細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞接收操作說(shuō)明：請(qǐng)仔細(xì)閱讀本操作說(shuō)明及相應(yīng)的細(xì)胞說(shuō)明書(shū)。本公司細(xì)胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細(xì)胞使用，懸浮細(xì)胞也可以)、離心管(懸浮細(xì)胞使用多，當(dāng)然，有些公司也會(huì)用這種離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞，但是，長(zhǎng)期經(jīng)驗(yàn)來(lái)說(shuō)，貼壁細(xì)胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計(jì)是細(xì)胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導(dǎo)致(最主要是怕運(yùn)輸延誤導(dǎo)致這些情況發(fā)生)，個(gè)人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細(xì)胞)及干冰(凍存細(xì)胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細(xì)胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細(xì)胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后，拆開(kāi)包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細(xì)胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時(shí)細(xì)胞照片)。將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細(xì)胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細(xì)胞發(fā)貨。收到細(xì)胞后消毒處理及將細(xì)胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時(shí)以上，再處理細(xì)胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實(shí)驗(yàn)室沒(méi)有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時(shí)T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當(dāng)然如果剛接收到細(xì)胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來(lái)再換大的，不然會(huì)長(zhǎng)得很慢，嚴(yán)重的，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡等危險(xiǎn))，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細(xì)胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細(xì)胞后，直接用干冰將凍存的細(xì)胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細(xì)胞后按照細(xì)胞復(fù)蘇的步驟操作即可。

傳代的操作步驟注意事項(xiàng)：1)操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。2)點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng)，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過(guò)營(yíng)養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。3)操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。4)不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺(tái)面上用品要布局合理。5)瓶子開(kāi)口后要盡量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。貼壁細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸除培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。2)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許，以能覆滿瓶底為限。3)置溫箱中2-5分鐘，當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮，細(xì)胞間隙增大后，立即終止消化。4)吸除消化液，向瓶?jī)?nèi)注入Hanks液數(shù)毫升，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時(shí)，動(dòng)作要輕，以免把已松動(dòng)的細(xì)胞沖掉流失，如用胰蛋白酶液?jiǎn)为?dú)消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液沖洗，直接加入培養(yǎng)液。5)用吸管吸取營(yíng)養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。6)計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個(gè)培養(yǎng)瓶中，置溫箱中培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞傳代的操作步驟：1)吸出細(xì)胞培養(yǎng)液，放入離心管中，離心1000rpm5分鐘。2)吸掉上清液，加入適量之新鮮培養(yǎng)基，混和均勻后，依稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。

細(xì)胞凍存知識(shí)普及：細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-１９６℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來(lái)，這樣在需要的時(shí)候再?gòu)?fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外，還可以利用細(xì)胞凍存的形式來(lái)購(gòu)買、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。細(xì)胞凍存時(shí)向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度５%.１５%的甘油或二甲基亞砜(DMSO)，可使溶液冰點(diǎn)降低，加之在緩慢凍結(jié)條件下，細(xì)胞內(nèi)水分透出，減少了冰晶形成，從而避免細(xì)胞損傷。 采用""慢凍快融""的方法能較好地保證細(xì)胞存活。標(biāo)準(zhǔn)冷凍速度開(kāi)始為-１到-２℃/min，當(dāng)溫度低于-２５℃時(shí)可加速，到-８０℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-１９６℃)。

MUS-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-37細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞、BNCL2細(xì)胞

hSCC-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF 295細(xì)胞、K1735細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞

HT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FDC-P1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞、OK細(xì)胞

EJ 138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC18細(xì)胞、MV(4;11)細(xì)胞、MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞

Ishikawa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C166細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞

NCI-H1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGIIIA細(xì)胞、HuH28細(xì)胞、TK.10細(xì)胞

N-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK15細(xì)胞、MSF細(xì)胞、CG4細(xì)胞

SKHEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNT-8細(xì)胞、NCI-H1436細(xì)胞、Human Microvascular Endothelial細(xì)胞：-1細(xì)胞

KASUMI6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1435細(xì)胞、OCI/AML-3細(xì)胞、RMG1細(xì)胞

NCI-SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAMA1細(xì)胞、UC-3細(xì)胞、H-2009細(xì)胞

Duke University 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M619細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞

CHP-100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC9細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞

MB468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt-K2細(xì)胞、BT325細(xì)胞、HEK-293A細(xì)胞

GM2132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 841 CoTr細(xì)胞、H2347細(xì)胞、WEHI-3細(xì)胞

RC13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JF305細(xì)胞、BE2-C細(xì)胞、HSC5細(xì)胞

AG06814-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774 A.1細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞

AG06814-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774 A.1細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞

HcerEpic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-596細(xì)胞、Hepa1-6細(xì)胞、hUC-MSC細(xì)胞

COR L279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-1細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞

LN-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLK細(xì)胞、RH30SJ細(xì)胞、WM 266-4細(xì)胞

CG-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 4.03細(xì)胞、K562/ADP細(xì)胞、H647ell細(xì)胞

EFO-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-802細(xì)胞、NCIH1092細(xì)胞、PNT1A細(xì)胞

