"Hepa 1-6細胞：小鼠肝癌細胞系
細胞背景資料：此細胞株源自C５７/L小鼠中引發(fā)的BW７７５６肝癌；表達AFP、α１抗胰蛋白酶、淀粉酶；鼠痘病毒陰性。此細胞可以在無血清的培養(yǎng)基中繁殖，培養(yǎng)基成分是：DMEM,７５%;Waymouth＇sMAB８７/３培養(yǎng)基，２５%。添加３x１０-８M。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，原因比較復(fù)雜，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳；解凍過程錯誤；冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心；懸渾細胞誤認為死細胞；培養(yǎng)溫度使用錯誤；細胞置于-８０℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００×g(約１O(jiān)OOrpm),５-１０分鐘，轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離；rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)；RCF(relative centrifugal force)為相對離心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍數(shù)來表示單位。
細胞株(系)的使用，為醫(yī)學(xué)研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的，長期連續(xù)傳代的細胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細胞失去原有的遺傳特性，有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞，以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前，細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍，細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應(yīng)。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高，pH值改變，部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性，引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變，使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷，而致細胞死亡。因此，細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分，減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑，這兩種物質(zhì)分子量小，溶解度大，易穿透細胞，可以使冰點下降，提高細胞膜對水的通透性，且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外，減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會，從而減少冰晶對細胞的損傷。
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
A2780S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-33細胞、3T3 clone A31細胞、WSU-DLCL2細胞
Jurkat clone A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞
HIT.T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M3 Clone M-3細胞、H7721細胞、Capan 1細胞
B16-F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs737T細胞、AK細胞、HOEC細胞
IPLB-SF-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Z-138細胞、COLO320 DM細胞、786O細胞
FU-MMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1a細胞、H-522細胞、SK-Mel 2細胞
SKNBE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-433細胞、BC3H-1細胞、JS1細胞
MV 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB361細胞、UCLA SO M21細胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞
VB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H526細胞、H-2452細胞、CCC-HEH-2細胞
SCL I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCW 100細胞、SF-295細胞、Centre Antoine Lacassagne-33細胞
Simpson細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERFLCMS細胞、TE-9細胞、UMRC-2細胞
Caov-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IR983F細胞、Cor L51細胞、SW13細胞
HSAEC1-KT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-403細胞、Duke University 4475細胞、H-1623細胞
MDA-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JCA1細胞、CHP-100細胞、Caco-2/BBe 1細胞
TE 671細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC15細胞、RT4細胞、SACCLM細胞
SKCO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-1E8細胞、NG108-15細胞、RBVEC細胞
SKCO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-1E8細胞、NG108-15細胞、RBVEC細胞
HCC1359細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL2細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞、LL/2 (LLC1)細胞
KU 812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9 (Hamprecht)細胞、SK-MEL-28細胞、SKUT-1細胞
LL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH-DF 1細胞、HL-60細胞、SW 1116細胞
CF PAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-DLCL(2)細胞、NCI-H841細胞、TE12細胞
MODE-K細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B細胞、GM03190A細胞、H-69細胞
HS-294細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPL-4細胞、RIN-m5F細胞、Huh 7.5細胞
NB4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep G2細胞、H524細胞、COR-L105細胞
MUM2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EL4細胞、H-187細胞、KP-N-RT-BM-1細胞
LAN5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1463細胞、293GP細胞、H295細胞
H-1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 863.T細胞、MCF 10A細胞、H-1238細胞
CCD 19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 671細胞、HCC1569細胞、H2198細胞
SK MEL-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mv 1 Lu細胞、SK-ChA1細胞、RGCs細胞
MSTO-211細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC2細胞、TFK1細胞、SK.MEL.2細胞
MV4:11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30OHK細胞、K1細胞、BXPC3細胞
Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa S-3細胞、RPMI-8402細胞、G-Olig2細胞
BSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV 504細胞、Tn5B1-4細胞、RBMVEC細胞
CD 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU1919細胞、Earle's L cells細胞、HR-8348細胞
LoMeT-ccRcc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RASMCs細胞、EoL-1細胞、OVCAR.5細胞
Evsa-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9S1細胞、C42細胞、NCI-H1703細胞
LLC-WRC 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuNS1細胞、HEEpiC細胞、MHCC-LM3細胞
CNE2Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LOU-NH-91細胞、COS-1細胞、CNE細胞
H-1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG p12細胞、H1734細胞、WM-239A細胞
NCI-H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-H細胞、NCI660細胞、JVM3細胞
Hepa-RG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 763細胞、DHL4細胞、NCIH1373細胞
Y3Ag1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLMS1細胞、SNU16細胞、MDA MB 361細胞
GalK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、HEB細胞、WiDr細胞
RKO-AS-45-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC996細胞、SuDHL 5細胞、Vero 76 clone E6細胞
MLE-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞
Hs895T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、SK-N-AS細胞、MOLP2細胞
MKN45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-671細胞、MCMEC細胞、SVG(P12)細胞
SUM 102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H660細胞、BC-009細胞、SK-LU-1細胞
JROECL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOCF細胞、BHK細胞、C3H10T1/2CL8細胞
L-363細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2342細胞、MCF-7細胞、SK ES 01細胞
Suzhou Human Glioma-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞
SCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Plaepi 34細胞、VM-CUB1細胞、BHT101細胞
WiDr/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞
WC00044細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 EBNA細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、MDA-175細胞
RKO_AS45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCL-H548細胞、X63-Ag8.653細胞、Saos2細胞
U-2932細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 839.T細胞、P3HR1細胞、NRK52E細胞
U-2932細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 839.T細胞、P3HR1細胞、NRK52E細胞
NB1RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-2-LUC細胞、H-1819細胞、SHIN-3細胞
COLO.205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3細胞、RCM1細胞、NCI-1155細胞
SJCRH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞
A549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341Med細胞、38C13細胞、CATHa細胞
OVCAR-433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435 S細胞、BC3H1細胞、Hs578Bst細胞
3T3-A31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBE細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞、SupB15WT細胞
NL20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN m5F細胞、MLFC細胞、LTEP-sm 1細胞
MEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 111細胞、Rat Chondrosarcoma Swarm細胞、SK Col 1細胞
MC 3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUNE1細胞、WBF344細胞、OE19細胞
ROS17/2.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI細胞、HOS TE 85細胞、SKNAS細胞
SNU-484細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T.T細胞、KTC-1細胞、EBNA293細胞
L78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L929(NCTC)細胞、HEC-151細胞、MCF-12F細胞
NCI-H2198細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca761細胞、OVCAR5細胞、DSL6A/C1細胞
LTEP-s細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC6細胞、Mino細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞
Reuber H35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細胞、SBC-3細胞、MOLT-16細胞
HIT T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 8細胞、PK-15細胞、SNK1細胞
HPDE6c7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Oregon J-111細胞、IEC18細胞、INS-1E細胞
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