"TCCSUP細(xì)胞：人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代，２-３天換液１次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞復(fù)蘇基本方法：１．從液氮罐中取出安剖；有時因安剖未封嚴(yán)，浸入了液氮，取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸，因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。２．迅速放入盛有３６℃～３７℃水的搪瓷罐中，扣上蓋并不時搖動，盡快解凍。３．剪開紗布口袋，取出安剖，用７０％酒精擦拭消毒后，凈化臺上打開蓋，用吸管吸出細(xì)胞懸液，裝入離心管中，再補(bǔ)加１０ml培養(yǎng)液，吹打使細(xì)胞懸浮。４．低速離心（５００～１０００轉(zhuǎn)/分）５分鐘，取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。５．加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后，再移裝入培養(yǎng)瓶中，置溫箱培養(yǎng)，次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T２５ flask細(xì)胞時，處理方式為：在寄送過程中，為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡，T２５ flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀，并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象，若有任何問題，不要打開蓋子，請立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T２５ flask靜置于３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱中，使細(xì)胞回溫至３７°C，并讓運(yùn)送過程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長。隔天后，于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約５-１０ml培養(yǎng)基于flask內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中，或細(xì)胞已長滿盤，則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
JVM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-761細(xì)胞、MDA-MB-231細(xì)胞、SH-SY5Y細(xì)胞
IOSE-Van細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM Cub 1細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞、HMO6細(xì)胞
SU-DHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695細(xì)胞、HEC1B細(xì)胞、Mono-Mac-6細(xì)胞
OVCAR 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSCC1細(xì)胞、HIEC細(xì)胞、NPA-87細(xì)胞
RCC_7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-2 OS細(xì)胞、IOSE80UBC細(xì)胞、OLN93細(xì)胞
HC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hca-F細(xì)胞、BT-483細(xì)胞、KATO 3細(xì)胞
COLO 738細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 98 G細(xì)胞、Hs 688(A).T細(xì)胞、P560細(xì)胞
BEL-7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：5-8F細(xì)胞、P-36細(xì)胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞
PG-BE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1792細(xì)胞、SUPT-1細(xì)胞、H510A細(xì)胞
HCC44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH358細(xì)胞、SF295細(xì)胞、ME1細(xì)胞
MDA 1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC2/Ad細(xì)胞、Huh-7.5.1細(xì)胞、HCC2185細(xì)胞
FHL 124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：38C13細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞、FRO 81-2細(xì)胞
H-64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-80細(xì)胞、RDES細(xì)胞、HPASMC細(xì)胞
EBNA-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(1)細(xì)胞、QBC(939)細(xì)胞、GP5d細(xì)胞
EL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK.2細(xì)胞、SK-MEL3細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞
SCH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP T1細(xì)胞、Metastatic Variant 522細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞
251 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2BS細(xì)胞、NCIH1618細(xì)胞、Hep G2/C3A細(xì)胞
TR146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞、T98 G細(xì)胞、TF-1細(xì)胞
NCI-H1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L23細(xì)胞、Madison 109細(xì)胞、C643細(xì)胞
TE-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MEL 28細(xì)胞、MFC細(xì)胞、REC-1細(xì)胞
OCI-Ly1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THPI細(xì)胞、Mahlavu細(xì)胞、HCC1500細(xì)胞
A 253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31 FUJ細(xì)胞、HFLS-RA細(xì)胞、FOXNY細(xì)胞
Hs695細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB4細(xì)胞、C-33-A細(xì)胞、M109細(xì)胞
MMVECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE 280細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞
Plaepi 34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA PCa 2b細(xì)胞、NBL_S細(xì)胞、CA922細(xì)胞
KLN 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175細(xì)胞、COLO357細(xì)胞、Hep3B細(xì)胞
DMS114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞
PGBE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Simpson細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞、C6661細(xì)胞
SP2-0-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-81細(xì)胞、Toledo細(xì)胞、MHH-CALL2細(xì)胞
NTera2 cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu8988s細(xì)胞、253J B-V細(xì)胞、CoC1細(xì)胞
MH-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、PC12(高分化)細(xì)胞、KE39細(xì)胞
KOSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAW42細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞
PaTu-8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305-C細(xì)胞、EBC-1/original細(xì)胞、SCC154細(xì)胞
SCL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-266-4細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞
H2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H889細(xì)胞、T-84細(xì)胞、PLA802細(xì)胞
SF-539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCCVII細(xì)胞、HCC4006細(xì)胞、UMR 106細(xì)胞
BPH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H711細(xì)胞、HEK;293細(xì)胞、Hs-746T細(xì)胞
NHLF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：149PT細(xì)胞、A-1847細(xì)胞、Anglne細(xì)胞
U-251 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-EOL-1細(xì)胞、AMO1細(xì)胞、PC615.3細(xì)胞
SK-RC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SC細(xì)胞、H4IIE細(xì)胞、HT 1080.T細(xì)胞
Tadarida brasiliensis 1 lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JCA-1細(xì)胞、SCC15細(xì)胞、P30/OHK細(xì)胞
HCC-1954BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker256-TC細(xì)胞、WSUDLCL2細(xì)胞、MEF細(xì)胞
SW-954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HB 611細(xì)胞、KG1細(xì)胞、PC 12細(xì)胞
MDCK II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SC1細(xì)胞、G-292細(xì)胞、130 T細(xì)胞
H-2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK 15細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞
A-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAD 2細(xì)胞、IOSE 29細(xì)胞、ETCC-007細(xì)胞
HCC0095細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ha Fe細(xì)胞、L-1210細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞
BALL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2細(xì)胞、SACC-LM細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞
MV-4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-3細(xì)胞、SPC-A1細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞
H-2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149-PT細(xì)胞、SCL II細(xì)胞、Hs 863.T細(xì)胞
hFOB 1.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8細(xì)胞、MiaPaCa2細(xì)胞、THP-1(ATCC)細(xì)胞
SUD6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1623細(xì)胞、RCS細(xì)胞、Walker-256-TC細(xì)胞
VM Cub 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1E細(xì)胞、HLEpiC細(xì)胞、22Rv1細(xì)胞
32D.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TKB-1細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞、Capan1細(xì)胞
RGCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES-1細(xì)胞、C81-61細(xì)胞、3T6 Swiss Albino細(xì)胞
MHCC 97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIT-1細(xì)胞、SW-626細(xì)胞、16HBEo-細(xì)胞
BS-C-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87-MG細(xì)胞、RCC-4細(xì)胞、H-1693細(xì)胞
WEHI 164 TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs683T細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞、MARC 145細(xì)胞
NIH:OVCAR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Super Tube細(xì)胞、HDLM-2細(xì)胞、IMR32細(xì)胞
COLO206細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM-6-M1細(xì)胞、H-II-E-C3細(xì)胞、SU-DHL-16細(xì)胞
NCIH146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H64細(xì)胞、A375SM細(xì)胞、293-F細(xì)胞
SUDHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H841細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞
Mouse INsulinoma 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251MG細(xì)胞、H1436細(xì)胞、WI38細(xì)胞
SKMEL-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-134細(xì)胞、AE 1201細(xì)胞、MV4II細(xì)胞
WM451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 1.Tes細(xì)胞、U-138 MG細(xì)胞、NK10a細(xì)胞
H6c7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y-1細(xì)胞、253JB-V細(xì)胞、LL/2細(xì)胞
Uhth-74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞、P30-OHK細(xì)胞、OSKM-1細(xì)胞
MBT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9/GR細(xì)胞、M-14細(xì)胞、MHCC97H細(xì)胞
MILE SVEN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-A31細(xì)胞、HuH7細(xì)胞、IFRS1細(xì)胞
SKRC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32 mel細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞、CCD-112CoN細(xì)胞
Kit 225細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCC-IT細(xì)胞、LN-229細(xì)胞、PaTu 8988s細(xì)胞
MDCK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR-3細(xì)胞、FHL124細(xì)胞、OVCA420細(xì)胞
SU-DHL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695細(xì)胞、SKMEL2細(xì)胞、HBZY-1細(xì)胞
Kelly細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC15細(xì)胞、MIA-Pa-Ca-2細(xì)胞、AR4-IP細(xì)胞
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