"Malme-3M細(xì)胞：人惡性黑色素瘤細(xì)胞系

細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞生長：貼壁

細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：４傳代，２天換液１次。

細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系

細(xì)胞生長特性：混合生長

如何進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇：１)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入３７℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化；２)從３７℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細(xì)胞懸液，加到離心管并滴加１０倍以上培養(yǎng)液，混勻；３)離心，１０００rpm，５min；４)棄去上清液，加入含１０%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，計數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度，接種培養(yǎng)瓶，３７℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；５)次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)?！緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存，但為對數(shù)生長期細(xì)胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液；２)將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護(hù)工作(戴棉手套)，以免凍傷；３)凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。細(xì)胞復(fù)蘇的時候，有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸，該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細(xì)節(jié)要注意的？一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口，再稍擰松蓋子，再放３７度水浴鍋中搖溶，在將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到裝有３７度預(yù)熱過的培養(yǎng)基的試管中，迅速離心，再用培養(yǎng)基洗一遍。

細(xì)胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項：１.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時以上。２.進(jìn)入凈化室前先關(guān)閉紫外燈，打開超凈臺風(fēng)機(jī)，等待３０min以上，以排盡臭氧。３.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。４.風(fēng)淋２分鐘。５.０.１%水泡手，擦干。６.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應(yīng)避免放入過多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。７.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼。８.水平式風(fēng)機(jī)的超凈臺，應(yīng)使瓶口斜置，應(yīng)盡量避免瓶口敞開直立。９.同一根吸管或滴管不應(yīng)連續(xù)用于幾個不同的細(xì)胞系；吸取培養(yǎng)基的吸管應(yīng)離開培養(yǎng)瓶或試管口０.５cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口；以防止細(xì)胞系的互相混雜污染。１０.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。１１.操作完畢后恢復(fù)工作臺面。

細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細(xì)胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對數(shù)生長期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時盡可能溫和，使對細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。

V79-GalK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05372E細(xì)胞、NCIH322細(xì)胞、NCIH2196細(xì)胞

PK 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC-MSB1細(xì)胞、HCC95細(xì)胞、Panc 3.27細(xì)胞

HPAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero細(xì)胞、FBHE細(xì)胞、SK-SH-SY5Y細(xì)胞

MAVER-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-193細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞

PK13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA PaCa-2細(xì)胞、MM1S細(xì)胞、BEAS-2B細(xì)胞

BC3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：769P細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞、GEO細(xì)胞

293GP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT.549細(xì)胞、H-23細(xì)胞、R3/1細(xì)胞

HCC0078細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144細(xì)胞、OVCAR-4細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞

hTERT RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞、H-2108細(xì)胞

KYSE0030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hOMF細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞

HuH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H747細(xì)胞、Wien133細(xì)胞、AKR細(xì)胞

HS-445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC.3細(xì)胞、HLE-SRA-01/04細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞

A-704細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM C7細(xì)胞、HCV29細(xì)胞、NCI-H676B細(xì)胞

Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB435細(xì)胞、MOPC細(xì)胞、SNU-368細(xì)胞

Panc_04_03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD38細(xì)胞、J 111細(xì)胞、SNU-739細(xì)胞

MKN 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-N細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞

MKN 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-N細(xì)胞、RPMI #1846細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞

MALME.3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J細(xì)胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞、SP-2細(xì)胞

KU-812F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：E304細(xì)胞、LAN-6細(xì)胞、BpRc1細(xì)胞

Hs839.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC154細(xì)胞、VMM39細(xì)胞、Becker細(xì)胞

LN382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：526mel細(xì)胞、PL5細(xì)胞、GC1-SPG細(xì)胞

H727細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM-1細(xì)胞、A2780/CP70細(xì)胞、NCI-H358細(xì)胞

AML-193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU878細(xì)胞、KYSE 30細(xì)胞、Kelly細(xì)胞

Lewis-Lung細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH187細(xì)胞、CCRF細(xì)胞、HCC-1954細(xì)胞

MC3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞、Panc 02細(xì)胞、COLO 201細(xì)胞

BTT739細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-937細(xì)胞、H1869細(xì)胞、My-La 2059細(xì)胞

WM35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-172細(xì)胞、293F細(xì)胞、H-2286細(xì)胞

