"OVCAR-3細胞：人卵巢腺癌細胞系
細胞背景資料：該細胞１９８２年由T.C. Hamilton等建系，源自一位６０卵巢腺癌的腹水，是卵巢癌抗藥性研究的模型。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２—１：４傳代，每周換液２—３次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管爆裂。
細胞凍存復蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞傳代的一般方法：開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS洗液沖洗細胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
Lec1細胞系相關產(chǎn)品：ChaGo-K-1細胞、Caco-2/BBe 1細胞、EOMA細胞
DanG細胞系相關產(chǎn)品：207細胞、TGW細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞
HMC3細胞系相關產(chǎn)品：LC-1Sq細胞、CG-4細胞、HConEpic細胞
CAL-85-1細胞系相關產(chǎn)品：SW837細胞、WIL2 Secreting細胞、NCI-H1688細胞
WM35細胞系相關產(chǎn)品：A-172細胞、293F細胞、H-2286細胞
MC38細胞系相關產(chǎn)品：QG56細胞、H-1238細胞、OCM1A細胞
KYSE 270細胞系相關產(chǎn)品：HOP92細胞、Hs739T細胞、G-361細胞
High5細胞系相關產(chǎn)品：C2BBe 1細胞、Kit225 K6細胞、BrCL15細胞
NCI-H146細胞系相關產(chǎn)品：B16-F10細胞、HCC1143細胞、DLD-1細胞
C41細胞系相關產(chǎn)品：HEK293-A細胞、C2A細胞、EMT6細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞系相關產(chǎn)品：Hs 294T細胞、U-118MG細胞、HNE-1細胞
Chinese Hamster Ovary細胞系相關產(chǎn)品：Hs934T細胞、SKBR-3細胞、MGC-803細胞
McA-RH8994細胞系相關產(chǎn)品：LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞
SJRH-30細胞系相關產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 14細胞、746T細胞、SuDHL 4細胞
SN12CPM6細胞系相關產(chǎn)品：SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞
UWB1.289細胞系相關產(chǎn)品：118MG細胞、NCIH196細胞、FD-LSC-1細胞
SUM102細胞系相關產(chǎn)品：CPAE細胞、GS9L細胞、H2.35細胞
CT26細胞系相關產(chǎn)品：H-EMC-SS細胞、GM03569B細胞、H-526細胞
BNL CL2細胞系相關產(chǎn)品：BT 20細胞、MDA2B細胞、Hs-600-T細胞
SW-1353細胞系相關產(chǎn)品：AZ521細胞、NCIH146細胞、C42細胞
Tu-212細胞系相關產(chǎn)品：SNU-475細胞、NCI-H526細胞、V79-4細胞
624mel細胞系相關產(chǎn)品：COLO206細胞、K-562細胞、HUT-28細胞
UACC 893細胞系相關產(chǎn)品：M2-10B4細胞、RT-BM-1細胞、293S細胞
THP-1細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR420細胞、P388-D1細胞、High Five細胞
MTEC1細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1833細胞、Vero 76 clone E6細胞、HS-294細胞
NCI-H460細胞系相關產(chǎn)品：SK Mel28細胞、NCI-H1793細胞、SW 480細胞
K7M2-WT細胞系相關產(chǎn)品：SW.620細胞、CMT93細胞、SCL-I細胞
LLCPK1細胞系相關產(chǎn)品：SK-NMC細胞、B-CPAP細胞、HBEpiC細胞
KATO III細胞系相關產(chǎn)品：MES 23.5細胞、PLC8024細胞、TGW-I-nu細胞
PCI-4M細胞系相關產(chǎn)品：hTERT RPE1細胞、52PE細胞、WM451Lu細胞
CEM-CCRF細胞系相關產(chǎn)品：PLC-8024細胞、A7r5細胞、COLO 320HSR細胞
BL-6細胞系相關產(chǎn)品：CAL62細胞、Hs729細胞、HemECs細胞
TFH細胞系相關產(chǎn)品：RAW 264.7細胞、NU-GC-2細胞、OCILY-10細胞
CCD19Lu細胞系相關產(chǎn)品：Kasumi-1細胞、McA-RH7777細胞、Kit-225細胞
