"B95-8細胞：絨猴EBV轉(zhuǎn)化的白細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當風衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
YD38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-J細胞、OVCAR-8/ADR細胞、143B細胞
RIN-m 14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1783細胞、SHG44細胞、SupB15W細胞
UPCISCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、2PK-3細胞、3T3F442A細胞
SNB-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LP1細胞、CCD18細胞、SKOV3細胞
Ect1/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-3T3-L1細胞、H-676B細胞、End1/E6E7細胞
hTERT RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226細胞、MHCC97-H細胞、H-2108細胞
COV 434細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK/EBNA細胞、SKNBE2C細胞、HT1197細胞
MDA-MB453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD966SK細胞、NCI-H1734細胞、NCIH2135細胞
U-343細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HR1-BL細胞、HCCC9810細胞、786-0細胞
S37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE135-E6E7細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞、NCIH716細胞
VK-2/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-445細胞、HT(H9)細胞、GLC82細胞
NCI-H146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10細胞、HCC1143細胞、DLD-1細胞
HUT125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLE 12細胞、P3X63Ag8653細胞、32D clone3細胞
NCI-H102細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG1細胞、B/C3T3細胞、WIL2 S細胞
PIGI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL 16細胞、HS-683細胞、Y3細胞
MT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B6Tert-1細胞、XWLC-05細胞、MRC-5細胞
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ARIP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞
NPA'87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lewis-Lung細胞、HBZY1細胞、87 MG細胞
SNU878細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cell細胞、CMECs細胞、A-875細胞
SK-N-DZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-1847細胞、EC109細胞、BEL 7405細胞
H1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346細胞、T98細胞、MT2細胞
RM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo K-1細胞、HOP-92細胞、159PT細胞
WSU-DLCL(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK細胞、V 79-4細胞、HCV 29細胞
GM03320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.OV.3細胞、675T細胞、L-02細胞
HCC-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KLM1細胞、KE39細胞、SW-756細胞
CHOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 7細胞、HBE 135-E6E7細胞、TYKnu細胞
H647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-273細胞、FRhK4細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞
HCT-FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 50細胞、H3255細胞、HCT-8細胞
SACC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞
HCC0044細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4 I細胞、Hs 852.T細胞、VERO76細胞
Clone 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv1Lu細胞、HET1A細胞、N1E-115細胞
PY8119細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu-165細胞、LN382細胞、BC-022細胞
RERFLCMS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI TNC-1細胞、Murine Leydig Tumor細胞：-1細胞、CV-1 in Origin Simian-1細胞
Caco-2BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 954細胞、SCC-9細胞、NCI-H2141細胞
KOSC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL-104細胞、SU-DHL2細胞、HGF-1細胞
MCF12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hs 68細胞、MGc80-3細胞、TM4細胞
H2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo-K1細胞、P388細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞
EC-GI-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-180細胞、NOR10細胞、P31FUJ細胞
IAR 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG-108-15細胞、N9細胞、293 F細胞
LIPF178C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC8細胞、GM04154細胞、C41細胞
WM-239細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞
NCIH508細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UACC893細胞、SUM-52PE細胞、Evsa T細胞
P3/X63/Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1666細胞、HFSF細胞、CAL-62細胞
WI 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-346細胞、MOLT-4細胞、Okayama University Medical School-27細胞
COLO 824細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY-270細胞、NP-69細胞、HEK293-EBNA細胞
Evsa-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9S1細胞、C42細胞、NCI-H1703細胞
IMR32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu686細胞、TE8細胞、266 Bl細胞
C3H10T1/2CL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞
D407 RPE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H508細胞、SuDHL 10細胞、GM05384細胞
Hs 729T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA175細胞、3T3-F442A細胞、SW1463細胞
KYSE 520細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2122細胞、RC-4B/C細胞、NCIH889細胞
16HBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC38細胞、RASMC細胞、SNB.19細胞
Walker256-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM239細胞、SW-954細胞、HN4細胞
W256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUC細胞、SNU-739細胞、SKMES1細胞
R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞
MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞
CEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、343 MG細胞、MALME 3M細胞
HUV-EC-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16/F0細胞、H1184細胞、H2444細胞
A 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC-SRA 01/04細胞、MMAc-SF細胞、MSB1細胞
HNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm5F細胞、TE-14細胞、AX-Mel細胞
H-548細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHL-5細胞、BMSC/hBMSCs細胞、HR8348細胞
RPMI 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMC-HN8細胞、CMT64細胞、TE85細胞
TR146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、T98 G細胞、TF-1細胞
Vero細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3255細胞、A-375SM細胞、32D.3細胞
NCTC clone 1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729T細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM 239細胞
NUGC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 1細胞、GM05887A細胞、P3/X63/Ag8.653細胞
C 643細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW 01細胞、HTh74細胞、MDA-453細胞
NCI-H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-146細胞、MDCK-II細胞、RSMC細胞
GM03190A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-253細胞、Fu97細胞、TEC細胞
Duke University 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M619細胞、KY180細胞、MG63細胞
SK-MEL-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL 60細胞、aTC1-6細胞、U-373MG ATCC細胞
UPCISCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、SK-N-BE(1)細胞、NPA-87細胞
SKRC-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-1 spg細胞、NCI-H1915細胞、SNU739細胞
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