SK-MEL-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSF細(xì)胞、AQ-Mel細(xì)胞、4-1st細(xì)胞

Hs683T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1836細(xì)胞、PBL細(xì)胞、HTori3細(xì)胞

624 MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC1細(xì)胞、CCD-841CoN細(xì)胞、COLO-684細(xì)胞

HEK/293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5A細(xì)胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞

LIPF178C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC8細(xì)胞、GM04154細(xì)胞、C41細(xì)胞

COLO-741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF2細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞

KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1299細(xì)胞、SUP-B15細(xì)胞、C6細(xì)胞

PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1694細(xì)胞、hEEC細(xì)胞、HCT116細(xì)胞

MODE-K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B細(xì)胞、GM03190A細(xì)胞、H-69細(xì)胞

PK13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA PaCa-2細(xì)胞、MM1S細(xì)胞、BEAS-2B細(xì)胞

MDA-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GA-10 (Clone 4)細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞、F-36P細(xì)胞

Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA 205細(xì)胞、GM00346B細(xì)胞、Capan-1細(xì)胞

HCC44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH358細(xì)胞、SF295細(xì)胞、ME1細(xì)胞

OVCAR.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero C1008細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞、Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞

SUM-159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1341細(xì)胞、HS5細(xì)胞、JurkatE6-1細(xì)胞

Earles's cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3 H1細(xì)胞、OCI-LY-8細(xì)胞、NCI-SNU-C2B細(xì)胞

RCC 7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-205細(xì)胞、WEHI231細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞

Anip[973]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16BL6細(xì)胞、WTRL1細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞

G292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb 2細(xì)胞、HS940細(xì)胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞

U2-OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEnd3細(xì)胞、SK-RC-52細(xì)胞、OAW-42細(xì)胞

CNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6Cl30細(xì)胞、SP-2細(xì)胞、MC26細(xì)胞

Potorous tridactylus Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE30細(xì)胞、RCC 7860細(xì)胞、Farage細(xì)胞

LS-411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1693細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞、OVCA433_Bast細(xì)胞

HCC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRO81-2細(xì)胞、YD-38細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞

WM 266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 167細(xì)胞、SNU484細(xì)胞、CTLL-2細(xì)胞

H-2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT116/L細(xì)胞、LoVo細(xì)胞、H1563細(xì)胞

MCF-12A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSC-1細(xì)胞、SKHEP-1細(xì)胞、EB-2細(xì)胞

HS-766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1353細(xì)胞、NCI-H2085細(xì)胞、C32r細(xì)胞

PL12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE140細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞

PL12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE140細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞

Hs27F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt3A細(xì)胞、IPLB-Sf21-AE細(xì)胞、HLEpiC細(xì)胞

LIXC-002細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B4G12細(xì)胞、MRC9細(xì)胞、M059J細(xì)胞

NCI-H2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K1細(xì)胞、NPC-TW 039細(xì)胞、Detroit 562細(xì)胞

REC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL21細(xì)胞、SUD6細(xì)胞、C4-2B細(xì)胞

SCL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC clone 1469細(xì)胞、HTR-8細(xì)胞、RWPE1細(xì)胞

VMM5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CX-1細(xì)胞、Fox/NY細(xì)胞、7860細(xì)胞

TGW細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone Y-1細(xì)胞、ARO細(xì)胞、RCC-JF細(xì)胞

Ly7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH-7919細(xì)胞、H-748細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞

NRK clone 52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBL細(xì)胞、ARO81細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞

SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞

NCIH522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa16C細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞、OVCAR433細(xì)胞

He-La細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1703細(xì)胞、J 82細(xì)胞、THP1細(xì)胞

Hepa-RG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 763細(xì)胞、DHL4細(xì)胞、NCIH1373細(xì)胞

SF-126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGSMC細(xì)胞、KP 4細(xì)胞、BIC細(xì)胞

Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26.WT細(xì)胞、CCD1095Sk細(xì)胞、NCI747細(xì)胞

HPAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM-3細(xì)胞、Psi-2-DAP細(xì)胞、EB-3細(xì)胞

Mono-Mac-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMCD3細(xì)胞、Ect1/E6E7細(xì)胞、TCC-SUP細(xì)胞

"