SK Col 1細胞系相關產(chǎn)品：KOSC-2細胞、NCIH2228細胞、NCI H929細胞
H-1666細胞系相關產(chǎn)品：OCI-AML-2細胞、BE(2)M-17細胞、HCC1428細胞
SNU-216細胞系相關產(chǎn)品：MHCC97-L細胞、JVM-3細胞、M-NFS-60細胞
6-T CEM細胞系相關產(chǎn)品：1.1B4細胞、TR146細胞、Walker256細胞
SACCLM細胞系相關產(chǎn)品：HEK 293細胞、HCT/Taxo1細胞、Det. 562細胞
Human Hepatocyte Line 5細胞系相關產(chǎn)品：COLO206F細胞、NB.4細胞、Huh7.5細胞
WPMY-1細胞系相關產(chǎn)品：8226細胞、K7M2-WT細胞、VM Cub 1細胞
A172細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly 8細胞、SN12C-PM6細胞、RPMI-7951細胞
J111細胞系相關產(chǎn)品：NCIH650細胞、Hs819T細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞
TMD-8細胞系相關產(chǎn)品：293-FT細胞、SKNBE-2細胞、CEM-0細胞
SW-48細胞系相關產(chǎn)品：COLO 16細胞、H-2030細胞、B16 F1細胞
2780CP細胞系相關產(chǎn)品：KOPN8細胞、TFH細胞、CHP-100細胞
293/EBNA-1細胞系相關產(chǎn)品：SK_N_FI細胞、Ly3細胞、U2-OS細胞
NCIH1666細胞系相關產(chǎn)品：MDCK (NBL-2)細胞、SUDHL10細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞
OCI-Ly 19細胞系相關產(chǎn)品：SK-HEP-1細胞、UCLA RO-81-A-1細胞、J 82細胞
HEK-EBNA細胞系相關產(chǎn)品：SK-ES細胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞
SK-MEL-5細胞系相關產(chǎn)品：H28細胞、Mel624細胞、NCI-SNU-C1細胞
HUVEC細胞系相關產(chǎn)品：QG-56細胞、HCC0078細胞、CL1-5細胞
WM239細胞系相關產(chǎn)品：GM03320D細胞、SNU-423細胞、TU 686細胞
DAN-G細胞系相關產(chǎn)品：aNK細胞、MC 3T3-E1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞
L1210細胞系相關產(chǎn)品：HCA-7細胞、SVG p12細胞、TE9細胞
MDAMB415細胞系相關產(chǎn)品：293F細胞、SCL-I細胞、MDA436細胞
K-1735細胞系相關產(chǎn)品：786.O細胞、Calu 6細胞、HSAS3細胞
EFM-19細胞系相關產(chǎn)品：SKMES細胞、RD-ES細胞、HT-115細胞
RAW-264.7細胞系相關產(chǎn)品：HCC1937細胞、G361細胞、NCIH2029細胞
H2196細胞系相關產(chǎn)品：LA-N-6(OAN)細胞、MC/CAR細胞、IGR-OV1細胞
M07e細胞系相關產(chǎn)品：BS-C-1細胞、SW 1271細胞、LTEPsm細胞
KOSC-2細胞系相關產(chǎn)品：OAW42細胞、Mel-MeWo細胞、T-ALL-1細胞
NIH-3T3細胞系相關產(chǎn)品：TM-4細胞、CAL-85-1細胞、HA1800細胞
Bac12F5細胞系相關產(chǎn)品：RERF-LCMS細胞、WEHI 164細胞、H-28細胞
KBM-7/Hap8細胞系相關產(chǎn)品：HEP3B2細胞、GCT0404細胞、4T1-A細胞
Vx-2細胞系相關產(chǎn)品：HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞
451-LU細胞系相關產(chǎn)品：U-138 MG細胞、LY-R細胞、HOP92細胞
MDCK-2細胞系相關產(chǎn)品：Ku812F細胞、HS578T細胞、Swiss/3T3細胞
OSKM-1細胞系相關產(chǎn)品：CMEC/D3細胞、Hs 839.T細胞、CCD-841-CoTr細胞
143 B細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-407細胞、ARO-81細胞、SKM-1細胞
COLO-320DM細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H510A細胞、PA12細胞、SRA01/04 (HLE)細胞
NCI-H1373細胞系相關產(chǎn)品：HLMVEC細胞、mRTEC細胞、DSL6A/C1細胞
HMC-1細胞系相關產(chǎn)品：ML-2細胞、A9(Hamprecht)細胞、C33-A細胞
MDAMB468細胞系相關產(chǎn)品：32Dc3細胞、Anip973細胞、STTG1細胞
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