"DMS 53細(xì)胞：人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代，每周２-３次
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題總結(jié)：１)一般客戶(hù)拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶(hù)收到細(xì)胞后先不開(kāi)蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開(kāi)封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過(guò)８０%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無(wú)法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類(lèi)？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的種類(lèi)和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問(wèn)題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過(guò)程沒(méi)有問(wèn)題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問(wèn)題，還有確信拿來(lái)的細(xì)胞沒(méi)問(wèn)題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問(wèn)題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，這是一般人所注意不到的，即使書(shū)上也不講這個(gè)問(wèn)題，太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過(guò)７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過(guò)密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話(huà)，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o(wú)論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問(wèn)題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問(wèn)題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見(jiàn)得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗(yàn)分享：支原體是一類(lèi)缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長(zhǎng)，營(yíng)養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個(gè)世界性問(wèn)題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達(dá)到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達(dá)，又不能通過(guò)可視法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，而且它對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)率影響較小，不易引起注意。國(guó)內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無(wú)膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見(jiàn)的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細(xì)胞的支原體種類(lèi)是很多的，國(guó)外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞，有的細(xì)胞株可以同時(shí)污染兩種以上的支原體。支原體污染的來(lái)源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實(shí)驗(yàn)器材帶來(lái)的污染和用來(lái)制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個(gè)方面來(lái)預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)操作；細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無(wú)菌；在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后，特別是重要的細(xì)胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補(bǔ)體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒(méi)有細(xì)胞壁，一般來(lái)講，對(duì)作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素，如萬(wàn)古霉素等完全不敏感；對(duì)多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(duì)支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類(lèi)、大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)及一些喹諾酮;其他類(lèi)抗生素如基糖苷類(lèi)、霉素對(duì)支原體有較小抑制作用，所以常不用來(lái)作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
INS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8細(xì)胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、MRCV細(xì)胞
BrCL12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM2-4175細(xì)胞、HM06.A1細(xì)胞、EOL1細(xì)胞
CCD841CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-72細(xì)胞、MFM223細(xì)胞、U-343細(xì)胞
P30-OHKUBO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、SW13細(xì)胞、Renal Carcinoma細(xì)胞
Cloudman S91 melanoma clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：451Lu細(xì)胞、BNL CL.2細(xì)胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細(xì)胞
LS180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW982細(xì)胞、MDA-MB453細(xì)胞、Hs 294T細(xì)胞
LAPC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA Dx5細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞、B95.8細(xì)胞
NCI-H2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca761細(xì)胞、OVCAR5細(xì)胞、DSL6A/C1細(xì)胞
T98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPB-15細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞、MV-4-11細(xì)胞
U138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT3細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞、MSTO-211 H細(xì)胞
L cells (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 422細(xì)胞、H1882細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞
PL12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE140細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞
Calu-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-378細(xì)胞、OP-9細(xì)胞、Hs 611.T細(xì)胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-676B細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞、RIN-m 14B細(xì)胞
Anip[973]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL6細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞
BALB/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03573細(xì)胞、HEL 92.1.7細(xì)胞、T9細(xì)胞
BALB/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03573細(xì)胞、HEL 92.1.7細(xì)胞、T9細(xì)胞
J774 A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-1040細(xì)胞、F-81細(xì)胞、MCA205細(xì)胞
NE-4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK-136細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞
Co 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO829細(xì)胞、JHH7細(xì)胞、NCIH1688細(xì)胞
SUM-52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM01232E細(xì)胞、LLC-PK1細(xì)胞、U-226AR1細(xì)胞
TE-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leydig細(xì)胞、KU1919細(xì)胞、T.T細(xì)胞
NCI-A549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14-MEL細(xì)胞、AdHek細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞
