"MIA PaCa-2細(xì)胞：人胰腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代；
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會因生存空間不足或密度過大，營養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶內(nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴增(形成細(xì)胞株)，可以進行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些特殊的細(xì)胞和分化特征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的利處在于提供了大量持久的實驗材料，便于實驗。【操作步驟】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶內(nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶內(nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時動作要輕柔，以防用力過猛損傷細(xì)胞；６)用計數(shù)板計數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長的狀態(tài)和實驗要求來確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马棥浚?掌握好細(xì)胞消化的時間，消化時間過短時，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過長的消化會導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握好消化濃度，當(dāng)消化液濃度過高時，消化時間應(yīng)縮短，過低時細(xì)胞消化時間相對延長。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長角度來說，針對細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長緩慢；3)細(xì)胞傳代時間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長；4)胰酶消化時間過長或過短：時間過長，細(xì)胞死亡；時間過短，細(xì)胞未完全分離而成團，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進行驗證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個方面的可能原因，做出針對性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗證；4)注意實驗室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
常規(guī)的細(xì)胞實驗(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細(xì)胞例外)。但少數(shù)實驗，比如病毒包裝，對細(xì)胞代數(shù)，對細(xì)胞狀態(tài)要求極高。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細(xì)胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細(xì)胞包裝能力就會逐漸下降(當(dāng)然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來使得細(xì)胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細(xì)胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學(xué)問可以講，對于一些難消化細(xì)胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細(xì)胞，不需要配制如此溶液。
IPECJ2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EOC-20細(xì)胞、CAL-12T細(xì)胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞
Hs832.Tc細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero 76細(xì)胞、MDAMB231細(xì)胞、NCI-A549細(xì)胞
L5178Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞、J774.A1細(xì)胞、PL-5細(xì)胞
C42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU-1細(xì)胞、1E8-H細(xì)胞、PLA 802細(xì)胞
NIH:OVCAR-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca9-22細(xì)胞、HCT-GEO細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞
WM-266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-966SK細(xì)胞、T-HSC細(xì)胞、MCF-7/ADR-RES細(xì)胞
LS411細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2195細(xì)胞、NCI-H1668細(xì)胞、HCC1954細(xì)胞
WM-451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-1666細(xì)胞、LN-18細(xì)胞
C1498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB-3細(xì)胞、BJA-B1細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞
NCIH716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03573A細(xì)胞、3D4/21細(xì)胞、AMJ2C8細(xì)胞
Kit225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H358細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞、HeLa.S3細(xì)胞
HEK 293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH7919細(xì)胞、HBE細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞
University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2132細(xì)胞、SKBr3細(xì)胞、Sp2/O細(xì)胞
MPP-89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adeno-293細(xì)胞、COLO 738細(xì)胞、IBRS2細(xì)胞
PF382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、RWPE1細(xì)胞、PC 61 5.3細(xì)胞
SU86-86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-4細(xì)胞、S3 HeLa細(xì)胞、UPCI:SCC090細(xì)胞
SU86-86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-4細(xì)胞、S3 HeLa細(xì)胞、UPCI:SCC090細(xì)胞
TE-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE細(xì)胞、U2-OS細(xì)胞、SuDHL 1細(xì)胞
IFRS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-423細(xì)胞、GM06141細(xì)胞、TE13細(xì)胞
RC92A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1648細(xì)胞、CCC-HEH-2細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞
TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2106細(xì)胞、130 T細(xì)胞、PLC-8024細(xì)胞
Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA 205細(xì)胞、GM00346B細(xì)胞、Capan-1細(xì)胞
GC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞、Hs 695T細(xì)胞、GM05372E細(xì)胞
NCI-SNU-475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-02-03細(xì)胞、Madison細(xì)胞、BHP-10細(xì)胞
Kasumi 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb2-11細(xì)胞、PC.3細(xì)胞、SK_N_FI細(xì)胞
SU-DHL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCoEpiC細(xì)胞、Oka-C1細(xì)胞、TMD8細(xì)胞
H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIMEC細(xì)胞、SW 403細(xì)胞、RCC-10RGB細(xì)胞
Human Microvascular Endothelial細(xì)胞：-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、201T細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞
