抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-APOJ/Clusterin
中文名稱 載脂蛋白J抗體
別 名 AAG 4; AAG4 ;Aging associated protein 4; Clusterin-alpha/beta; APOJ; Apo J; Apolipoprotein J; Cli; CLU; Clusterin alpha chain; Clusterin; Clusterin beta chain; Complement associated protein SP 40 40; Complement associated protein SP 40; Complement associated protein SP40; Complement cytolysis inhibitor; Complement lysis inhibitor; KUB 1; KUB1; MGC24903; NA1/NA2; SGP 2; SGP2; SP 40; SP40; Sulfated glycoprotein 2; Testosterone repressed prostate message 2; TRPM 2; TRPM2; Clusterin- Alpha/Beta; Apolipoprotein J.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 心血管 細胞生物 免疫學 脂蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 50kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human APO J C-terminus
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應(yīng)用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
下列是載脂蛋白J抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
Methylobacteriumaquaticum Methylobacteriumaquaticum
Methylobacteriumtarhaniae Methylobacteriumtarhaniae
Sphingomonasabaci Sphingomonasabaci
Rhodococcusfascians Rhodococcusfascians
嗜肺軍團菌亞種 Legionellapneumophilasubsppneumophila
Microlunatusphosphovorus Microlunatusphosphovorus
銅綠假單胞菌 Pseudomonasaeruginosa
Sphingomonaspolyaromaticivorans Sphingomonaspolyaromaticivorans
Methylobacteriumplatani Methylobacteriumplatani
Sphingomonasyantingensis Sphingomonasyantingensis
聯(lián)素受體1(ADIPOR1)ELISA Kit for Adiponectin Receptor 1 (ADIPOR1)規(guī)格:48T/96T
心鈉肽(ANP)ELISA Kit for Atrial Natriuretic Peptide (ANP)規(guī)格:48T/96T
間隙連接蛋白43(CX43)ELISA Kit for Connexin 43 (CX43)規(guī)格:48T/96T
芳香酶(ARO)ELISA Kit for Aromatase (ARO)規(guī)格:48T/96T
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP5)ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 5 (IGFBP5)規(guī)格:48T/96T
細胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導因子(EMMPRIN)ELISA Kit for Extracellular Matrix Metalloproteinase Inducer (EMMPRIN)規(guī)格:48T/96T
親環(huán)素B(CYPB)ELISA Kit for Cyclophilin B (CYPB)規(guī)格:48T/96T
瘦素(LEP)ELISA Kit for Leptin (LEP)規(guī)格:48T/96T
乳過氧化物酶(LPO)ELISA Kit for Lactoperoxidase (LPO)規(guī)格:48T/96T
E選擇素(SELE)ELISA Kit for Selectin, Endothelium (SELE)規(guī)格:48T/96T
補體成分9(C9)ELISA Kit for Complement Component 9 (C9)規(guī)格:48T/96T
磷甘油酯激酶1(PGK1)ELISA Kit for Phosphoglycerate Kinase 1 (PGK1)規(guī)格:48T/96T
細胞周期末期促進復(fù)合蛋白APC1抗體Daphnicyclidin F中文名:別名:分子式:C23H27NO5
磷酸化蛋白激酶B2抗體Daurisoline中文名:蝙蝠葛蘇林堿別名:分子式:C37H42N2O6
磷酸化鐵蛋白Fe65抗體Strictosidinic acid中文名:別名:分子式:C26H32N2O9
發(fā)育分化增強因子1抗體Lumichrome中文名:別名:分子式:C12H10N4O2
磷酸化發(fā)育分化增強因子1抗體Cytochalasin B中文名:細胞松弛素B別名:分子式:C29H37NO5
載脂蛋白J抗體 Escherichia│coli種屬:Escherichia│coli
提供形式:凍干物
安全等級:1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:研究
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0002
生長條件:37℃
存儲條件:真空冷凍干燥法;定期移植法大腸埃希氏桿菌
關(guān)鍵字: 載脂蛋白J抗體 ;Anti-APOJ/Clusterin;100μg/200μg; 1mg/1ml ;一抗;