"COV504細胞：人卵巢癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
解凍細胞出現(xiàn)大量細胞碎片的可能原因及推薦解決方案如下：１)冷凍時細胞密度過低：推薦的解決方案：縮短解凍過程中的時間。將細胞取出后，立即將凍存管浸入在３７℃的水浴中，并震蕩至全部融化，然后迅速地轉(zhuǎn)移到預(yù)熱的培養(yǎng)基中；２)不適當(dāng)?shù)睦鋬鲞^程：推薦的解決方案：解凍不同冷凍室總的試管。確保在凍存過程中采用的適當(dāng)?shù)募夹g(shù)，并確保使用了適量和適合的冷凍液。出現(xiàn)生長緩慢的可能原因及推薦解決方案如下：１)培養(yǎng)瓶的大小：一般解決方案是一些細胞在培養(yǎng)基中傾向于維持一定的密度。將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移到較小的培養(yǎng)瓶中，使細胞密度上升；如，根據(jù)培養(yǎng)基的體積，從T７５培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到２或３個T２５培養(yǎng)瓶中；２)細胞密度過低：通常解決方案是提高未來冷凍物種細胞的凍存密度，或使用較小的培養(yǎng)容器，或解凍多個試管來進行培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗詳解：1)收到細胞，首先要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術(shù)人員。 由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。2)當(dāng)通過上一步的觀察，細胞初步?jīng)]有問題時，進行下一步操作。當(dāng)收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細胞在低于正常生長溫度情況下，會調(diào)整為靜止期，或者慢速生長期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調(diào)整到接近對數(shù)生長期的狀態(tài)，在對數(shù)生長期進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很好時，則復(fù)溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，次處理也可以依照第二種情況。
其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞(絕大部分１min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的(比如Calu-３細胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個細胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
MOLP8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341MD細胞、LX-2細胞、McCoy B細胞
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Y-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、Panc4.03細胞、HEC251細胞
KG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPC-A1細胞、Hs 895.T細胞、AMJ2-C8細胞
CMT167細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1/1-Ag4.1細胞、LIM-1215細胞、MC/CAR細胞
HCC1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL-100細胞、NGEC細胞、HUT-125細胞
CemT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1937細胞、X63-Ag8細胞、GM2219C細胞
HT 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM4細胞、G361-mel細胞、SRA01/04 (HLE)細胞
NG108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRAEC細胞、Centre Antoine Lacassagne-78細胞、AA-Mel細胞
MDA-MB-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H28細胞、3T3 L1細胞、HEK 293FT細胞
H341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MTEC1細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、MDAMB435細胞
H1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Col 1細胞、GA-10 clone 4細胞、MCF-7/ADR細胞
MASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-468-RED細胞、K562/ADR細胞、RPMI8226細胞
190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888.T細胞、OCM1A細胞、Calu 3細胞
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Kelly細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSC19細胞、CHL-IU細胞、CCD-1095Sk細胞
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CPA 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1954-BL細胞、CEM T4細胞、FHL-124細胞
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EU-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞
LIPF155C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS-114細胞、MonoMac6細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞
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COLO-394細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H810細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞、NBL-12細胞
A1847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H345細胞、NCI-H647細胞、P-2003細胞
MHCC97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、RIN m5F細胞、MC3T3-E1(C4)細胞
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MES 23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2A細胞、Mono Mac6細胞、P3/ag細胞
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Colo320細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF/5細胞、RBL-I細胞、TERT-RPE1細胞
Swiss 3T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02219D細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞、KM-12細胞
Panc02-H0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-08-13細胞、Y-1細胞、VA-ES-BJ細胞
HPMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hela-mock細胞、GEO細胞、FAK+/+細胞
MDA-MB-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H28細胞、3T3 L1細胞、HEK 293FT細胞
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SCC90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO.205細胞、U-373MG ATCC細胞、W256細胞
Ly1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Intestinal Porcine Epithelial細胞：-1細胞、Sp2/0細胞、NCIH847細胞
OCI-LY-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb1Lu細胞、OAW 42細胞、Tn-5細胞
PANC 327細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2/C3A細胞、PC-3M IE8細胞、2E8細胞
251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578T細胞、IMCD-3細胞、HN 4細胞
251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578T細胞、IMCD-3細胞、HN 4細胞
ECGI10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CG4細胞、BDCM細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞
RK13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCLP1細胞、AMJ2C8細胞、H-2444細胞
PLA801-95D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJSA細胞、Panc05.04細胞、MPC 11細胞
GM07404A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU407細胞、HTori-3細胞、CTLL(2)細胞
N-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK15細胞、MSF細胞、CG4細胞
PC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-13細胞、P3X63NS1細胞、KM933細胞
B16 F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-704細胞、253JBV細胞、LNCaP subline C4-2細胞
LOU-NH-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7/AdrR細胞、SUP-M2細胞、C-33-A細胞
A498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-196細胞、C2-C12細胞、OSC19細胞
C33A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1770細胞、HCC2157細胞、Chinese Hamster Ovary細胞
SW 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD18Co細胞、UMUC-14細胞、CAOV4細胞
H1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞
MC-116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC3細胞、NPA87-1細胞、H-510細胞
SU-DHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-522細胞、H2291細胞、MDA-MB-415細胞
TR146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞、H1623細胞、Kasumi-1細胞
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Mc Coy細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL/2細胞、EFO 27細胞、MC-4細胞
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