抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-Bak
中文名稱 Bcl-2同源拮抗劑抗體
別 名 Apoptosis Regulator Bak; BAK 1; BAK; BAK like; Bak NT; BAK1; Bcl 2 homologous antagonist/killer; Bcl 2 like 7 protein; Bcl2 homologous antagonist killer; Bcl2 like 7 Protein; BCL2-antagonist/killer 1; BCL2L7; CDN 1; CDN1; Cell death inhibitor 1; MGC117255; MGC3887; NBak; Pro apoptotic protein BAK; BAX_MOUSE.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 免疫學(xué) 細胞凋亡
蛋白分子量 predicted molecular weight: 23kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Bak C-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是Bcl-2同源拮抗劑抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
黑曲霉現(xiàn)貨,ATCC菌株
煙曲霉培養(yǎng),ATCC菌株
臭曲霉保存,ATCC菌株
泡盛曲霉售價,ATCC菌株
雜色曲霉現(xiàn)貨,ATCC菌株
多主枝孢(蠟葉芽枝霉)培養(yǎng),ATCC菌株
宛氏擬保存,ATCC菌株
匍枝根霉售價,ATCC菌株
糖磷異構(gòu)酶1(TPI1)ELISA Kit for Triosephosphate Isomerase 1 (TPI1)規(guī)格:48T/96T
蛋白二化物異構(gòu)酶A5(PDIA5)ELISA Kit for Protein Disulfide Isomerase A5 (PDIA5)規(guī)格:48T/96T
內(nèi)磺肽α(ENSα)ELISA Kit for Endosulfine Alpha (ENSa)規(guī)格:48T/96T
骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)ELISA Kit for Troponin I Type 2, Fast Skeletal (TNNI2)規(guī)格:48T/96T
微纖絲關(guān)聯(lián)蛋白4(MFAP4)ELISA Kit for Microfibrillar Associated Protein 4 (MFAP4)規(guī)格:48T/96T
Zeste同源物增強子2(EZH2)ELISA Kit for Enhancer Of Zeste Homolog 2 (EZH2)規(guī)格:48T/96T
序列相似家族5成員C(FAM5C)ELISA Kit for Family With Sequence Similarity 5, Member C (FAM5C)規(guī)格:48T/96T
Ⅻ型膠原(COL12)ELISA Kit for Collagen Type XII (COL12)規(guī)格:48T/96T
前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素5(PCSK5)ELISA Kit for Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 5 (PCSK5)規(guī)格:48T/96T
再生胰島衍生蛋白1β(REG1β)ELISA Kit for Regenerating Islet Derived Protein 1 Beta (REG1b)規(guī)格:48T/96T
/鉀離子交換ATP酶α肽(ATP4α)ELISA Kit for ATPase, H+/K+ Exchanging Alpha Polypeptide (ATP4a)規(guī)格:48T/96T
ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白A3(ABCA3)ELISA Kit for ATP Binding Cassette Transporter A3 (ABCA3)規(guī)格:48T/96T
B淋巴細胞淋巴瘤因子9抗體5,7,4'-Tri-O-methylcatechin中文名:別名:分子式:C18H20O6
腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白BAMBI抗體7-O-Methylporiol中文名:別名:分子式:C17H16O5
β淀粉樣肽(1-42)單克隆抗體Dodoviscin J中文名:別名:分子式:C22H22O7
膽汁酸鹽輸出泵/ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白11抗體Kuwanol C中文名:別名:分子式:C25H26O6
程序性死亡配體1抗體Hesperetin 5-O-glucoside中文名:別名:分子式:C22H24O11
Bcl-2同源拮抗劑抗體 Rhizobium arachis種屬:Rhizobium arachis
安全等級:1
模式菌株:no
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:根瘤菌培養(yǎng)基::Yeast eztract (酵母膏) 1g Soil eztract (土壤浸提液) 200ml Mannitol (甘露醇) 10g Agar (瓊脂) 15g Distilled water (蒸餾水) 800ml pH 7.2[Note]:Soil extract:Suspend 50g finely and dried gardon soil in 200ml of tap water. Autoclave at 121℃ for 1 hr. Decant through cotton-cloth, filler though paper, make up volume to 200ml. Resterilize for 20 minutes at 121℃ , then mixed with othringredients and distributed. (土壤浸提液的制法:取土壤50克,加水200毫升,15磅蒸煮1小時,經(jīng)濾紙過濾后加水補足到200毫升。)
生長條件:25-28℃,好氧,48h花生根瘤菌