KAT5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori-3.1細(xì)胞、MHH-CALL2細(xì)胞、H-1404細(xì)胞
N1S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera2 cl.D1細(xì)胞、373MG細(xì)胞、RCF細(xì)胞
CMT167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、LIM-1215細(xì)胞、MC/CAR細(xì)胞
CA-OV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT T15細(xì)胞、VK2 (E6/E7)細(xì)胞、L6565細(xì)胞
PaTu 8988 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02細(xì)胞、PLC細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞
GM06141B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U1 (EJ)細(xì)胞、SN12-PM6細(xì)胞、H-719細(xì)胞
Human Corneal Endothelial Cells-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-7901/DDP細(xì)胞、BAEC細(xì)胞、UPCI-SCC-154細(xì)胞
DF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞、H838細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞
Hs27F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt3A細(xì)胞、IPLB-Sf21-AE細(xì)胞、HLEpiC細(xì)胞
Pa18C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-766T細(xì)胞、BSC40細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞
H2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGE細(xì)胞、3AA細(xì)胞、MC 3T3-E1細(xì)胞
LN229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 870.T細(xì)胞、H647ell細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞
A9 (Hamprecht)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLF細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞、HEK293S細(xì)胞
SKNBE(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-0WT細(xì)胞、HEL細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞
SKNBE(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-0WT細(xì)胞、HEL細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞
OVCAR 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb-2細(xì)胞、MTC-TT細(xì)胞、SW527細(xì)胞
SCC 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroC1008細(xì)胞、NCI-H522細(xì)胞、MV4-11細(xì)胞
Hs-281-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW01細(xì)胞、OVCA432_Bast細(xì)胞、HT 1080細(xì)胞
SKNBE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-433細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞、JS1細(xì)胞
NB-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LYR細(xì)胞、HEM細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞
H-1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1-Lu細(xì)胞、ES2細(xì)胞、EoL-1細(xì)胞
L-Wnt3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hk-2細(xì)胞、Hs1.Tes細(xì)胞、MUGCHOR1細(xì)胞
MCF.10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEP-3B2細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞、F442A細(xì)胞
NCCIT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-929細(xì)胞、Ca Ski細(xì)胞、NPC-TW01細(xì)胞
HCC1937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 21細(xì)胞、SHSY-5Y細(xì)胞、DMS53細(xì)胞
RBL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBVEC細(xì)胞、Hs 604.T細(xì)胞、GM00215細(xì)胞
C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSF細(xì)胞、SW-962細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1/P細(xì)胞、HFL細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞
TCC-SUP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2/D1細(xì)胞、COLO824細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞
Panc08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M-1E8細(xì)胞、MEL-526細(xì)胞、NIH3T3-L1細(xì)胞
NB-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HREC細(xì)胞、PGLH7細(xì)胞、F98細(xì)胞
ECC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、GM-3573細(xì)胞、DKMG細(xì)胞
DU_145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ETCC-007細(xì)胞、FT-293細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM TK negative細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞、OVCAR 5細(xì)胞
RN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-4細(xì)胞、4T1細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞
GM3569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞、MDA-MB361細(xì)胞、KNS-81細(xì)胞
M3 Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMy2.CIR細(xì)胞、HN-6細(xì)胞、T/G HA-VSMC細(xì)胞
Rin-M-5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T3細(xì)胞、HCC-1806細(xì)胞、EOC-20細(xì)胞
HCC38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2171細(xì)胞、Hs 766.T細(xì)胞、MGC803細(xì)胞
SK.MEL.2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Strain KB細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞、95-D細(xì)胞
HEK-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos 2G6.4C10細(xì)胞、OCI-Ly19細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞
SH-SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC1細(xì)胞、COR L279細(xì)胞、ES-2細(xì)胞
M-1 myeloid leukemia細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H69細(xì)胞、H69/P細(xì)胞、RAT2細(xì)胞
FUOV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320 DM細(xì)胞、MonoMac 6細(xì)胞、MNNGHOS細(xì)胞
AR4-2J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞
HKF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-157細(xì)胞、OV1063細(xì)胞、NCIH520細(xì)胞
PIEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-SH-SY5Y細(xì)胞、GC-1 spg細(xì)胞、WiDr-TC細(xì)胞
NCI-H-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMDC細(xì)胞、SW626細(xì)胞、SCCVII/St細(xì)胞
SW 48細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCe-8693細(xì)胞、HS-294T細(xì)胞、Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞
CCD841CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-72細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞、SGC-7901細(xì)胞
U-hth74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF 7B細(xì)胞、P3/X63/Ag8細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞
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