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng)，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號(hào)的血清。
SuDHL 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞、CATHa細(xì)胞、SK-MEL 28細(xì)胞
PC 61 5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE1-E6E7細(xì)胞、ST2細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞
TE-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-Jiyoye細(xì)胞、hTERT-RPE細(xì)胞、EVSAT細(xì)胞
CNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPBALL細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞、IA-LM細(xì)胞
SK-RC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT 26細(xì)胞、L 1210細(xì)胞、TE 32.T細(xì)胞
293E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS-1E細(xì)胞、LS 174 T細(xì)胞、SHP77細(xì)胞
CG4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu 8988s細(xì)胞、PLC/PRF/5細(xì)胞、HCC1954-BL細(xì)胞
NCI-H1437細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2141細(xì)胞、MV 3細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞
138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-9724細(xì)胞、A-204細(xì)胞、C2BBe1細(xì)胞
A549 ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC1細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞、NCIH2122細(xì)胞
Hs 343.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TN5B14細(xì)胞、HKC細(xì)胞、V79-1細(xì)胞
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CNLMG-B5537SKIN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI:SCC90細(xì)胞、L 540細(xì)胞、SK-N-BE2細(xì)胞
N2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP89細(xì)胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞、SNU16細(xì)胞
NCIH1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-ES細(xì)胞、NR8383細(xì)胞、HLEC細(xì)胞
NE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：159 PT細(xì)胞、MGC803細(xì)胞、HSC-6細(xì)胞
P30/Ohkubo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 433細(xì)胞、SUM 149細(xì)胞、CEM T4細(xì)胞
NCI-SNU-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHH細(xì)胞、NTERA-2細(xì)胞、T98細(xì)胞
M-1 myeloid leukemia細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H69細(xì)胞、H69/P細(xì)胞、RAT2細(xì)胞
NCI-SNU-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y細(xì)胞、HeLa S3細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞
MM1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-1210細(xì)胞、FAT細(xì)胞、B5537SKIN細(xì)胞
CAL33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-1846細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、F-81細(xì)胞
OCI-Ly01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578Bst細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞、E6-1細(xì)胞
NCI-H2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：E6-1細(xì)胞、G-292 clone A141B1細(xì)胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞
Calu6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ra #1細(xì)胞、RPMI8402細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞
MGC803細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780-CP細(xì)胞、SK-GT-4細(xì)胞、CEM細(xì)胞
GC-1spg細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.2細(xì)胞、NCI-H1299細(xì)胞、YES 2細(xì)胞
SP2-0-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-81細(xì)胞、Toledo細(xì)胞、MHH-CALL2細(xì)胞
Z138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H520細(xì)胞、HeLa 229細(xì)胞、KATOIII細(xì)胞
C33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4細(xì)胞、B16-F10--RED細(xì)胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞
PT67細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22Rv1細(xì)胞、OCILY3細(xì)胞、CCD841CoN細(xì)胞
YT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC細(xì)胞、HCEpiC細(xì)胞、SKNMC細(xì)胞
Vero-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat Clone E6-1細(xì)胞、KMS26細(xì)胞、NCIH1694細(xì)胞
Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305C_1細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞、MC116細(xì)胞
RPMI-6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG3A細(xì)胞、MC-116細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞
Panc_08_13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-112CoN細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞
HEK 293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBEpiC細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞
H1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca109細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞、EAC細(xì)胞
SNU398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 401細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞
Colon26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABE­8.1/2細(xì)胞、TE 85.T細(xì)胞、BCECs細(xì)胞
RBL-2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM192B細(xì)胞、KB細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞
alphaTC clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L細(xì)胞、PK(15)細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞
TE3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266B1細(xì)胞、HOSEpiC細(xì)胞、A172細(xì)胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC2細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞
HDF-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-330細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞、MILE SVEN 1細(xì)胞
RIN-m細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-13細(xì)胞、DMS 53細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞
HFF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞、MB39細(xì)胞、H295R-S1細(xì)胞
OCI-LY-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-18Co細(xì)胞、A-427細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞
MHCC-LM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-28I2細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞、Hs934T細(xì)胞
IOSE80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69C細(xì)胞、Jurkat E6-1細(xì)胞、MGECs細(xì)胞
SHEE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320/DM細(xì)胞、SBC5細(xì)胞、Jurkat (clone E6-1)細(xì)胞
H1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAKIKI Clone 1細(xì)胞、MDA1386細(xì)胞、CACO2細(xì)胞
Hela-mock細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-123細(xì)胞、HCV 29細(xì)胞、Hs 578.Bst細(xì)胞
SW-982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LADMAC細(xì)胞、C4I細(xì)胞、YD-38細(xì)胞
hTERT RPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY-7703細(xì)胞、CCRFCEM細(xì)胞、G519細(xì)胞
OP-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADB-106細(xì)胞、RERF-LCMS細(xì)胞、Y3-Ag1.2.3細(xì)胞
KBM-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY-50細(xì)胞、GS-9L細(xì)胞、SK-N-MC細(xì)胞
GM17219細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159細(xì)胞、BT483細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞
CoCL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1355細(xì)胞、H2228細(xì)胞、T-ALL1細(xì)胞
PIG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L78細(xì)胞、FTC133細(xì)胞、SKMEL24細(xì)胞
CHO-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V 79細(xì)胞、MCF 7細(xì)胞、NCI-HUT-69細(xì)胞
NCI-H2009細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 212細(xì)胞、LS 174T細(xì)胞、WEHI3細(xì)胞
HTori3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM637A細(xì)胞、MDA330細(xì)胞、P30/Ohkubo細(xì)胞
Fox/NY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR751細(xì)胞、HCS-2/8細(xì)胞、SNB-19細(xì)胞
H-2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2030細(xì)胞、MO59J細(xì)胞、HIT T-15細(xì)胞
GA10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-322細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞
WM-239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8D1A細(xì)胞、Kit 225-K6細(xì)胞、2PK3細(xì)胞
CA 46細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283 Med細(xì)胞、WERI-Rb 1細(xì)胞、Colo741細(xì)胞
GM06141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL-I細(xì)胞、THP 1細(xì)胞、NCI N87細(xì)胞
mIMCD-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR4細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞、H1882細(xì)胞
HS5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：huH 1細(xì)胞、SK-MES-1細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞
RPMI 8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AC16 [Human hybrid]細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞、IPAM-WT細(xì)胞
TE-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-Jiyoye細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞
TE-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Human Colon細(xì)胞、L78細(xì)胞、SKMEL-1細(xì)胞
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