抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進(jìn)行動物免疫實驗。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-Complement C3c alpha' chain fragment 1
中文名稱 補(bǔ)體C3cα 鏈片段1抗體
別 名 Acylation stimulating protein; ASP; C3; C3a anaphylatoxin; Complement C3 alpha chain; Complement C3; Complement C3 precursor; Complement component 3; Complement component C3; Complement factor 3; Plp; Complement C3c alpha' chain fragment 1; CO3_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) G蛋白偶聯(lián)受體 淋巴細(xì)胞
蛋白分子量 predicted molecular weight: 23/181kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Complement C3c alpha' chain fragment 1
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是補(bǔ)體C3cα 鏈片段1抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
肺形側(cè)耳(秀珍菇)現(xiàn)貨,ATCC菌株
離褶傘培養(yǎng),ATCC菌株
白鬼傘保存,ATCC菌株
叢生地星售價,ATCC菌株
垂頭蟲草現(xiàn)貨,ATCC菌株
大團(tuán)囊蟲草培養(yǎng),ATCC菌株
樹舌靈芝保存,ATCC菌株
硫磺菌售價,ATCC菌株
趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Ligand 1 (CCL1)規(guī)格:48T/96T
墨蝶呤還原酶(SPR)ELISA Kit for Sepiapterin Reductase (SPR)規(guī)格:48T/96T
賴特異性去基化酶4A(KDM4A)ELISA Kit for Lysine Specific Demethylase 4A (KDM4A)規(guī)格:48T/96T
死亡誘導(dǎo)終結(jié)因子1(DIDO1)ELISA Kit for Death Inducer Obliterator 1 (DIDO1)規(guī)格:48T/96T
血管生長素(ANG)ELISA Kit for Angiogenin (ANG)規(guī)格:48T/96T
糖蛋白130(gp130)ELISA Kit for Glucoprotein 130 (gp130)規(guī)格:48T/96T
90kDa熱休克蛋白αB1(HSP90αB1)ELISA Kit for Heat Shock Protein 90kDa Alpha B1 (HSP90aB1)規(guī)格:48T/96T
肌鈣蛋白I(TNI)ELISA Kit for Troponin I (TNI)規(guī)格:48T/96T
拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(TOP2)ELISA Kit for Topoisomerase II (TOP2)規(guī)格:48T/96T
嘌呤霉素敏感性肽酶(PSA)ELISA Kit for Puromycin Sensitive Aminopeptidase (PSA)規(guī)格:48T/96T
基質(zhì)細(xì)胞衍生因子4(SDF4)ELISA Kit for Stromal Cell Derived Factor 4 (SDF4)規(guī)格:48T/96T
內(nèi)皮型一合酶(NOS3)ELISA Kit for Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial (NOS3)規(guī)格:48T/96T
鼻咽癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白抗體Sissotrin中文名:印度黃檀苷別名:分子式:C22H22O10
細(xì)胞分裂周期蛋白8抗體7,3',4'-Trihydroxy-3-benzyl-2H-chromene中文名:別名:分子式:C16H14O4
有絲分裂蛋白BUB3抗體Reynoutrin中文名:瑞諾苷別名:Quercetin 3-O-xyloside分子式:C20H18O11
骨形態(tài)發(fā)生蛋白9抗體4'-O-Methyltaxifolin中文名:4'-O-甲基花旗松素別名:Dihydrotamarixetin分子式:C16H14O7
骨形態(tài)發(fā)生蛋白1/膠原C蛋白肽鏈內(nèi)切酶抗體2''-O-Rhamnosylicariside II中文名:別名:分子式:C33H40O14
補(bǔ)體C3cα 鏈片段1抗體 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis種屬:Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis
提供形式:凍干物
安全等級:2
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:研究、質(zhì)量控制
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂:牛肉膏 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。
生長條件:36℃,好氧
存儲條件:真空冷凍干燥法腸沙門氏菌腸亞種嬰兒血清型