"RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞：人胰腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：４傳代，２-３天換液１次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液。【注意事項(xiàng)】１)掌握好細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)或過短：時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
我?？吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對(duì)付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細(xì)胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對(duì)你越來越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC366細(xì)胞、CG4細(xì)胞、COLO-680N細(xì)胞
NCI-H322T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rh30細(xì)胞、H-660細(xì)胞、BC-PAP細(xì)胞
GM2219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AK細(xì)胞、HEK 293-EBNA細(xì)胞、Loucy細(xì)胞
HO1N1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Case 3細(xì)胞、Clone M-3細(xì)胞、VMM5A細(xì)胞
EPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059J細(xì)胞、SPCA1細(xì)胞、HCC1419細(xì)胞
TOV112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKHEP-1細(xì)胞、DU145細(xì)胞、Hs683細(xì)胞
H-1975細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-28細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞、PT67細(xì)胞
BrCL18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ3細(xì)胞、SKMEL-2細(xì)胞、VK-2/E6E7細(xì)胞
H3255_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCS2/8細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞
WM451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMB 17細(xì)胞、EFM19細(xì)胞、OCI/AML3細(xì)胞
SK-N-MC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-02細(xì)胞、TE354T細(xì)胞、MDA-MB231細(xì)胞
MDCK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134細(xì)胞、Jurkat77細(xì)胞、SPC-A-1細(xì)胞
Hs-729-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8226細(xì)胞、OCILY-10細(xì)胞、MM96L細(xì)胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-1細(xì)胞、HIT.T15細(xì)胞、MB 157細(xì)胞
hADSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CLONE M3細(xì)胞、MESSA Dx5細(xì)胞、J82COT細(xì)胞
Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-10細(xì)胞、JEG3細(xì)胞、HBVP細(xì)胞
Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-10細(xì)胞、JEG3細(xì)胞、HBVP細(xì)胞
HL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EM-3細(xì)胞、KU-812F細(xì)胞、Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞
IB-RS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE細(xì)胞、RIMEC細(xì)胞、MDA-MB-435-S細(xì)胞
NCI-H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-5細(xì)胞、OVCAR.4細(xì)胞、NTera2/D1細(xì)胞
OCI/AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE-2c細(xì)胞、MPC11細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞
EJ1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL2細(xì)胞、OVCA 433細(xì)胞、SW-1463細(xì)胞
Melanoma 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T. T細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞、OVCAR5細(xì)胞
MC 116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM06141細(xì)胞、KFB細(xì)胞、MH-S細(xì)胞
LUDLU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY3細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞、K562細(xì)胞
CCD18Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE B-3細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞、HBL 100細(xì)胞
Tca-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞、NCI-H1648細(xì)胞、NCI-H1355細(xì)胞
CF-1 MEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞、RM1細(xì)胞、NCI-H-82細(xì)胞
H-1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A431/P細(xì)胞、SC1細(xì)胞、LTEP-sm細(xì)胞
RenCa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE 115細(xì)胞、SVOG細(xì)胞、MT-2細(xì)胞
HOS-TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkMel31細(xì)胞、MS1細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞
SKLMS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCLC-21H細(xì)胞、PLA 802細(xì)胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞
HIEC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JeKo-1細(xì)胞、Ramos-RA1細(xì)胞、LNCaP FGC細(xì)胞
NCI-H847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Namalwa細(xì)胞、NCI-H-128細(xì)胞、IPLB-SF 21AE細(xì)胞
Walker-256-TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22R細(xì)胞、EFM192細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞
HCT116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat podocyte細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞、SK-N-BE(2)C細(xì)胞
Mel-MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UK Pan-1細(xì)胞、K562細(xì)胞、P3HR1-BL細(xì)胞
CWR22R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EAhy926細(xì)胞、A72細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞
Ku812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK-2/E6E7細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞、EFM192細(xì)胞
OS-732細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：6T-CEM細(xì)胞、H-EMC-SS細(xì)胞、M-1細(xì)胞
RBL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS79細(xì)胞、NIH-OVCAR-3細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞
526mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1(C4)細(xì)胞、RPMI7951細(xì)胞、HD11細(xì)胞
Human Embryo Lung-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1437細(xì)胞、SKNBE(1)細(xì)胞、TKB-1細(xì)胞
GM637A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910 PM細(xì)胞、686LN-M4e細(xì)胞、Hs 746.T細(xì)胞
NFS-60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-600-T細(xì)胞、MeSoTheliOma-211H細(xì)胞、293 H細(xì)胞
NCIH211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-10細(xì)胞、MDA-361細(xì)胞、NCI-H740細(xì)胞
GM02132C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR-8348細(xì)胞、GLC82細(xì)胞、MC57G細(xì)胞
TE-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS-3細(xì)胞、Hs 675.T細(xì)胞、SNT-8細(xì)胞
MESSADX5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MALME 3M細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞
Hep3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J-HR-1細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞、IPI-2I細(xì)胞
KBM-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BPH-1細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞
P3/X63/Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1666細(xì)胞、HFSF細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞
AE 1201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly10細(xì)胞、L-5178-Y細(xì)胞、SNU-1040細(xì)胞
NOMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-O細(xì)胞、CII細(xì)胞、HEK293T/17細(xì)胞
KYSE 450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Med 283細(xì)胞、WM239細(xì)胞、SNU354細(xì)胞
OVCAR3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO-11細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞、NCI-H711細(xì)胞
C666-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AM細(xì)胞、WI-38細(xì)胞、AU-Mel細(xì)胞
SW 900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295R-S1細(xì)胞、H1563細(xì)胞、Tb1.Lu細(xì)胞
WM-266-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2066細(xì)胞、SK-RC-39細(xì)胞、SPC-A1細(xì)胞
HS-445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC.3細(xì)胞、HLE-SRA-01/04細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞
NCI-SNU-C2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63-Ag8細(xì)胞、SUM 52細(xì)胞、GL261細(xì)胞
N9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KB細(xì)胞、KU-812-F細(xì)胞、HT144mel細(xì)胞
Y1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaSki細(xì)胞、28SC細(xì)胞、LS-123細(xì)胞
SW403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V-79細(xì)胞、no-11細(xì)胞、6T-CEM細(xì)胞
HGMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE 296細(xì)胞、DSL-6A/C1細(xì)胞、OVCAR-8細(xì)胞
HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPB-ALL細(xì)胞、NOZ細(xì)胞、MOPC細(xì)胞
OCIAML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BetaTC6細(xì)胞、GM2132細(xì)胞、HS-5細(xì)胞
AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-T細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞、ID8/MOSEC細(xì)胞
LIM1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC44細(xì)胞、HL60細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞
NHRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-341 Med細(xì)胞、MB 157細(xì)胞、IOSE 29細(xì)胞
SNU886細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5細(xì)胞、RIN-m5F細(xì)胞、MH7A細(xì)胞
NTERA-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCMK1細(xì)胞、LOU-NH91細(xì)胞、IMCD-3細(xì)胞
GM-215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2286細(xì)胞、NeHepLxHT細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞
GP2d細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00097細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞、Duck embryo細(xì)胞
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