抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-AQP4
中文名稱 水通道蛋白4抗體
別 名 aquaporin 4; WCH4; Mercurial-insensitive water channel; MIWC; AQP 4; AQP4; Aquaporin4; HMIWC 2; HMIWC2; Mercurial insensitive water channel; MGC22454; MIWC; AQP4_HUMAN; Aquaporin-4; AQP-4.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 神經(jīng)生物學 通道蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 36kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human AQP4
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
下列是水通道蛋白4抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
潘隆尼亞堿湖桿菌 Pannonibacter sp.
產(chǎn)玉米素中溫黃桿菌 Mesoflavibacter zeaxanthinifaciens
藤黃微球菌 Micrococcus luteus
麥氏交替單胞菌 Alteromonas macleodii
惡臭假單胞菌 Pseudomonas putida
油田水海桿菌 Marinobacter salsuginis
深海王祖農(nóng)菌 Zunongwangia profunda
抑云玫瑰變色菌 Roseovarius nubinhibens
舞蹈土地桿菌 Pedobacter saltans
邊山假交替單胞菌 Pseudoalteromonas byunsanensis
Talanin蛋白(TALN)ELISA Kit for Talanin (TALN)規(guī)格:48T/96T
RIO激酶3(RIOK3)ELISA Kit for RIO Kinase 3 (RIOK3)規(guī)格:48T/96T
N-酰轉(zhuǎn)移酶15(NAT15)ELISA Kit for N-Acetyltransferase 15 (NAT15)規(guī)格:48T/96T
皮質(zhì)素3(CTXN3)ELISA Kit for Cortexin 3 (CTXN3)規(guī)格:48T/96T
整合素β8(ITGβ8)ELISA Kit for Integrin Beta 8 (ITGb8)規(guī)格:48T/96T
降鈣素受體(CTR)ELISA Kit for Calcitonin Receptor (CTR)規(guī)格:48T/96T
多肽-N-酰基半乳糖轉(zhuǎn)移酶5(GALNT5)ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 5 (GALNT5)規(guī)格:48T/96T
Midasin蛋白(MDN1)ELISA Kit for Midasin (MDN1)規(guī)格:48T/96T
肪酶J(LIPJ)ELISA Kit for Lipase J (LIPJ)規(guī)格:48T/96T
矢車菊苷α1(CENTα1)ELISA Kit for Centaurin Alpha 1 (CENTa1)規(guī)格:48T/96T
巰基轉(zhuǎn)移酶(MPST)ELISA Kit for Mercaptopyruvate Sulfurtransferase (MPST)規(guī)格:48T/96T
速激肽1(TAC1)ELISA Kit for Tachykinin, Precursor 1 (TAC1)規(guī)格:48T/96T
脊髓小腦共濟失調(diào)蛋白7抗體Vandrikidine中文名:別名:分子式:C22H26N2O4
β淀粉樣前體蛋白結(jié)合蛋白1抗體(X11α)Scandine中文名:斯坎定別名:3-(Methoxycarbonyl)meloscine分子式:C21H22N2O3
載脂蛋白E抗體Magnoflorine中文名:木蘭花堿別名:木蘭堿分子式:C20H24NO4
甲胎蛋白AFP抗體Calyxamine B中文名:別名:分子式:C12H21NO
陰離子交換蛋白2抗體N-Methyllindcarpine中文名:別名:2,11-Dihydroxy-1,10-dimethoxyaporphine分子式:C19H21NO4
水通道蛋白4抗體 Pichia│anomala種屬:Pichia│anomala
提供形式:凍干物
安全等級:1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:白酒生香。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0077
生長條件:28-30℃
存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法異常畢赤酵母