"NIT-1細(xì)胞：小鼠胰腺β細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代，每周換液１-２次
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因?yàn)楹窟^低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購買的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至７０%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個(gè)最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí)，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡單的實(shí)驗(yàn)，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時(shí)盡可能溫和，使對細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
Pt-K2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA 231-LM2-4175細(xì)胞、HFT-8810細(xì)胞、HKF細(xì)胞
RA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T47D細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞、MV522細(xì)胞
Sup T-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、MC116細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞
HSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578-T細(xì)胞、EPC細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞
Jurkat Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2Z細(xì)胞、D-324MED細(xì)胞、RIN-m細(xì)胞
VK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L26細(xì)胞、H2170細(xì)胞、H2171細(xì)胞
CCD-841-CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DOK細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞、LK 2細(xì)胞
BEL7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、2PK3細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞
HSC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2081細(xì)胞、Nb2細(xì)胞、HUCEC細(xì)胞
HTSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM-1215細(xì)胞、Ej138細(xì)胞、HTori-3細(xì)胞
OSKM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMEC/D3細(xì)胞、Hs 839.T細(xì)胞、CCD-841-CoTr細(xì)胞
H-1435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD15細(xì)胞、H-2135細(xì)胞、OCI/AML2細(xì)胞
OK-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BBE細(xì)胞、AML-193細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞
ML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA細(xì)胞、H2452細(xì)胞、NCIH508細(xì)胞
CCD 966 SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780 CP70細(xì)胞、149PT細(xì)胞、BE2-C細(xì)胞
SNU-354細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 20細(xì)胞、Ketr-3細(xì)胞、NCTC-1469細(xì)胞
SNU-354細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK RC 20細(xì)胞、Ketr-3細(xì)胞、NCTC-1469細(xì)胞
NCI-H524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL8細(xì)胞、IMR32細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞
Jurkat細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt-K1細(xì)胞、ACC2細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞
BEL-7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1793細(xì)胞、OSKM-1細(xì)胞、Kit225/K6細(xì)胞
HIMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-157細(xì)胞、2V6.11細(xì)胞、SCL-2細(xì)胞
J774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LuCL4細(xì)胞、SKM1細(xì)胞、H-2066細(xì)胞
HRA 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NCI-H2444細(xì)胞、L02細(xì)胞
3T3-L1 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283 Med細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞、H2009細(xì)胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3M細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞、MLM細(xì)胞
A-72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-157細(xì)胞、aTC1 Clone 6細(xì)胞、NU-GC-4細(xì)胞
SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL7702細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞
NCI-H719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca 9-22細(xì)胞、HLEC細(xì)胞、JG細(xì)胞
BEND細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJ-Rh 30細(xì)胞、HBMEC細(xì)胞、MOLP-2細(xì)胞
RL-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266S細(xì)胞、MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞、MDA468細(xì)胞
HS688AT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OPM2細(xì)胞、COV 504細(xì)胞、Adeno 293細(xì)胞
OV1-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H740細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞、UPCI:SCC154細(xì)胞
A1847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H345細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞、P-2003細(xì)胞
Douglas Foster-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2227細(xì)胞、APRE-19細(xì)胞、NIH:OVCAR-3細(xì)胞
B10BR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H838細(xì)胞、OVCA5細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞
BAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C28/I2細(xì)胞、H295細(xì)胞、LK2細(xì)胞
Colo-678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupB15WT細(xì)胞、Hela-mock細(xì)胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞
BHP-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 2細(xì)胞、FCCH1018細(xì)胞、OE33細(xì)胞
PaTu8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs863T細(xì)胞、HCEC-B4G12細(xì)胞、HPBALL細(xì)胞
MB39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Ardle 7777細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞
PA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2a細(xì)胞、EJ-1細(xì)胞、K-562細(xì)胞
OVCA420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H 9細(xì)胞、MGH-U1細(xì)胞、CEM-CCRF細(xì)胞
NCI-H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910PM細(xì)胞、U87MG細(xì)胞、FHCRC-11細(xì)胞
NCIH1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AA細(xì)胞、KPL4細(xì)胞、HUV-EC-C細(xì)胞
CNE2Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOU-NH-91細(xì)胞、COS-1細(xì)胞、CNE細(xì)胞
MDA-MB435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK-21細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞、NCI-H1238細(xì)胞
H69/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mo 59J細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞、HFT-8810細(xì)胞
NK-92MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLMT1細(xì)胞、SUPB-15細(xì)胞、NCI-SNU-407細(xì)胞
WiDr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF細(xì)胞、TOV-112細(xì)胞、L cell細(xì)胞
NCI-H2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：174xCEM.T2細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞、hEEC細(xì)胞
PC 61 5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE1-E6E7細(xì)胞、ST2細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞
Hmy.2 CIR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/c3T3細(xì)胞、NE1細(xì)胞、KYSE 450細(xì)胞
H283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 Bl細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞、Gerner 7666細(xì)胞
HEMCSS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：STTG1細(xì)胞、SKCO 1細(xì)胞、RL95細(xì)胞
LTEPsm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H596細(xì)胞、ONS76細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞
Det. 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H19-7細(xì)胞、SNU620細(xì)胞、MES 13細(xì)胞
RC92A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1648細(xì)胞、CCC-HEH-2細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞
SCC-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75-1細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞
COLO 741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H820細(xì)胞、hs 68細(xì)胞、LA-795細(xì)胞
U373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASPC1細(xì)胞、BIC1細(xì)胞、Y-79細(xì)胞
Emory University-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI747細(xì)胞、CHP100細(xì)胞、Capan-2細(xì)胞
PC-3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞、NCIH128細(xì)胞、8226/S細(xì)胞
COLO.205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3細(xì)胞、RCM1細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞
SKRC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32 mel細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞、CCD-112CoN細(xì)胞
SL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C22 (Clara)細(xì)胞、H-2342細(xì)胞、HBL100細(xì)胞
SNU620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H196細(xì)胞、NCI-H1838細(xì)胞、DU-145細(xì)胞
EM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WISH細(xì)胞、BRL3A細(xì)胞、Mino細(xì)胞
JG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC9細(xì)胞、High5細(xì)胞、MFE-296細(xì)胞
OCI/AML-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDST8細(xì)胞、293FT細(xì)胞、He La細(xì)胞
H4-II-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hmy.2 CIR細(xì)胞、PANC 203細(xì)胞、624細(xì)胞
B35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-3細(xì)胞、NHRF細(xì)胞、QSG7701細(xì)胞
MDA435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-3細(xì)胞、NCI-H1770細(xì)胞、BGC-823細(xì)胞
Sup T-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞、KPNRTBM1細(xì)胞
IMCD-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRASMC細(xì)胞、GM17346細(xì)胞、EOC-20細(xì)胞
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