JROECL21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OsA-CL細(xì)胞、HCMEC(BL12-H)細(xì)胞、EBC-1/original細(xì)胞

KM933細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi-2 DAP細(xì)胞、SK-Mel1細(xì)胞、BT549細(xì)胞

SK-ChA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL細(xì)胞、PC-3細(xì)胞、TOV-112D細(xì)胞

Jurkat細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt-K1細(xì)胞、ACC2細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞

SUDHL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-Swiss albino細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞、GM0637細(xì)胞

MOLT 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R.K.13細(xì)胞、HANK1細(xì)胞、NS20-Y細(xì)胞

COLO-394細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H810細(xì)胞、T2 (174 x CEM.T2)細(xì)胞、NBL-12細(xì)胞

INS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-8細(xì)胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、MRCV細(xì)胞

CWR-22rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-929細(xì)胞、Hs 606細(xì)胞、DF-1細(xì)胞

RPMI-7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDQP1細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞

MRC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1155細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞、SNU-C2A細(xì)胞

MV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1672細(xì)胞、Caco-2/BBe細(xì)胞、TGBC-11-TKB細(xì)胞

PG-LH7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSMC細(xì)胞、T/GHA-VSMC細(xì)胞、CAL 78細(xì)胞

NCI-H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs888T細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞、HIEC-6細(xì)胞

BaF3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV304細(xì)胞、NCIH526細(xì)胞、H-1437細(xì)胞

PC-3M 2B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE510細(xì)胞、Reuber-H-35 hepatoma細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞

G361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBNA-293細(xì)胞、H-1755細(xì)胞、Ly10細(xì)胞

YD-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H64細(xì)胞、293-FT細(xì)胞、MS 751細(xì)胞

LY-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EJ1細(xì)胞、A498細(xì)胞、Colon-26細(xì)胞

AMC-HN-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7405細(xì)胞、HMSC細(xì)胞、SKMES-1細(xì)胞

IMR 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RenCa細(xì)胞、MDA-MB-134 VI細(xì)胞、H1048細(xì)胞

AD-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C4-2 Bone metastatic細(xì)胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150

細(xì)胞、Hs 888Lu細(xì)胞

Hs-578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV411細(xì)胞、SGC-996細(xì)胞、H-2126細(xì)胞

HMrSV5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL11細(xì)胞、NCIH1437細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細(xì)胞

MFHL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal fibroblast-10細(xì)胞、KLN205細(xì)胞、H-2198細(xì)胞

CNE1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE3A細(xì)胞、C643細(xì)胞、H-889細(xì)胞

SU86_86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFL-I細(xì)胞、Melan-a細(xì)胞、L-Wnt3A細(xì)胞

SNB.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-MK2細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞、KYSE-180細(xì)胞

251 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2BS細(xì)胞、NCIH1618細(xì)胞、Hep G2/C3A細(xì)胞

LMTK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV細(xì)胞、MUM2B細(xì)胞、MOLM-13細(xì)胞

H-719細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki2細(xì)胞、H1155細(xì)胞、HuT 102細(xì)胞

CHP 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC3.27細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞

NPA 87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6TG細(xì)胞、32Dcl3細(xì)胞、Swiss 3T3細(xì)胞

SW 1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera2/D1細(xì)胞、Hs888T細(xì)胞、ECV 304細(xì)胞

Panc 10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373-MG細(xì)胞、CMT-93細(xì)胞、SNUC2A細(xì)胞

SuperTube細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1930細(xì)胞、TGW-I-nu細(xì)胞、LM6細(xì)胞

MDA415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2135細(xì)胞、A 375細(xì)胞、HPDLF細(xì)胞

OCI-AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-94細(xì)胞、F36P細(xì)胞、Colo320細(xì)胞

BeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-5細(xì)胞、TE-3A細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞

OVCAR 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM/S細(xì)胞、Ball 1細(xì)胞、JIMT細(xì)胞

DrG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1373細(xì)胞、OAW42細(xì)胞、JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞

WSU-DLCL(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞、HCV 29細(xì)胞

PE CA PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-716細(xì)胞、H-2286細(xì)胞、U-hth74細(xì)胞

GLRK 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IB-RS-2細(xì)胞、RCC_7860細(xì)胞、67NR細(xì)胞

H526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLCPRF5細(xì)胞、HMy2.CIR細(xì)胞、GTL-16細(xì)胞

639-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-TU-8988S細(xì)胞、CAL27細(xì)胞、NCI-H1435細(xì)胞

GBCSD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vx2細(xì)胞、IGROV細(xì)胞、Hs 274.T細(xì)胞

NCI-H1048細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 85.T細(xì)胞、CMT 167細(xì)胞、RAG細(xì)胞

BaF3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV304細(xì)胞、OE33細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞

SPCA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-688A-T細(xì)胞、HCFB（HCF）細(xì)胞、786-0細(xì)胞

HT29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 962細(xì)胞、SW962細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞

NUGC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCL-H548細(xì)胞、RPMI-8226細(xì)胞、QSG-7701細(xì)胞

"