抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復)
英文名稱 Anti-APBB1/Fe65 protein
中文名稱 鐵蛋白Fe65抗體
別 名 Adaptor protein FE65a2; Amyloid beta (A4) precursor protein binding family B member 1; Amyloid beta A4 precursor protein binding family B; Amyloid beta A4 precursor protein binding family B member 1; Amyloid beta precursor protein binding family B member 1; APBB 1; APBB1; FE 65; Fe65 protein; MGC 9072; MGC9072; Protein Fe65; RIR; Stat like protein; Fe-65 Protein; APBB1_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領域 心血管 信號轉(zhuǎn)導 生長因子和激素 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 新陳代謝
蛋白分子量 predicted molecular weight: 77kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Fe65 protein N-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
下列是鐵蛋白Fe65抗體 的相關熱銷產(chǎn)品:
Sphingomonasfennica Sphingomonasfennica
嗜肺軍團菌 Legionellapneumophilasubsp.pneumophila
類干酪乳? .. Lactobacillusparacaseisubsp.paracasei
Methylophagamurata Methylophagamurata
Hyphomonasjohnsonii Hyphomonasjohnsonii
Hyphomonasrosenbergii Hyphomonasrosenbergii
Halobacillussp. Halobacillussp.
盲腸腸球菌 Enterococcuscecorum
海氏腸球菌 Enterococcushirae
耐久腸球菌(堅韌鏈球菌) Enterococcusdurans(Streptococcusdurans)
肝腎骨堿性磷酶(ALPL)ELISA Kit for Alkaline Phosphatase, Liver/Bone/Kidney (ALPL)規(guī)格:48T/96T
白蛋白(ALB)ELISA Kit for Albumin (ALB)規(guī)格:48T/96T
β,4-半乳糖轉(zhuǎn)移酶1(β4GALT1)ELISA Kit for Beta,4-Galactosyltransferase 1 (b4GALT1)規(guī)格:48T/96T
酪羥化酶(TH)ELISA Kit for Tyrosine Hydroxylase (TH)規(guī)格:48T/96T
干細胞因子(SCF)ELISA Kit for Stem Cell Factor (SCF)規(guī)格:48T/96T
胰島素樣生長因子結合蛋白2(IGFBP2)ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 2 (IGFBP2)規(guī)格:48T/96T
載蛋白C2(APOC2)ELISA Kit for Apolipoprotein C2 (APOC2)規(guī)格:48T/96T
二?;视?DAG)ELISA Kit for Diacylglycerol (DAG)規(guī)格:48T/96T
神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA Kit for Nerve Growth Factor (NGF)規(guī)格:48T/96T
調(diào)節(jié)激活正常T-細胞表達分泌因子(RANTES)ELISA Kit for Regulated On Activation In Normal T-Cell Expressed And Secreted (RANTES)規(guī)格:48T/96T
尿激酶型纖溶酶原激活因子受體(uPAR)ELISA Kit for Plasminogen Activator, Urokinase Receptor (uPAR)規(guī)格:48T/96T
聯(lián)素受體1(ADIPOR1)ELISA Kit for Adiponectin Receptor 1 (ADIPOR1)規(guī)格:48T/96T
磷酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗體1-Cinnamoylpyrrole中文名:別名:分子式:C13H11NO
去整合素樣金屬蛋白酶9抗體Apparicine中文名:別名:分子式:C18H20N2
Rho GTP酶激活蛋白20抗體Cyclo(D-Phe-L-Pro)中文名:別名:分子式:C14H16N2O2
含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族10抗體Cyclo(L-Ala-L-Pro)中文名:別名:Cyclo(alanylprolyl)分子式:C8H12N2O2
乙醛脫氫酶1蛋白家族L1抗體5,6-Dihydropyridin-2(1H)-one中文名:別名:分子式:C5H7NO
鐵蛋白Fe65抗體 Paenibacillus│lactis種屬:Paenibacillus│lactis
提供形式:凍干物
安全等級:1
模式菌株:no
應用領域:產(chǎn)β-淀粉酶。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0002
生長條件:28℃
存儲條件:真空冷凍干燥法乳酸類芽孢桿菌