抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
英文名稱 Anti-ASF1A
中文名稱 細(xì)胞衰老相關(guān)蛋白ASF1A抗體
別 名 Anti silencing function 1A; ASF1 anti silencing function 1 homolog A; CCG1 interacting factor A; CG9383; CGI 98; CGI98 protein; CIA; dASF1; hAsf1; hAsf1a; hCIA; Histone chaperone ASF1A; HSPC146; ASF1A_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Pig, Cow
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 23kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ASF1A
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
下列是細(xì)胞衰老相關(guān)蛋白ASF1A抗體 的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
藍(lán)色犁頭霉 Absidia coerulea
羊肚菌屬 Morchella sp.
雞白痢沙門氏菌 Salmonella pullorum
滕梨根
阪崎腸桿菌 Enterobacter sakazakii
副溶血弧菌 Vibrio parahaemolyticus
產(chǎn)氣莢膜梭菌 Clostridium perfringens
枯草芽孢桿菌枯草亞種 Bacillussubtilissubsp.subtilis
里氏木霉 Trichoderma reesei
枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis
普通瓊斜面培養(yǎng)基(PH8.0.2)250克Common Nutrient Agar一般細(xì)菌的培養(yǎng),分離培養(yǎng)霍亂弧菌,埋迪霉菌鑒定用
PDP瓊250克King Medium A綠膿菌色素測定
M-H瓊平板10塊M-H Agar Plate
沙保弱氏瓊平板10塊沙保弱氏瓊平板
血瓊平板50塊Blood Agar Plate營養(yǎng)需求較高的細(xì)菌培養(yǎng)
SS瓊平板10塊SS Agar Plate沙門菌屬和志賀菌屬細(xì)菌的分離培養(yǎng)
甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基250克Mannitol Ferment Medium腸道桿菌的鑒別,細(xì)菌甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)
普通肉湯瓊平板50塊Nutrient Agar Plate一般細(xì)菌的培養(yǎng)和細(xì)菌總數(shù)的測定
克氏鐵瓊斜面平板10支KIA Plate
弧菌選擇瓊平板10塊TCBS Agar Plate
伊紅美蘭瓊平板10塊EMB Agar Plate腸道革蘭氏陰性菌的分離培養(yǎng)
中國藍(lán)瓊平板10塊China Blue Agar Plate
雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體(C端)Corynoxidine中文名:別名:Tetrahydropalmatine N-oxide分子式:C21H25NO5
乙醛脫氫酶2抗體Senecionine中文名:千里光堿別名:千里光寧; 千里光寧堿分子式:C18H25NO5
膜粘連蛋白10抗體1,7-Dihydroxyacridone中文名:1,7-二羥基吖啶酮?jiǎng)e名:1,7-Dihydroxyacridin-9(10H)-one分子式:C13H9NO3
前梯度同源蛋白2抗體Rutacridone中文名:別名:分子式:C19H17NO3
乙醛脫氫酶5抗體Taberdivarine H中文名:別名:分子式:C20H22N2O2
細(xì)胞衰老相關(guān)蛋白ASF1A抗體 Torulopsis│dattila種屬:Torulopsis│dattila
提供形式:斜面培養(yǎng)物
安全等級:1
模式菌株:no
應(yīng)用領(lǐng)域:以糖蜜為原料發(fā)酵生產(chǎn)酒精。
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:CM0077
生長條件:28-30℃
存儲條件:定期移植法棗椰球擬酵母