NTera2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK13細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞、HEK293A細(xì)胞
A 549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC-SRA 01/04細(xì)胞、MMAc-SF細(xì)胞、MSB1細(xì)胞
H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Col 1細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞、MCF-7/ADR細(xì)胞
H-508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLCPK1細(xì)胞、NCIH727細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞
Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO Lec1細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞
MO59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIG3細(xì)胞、LICR-LON-HN6細(xì)胞、TE7細(xì)胞
Lung cancer-1/squamous細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-3細(xì)胞、QBC-939細(xì)胞、H220細(xì)胞
HBZY-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-3細(xì)胞、HSC1細(xì)胞、P-388細(xì)胞
P-36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT_116細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、VM-CUB-1細(xì)胞
IOSE80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69C細(xì)胞、Jurkat E6-1細(xì)胞、MGECs細(xì)胞
NCI-H146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-F10細(xì)胞、HCC1143細(xì)胞、DLD-1細(xì)胞
Hs 695.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC6細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞、CHL-11細(xì)胞
H64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC109細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞、PLC PRF 5細(xì)胞
GM 2132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04154B細(xì)胞、GI-1細(xì)胞、EFM-192A細(xì)胞
WSU-DLCL(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞、HCV 29細(xì)胞
SJRH 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H498細(xì)胞、GA-10(Clone 4)細(xì)胞、HVSMC細(xì)胞
C57/B6-L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs611T細(xì)胞、CCD-112CoN細(xì)胞、P3 88 D1細(xì)胞
Hs600T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK1細(xì)胞、Hs832T細(xì)胞、U20-S細(xì)胞
Panc-08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-I細(xì)胞、Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞、MCF 7細(xì)胞
NCI-HUT-596細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：675T細(xì)胞、A 253細(xì)胞、CWR22Rv1細(xì)胞
R3/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JS1細(xì)胞、NK-10A細(xì)胞、HSC2細(xì)胞
UPCI-SCC-154細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-28/I2細(xì)胞、NCIH209細(xì)胞、WM-115細(xì)胞
AML-193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU878細(xì)胞、KYSE 30細(xì)胞、Kelly細(xì)胞
NCIH1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST 486細(xì)胞、CT26.WT細(xì)胞、H-1299細(xì)胞
BHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TEC細(xì)胞、I90細(xì)胞、H2085細(xì)胞
SC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1105細(xì)胞、3AO細(xì)胞、RH30SJ細(xì)胞
SUM-149細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAMOS2G64C10細(xì)胞、HMEC-1細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞
NRK clone 52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBL細(xì)胞、ARO81細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞
NRK clone 52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBL細(xì)胞、ARO81細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞
hEEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa017C細(xì)胞、A-2780細(xì)胞、MM.1S細(xì)胞
Hs729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIHOVCAR3細(xì)胞、EJ細(xì)胞、MDA361細(xì)胞
GM 2132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04154B細(xì)胞、GI-1細(xì)胞、EFM-192A細(xì)胞
SCL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-175-VII細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞、NCI-H1581細(xì)胞
Co 115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO829細(xì)胞、JHH7細(xì)胞、NCIH1688細(xì)胞
FHs74 Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRC-99細(xì)胞、Med 283細(xì)胞、LO2細(xì)胞
IMR32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu686細(xì)胞、TE8細(xì)胞、266 Bl細(xì)胞
CAMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 51細(xì)胞、TSU-Pr1細(xì)胞、H929細(xì)胞
MBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH810細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞
SNK6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B1細(xì)胞、H69C細(xì)胞、CCC-HPF-1細(xì)胞
FLC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346B細(xì)胞、OVCAR8細(xì)胞、Nb2細(xì)胞
ATDC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMST-6細(xì)胞、OVCAR-3細(xì)胞、MBMEC細(xì)胞
NS653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1869細(xì)胞、LAPC-4細(xì)胞、PLA-802細(xì)胞
Hep 3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、NT2D1細(xì)胞、HDLM2細(xì)胞
Lieming Xu-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞、MDA231-LM2細(xì)胞
L5178Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞、NCIH82細(xì)胞
F81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW.620細(xì)胞、NCI-H1781細(xì)胞、L540細(xì)胞
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