抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
英文名稱 Anti-Bik
中文名稱 促凋亡Bik蛋白抗體
別 名 Apoptosis inducer NBK; BBC1; Bcl-2-interacting killer; BCL2 interacting killer; bhikhari; BIK; Bik-like killer protein; BIK_HUMAN; BIP 1; BIP1; BP 4; BP4; cb 60; NBK.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細胞生物 免疫學 細胞凋亡
蛋白分子量 predicted molecular weight: 18kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Bik
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
下列是促凋亡Bik蛋白抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
橙色粘球菌現(xiàn)貨,ATCC菌株
黃色粘球菌培養(yǎng),ATCC菌株
弱小珊瑚桿菌保存,ATCC菌株
葉柄粘球菌售價,ATCC菌株
侵蝕侏儒囊菌現(xiàn)貨,ATCC菌株
紫色孢囊桿菌培養(yǎng),ATCC菌株
孢囊桿菌保存,ATCC菌株
匣狀粘球菌售價,ATCC菌株
白介素12B(IL12B)ELISA Kit for Interleukin 12B (IL12B)規(guī)格:48T/96T
單核細胞趨化蛋白3(MCP3)ELISA Kit for Monocyte Chemotactic Protein 3 (MCP3)規(guī)格:48T/96T
Ⅲ型前膠原基端原肽(PⅢNP)ELISA Kit for Procollagen III N-Terminal Propeptide (PIIINP)規(guī)格:48T/96T
上皮中性粒細胞激活肽78(ENA78)ELISA Kit for Epithelial Neutrophil Activating Peptide 78 (ENA78)規(guī)格:48T/96T
補體成分5(C5)ELISA Kit for Complement Component 5 (C5)規(guī)格:48T/96T
肝腸鈣黏蛋白(CDH17)ELISA Kit for Cadherin 17 (CDH17)規(guī)格:48T/96T
血小板衍生生長因子A(PDGFA)ELISA Kit for Platelet Derived Growth Factor Subunit A (PDGFA)規(guī)格:48T/96T
基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)規(guī)格:48T/96T
白介素28受體(IL28R)ELISA Kit for Interleukin 28 Receptor (IL28R)規(guī)格:48T/96T
肌激酶MB同工酶(CKMB)ELISA Kit for Creatine Kinase MB Isoenzyme (CKMB)規(guī)格:48T/96T
過氧化物酶體增殖物激活受體δ(PPARδ)ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated Receptor Delta (PPARd)規(guī)格:48T/96T
主要堿性蛋白(MBP)ELISA Kit for Major Basic Protein (MBP)規(guī)格:48T/96T
P53凋亡刺激蛋白2抗體Quercetin 3-O-sophoroside中文名:槲皮素-3-O-槐糖苷別名:Baimaside; 白麻苷分子式:C27H30O17
N-甲基嘌呤DNA糖基化酶Epimedonin L中文名:別名:分子式:C30H34O5
AU5 tag標簽抗體3"-O-Desmethylspinorhamnoside中文名:別名:分子式:C33H38O15
鈣離子ATP酶通道蛋白抗體Lutonarin中文名:異葒草素-7-O-葡萄糖苷別名:Isoorientin 7-O-glucoside; 大麥黃苷分子式:C27H30O16
果桃α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗體Saponarin中文名:皂草黃苷別名:肥皂草苷分子式:C27H30O15
促凋亡Bik蛋白抗體 Candida│sp.種屬:Candida│sp.
分離基物:土壤
提供形式:凍干物
安全等級:1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:微生物采油,調(diào)剖。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0013
生長條件:25~28℃
存儲條件:真空冷凍干燥法假絲酵母屬