"KNS-62細胞：人肺支氣管鱗狀細胞癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：每周換液２次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞接收操作說明：請仔細閱讀本操作說明及相應的細胞說明書。本公司細胞發(fā)貨有四種形式：T２５培養(yǎng)瓶(一般是貼壁細胞使用，懸浮細胞也可以)、離心管(懸浮細胞使用多，當然，有些公司也會用這種離心管形式發(fā)貼壁細胞，但是，長期經(jīng)驗來說，貼壁細胞容易發(fā)生形態(tài)變化，估計是細胞培養(yǎng)空間狹小，血清不足導致(最主要是怕運輸延誤導致這些情況發(fā)生)，個人不建議用離心管形式發(fā)貼壁細胞)及干冰(凍存細胞用，主要是冬天天氣冷，溫度低于４℃的地方，都要考慮凍存細胞)。T２５培養(yǎng)瓶：是用T２５細胞培養(yǎng)瓶直接發(fā)貨的形式。收到細胞后，拆開包裝T２５培養(yǎng)瓶的自封袋，不拆封口膜，表面噴７５%酒精消毒后顯微鏡觀察細胞狀態(tài)(有條件可以拍下此時細胞照片)。將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用，如細胞密度高于８０%，可以直接消化傳代，相反則加入５-６ml培養(yǎng)基放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)即可。離心管：是用１５ml離心管發(fā)貨的形式，只用于懸浮細胞發(fā)貨。收到細胞后消毒處理及將細胞放入３７度培養(yǎng)箱平衡兩小時以上，再處理細胞。首先將T２５中培養(yǎng)基取出裝好備用(如果實驗室沒有T２５培養(yǎng)瓶，可以暫時T７５培養(yǎng)瓶，加入１０-１５ml培養(yǎng)基，建議１０ml培養(yǎng)基，也可以使用T１７５培養(yǎng)瓶，加入５０-６０ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶越大，需要的培養(yǎng)基越多。當然如果剛接收到細胞密度不夠的話，不用大瓶子，先用小瓶子養(yǎng)起來再換大的，不然會長得很慢，嚴重的，會導致細胞死亡等危險)，平衡完成后，離心(１０００rpm，３min)收集細胞，棄上清，用新的培養(yǎng)基重懸細胞并接種至培養(yǎng)瓶或皿中，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。干冰：是用本公司凍存液凍存細胞后，直接用干冰將凍存的細胞冷凍發(fā)貨的形式。收到細胞后按照細胞復蘇的步驟操作即可。
懸浮細胞不容易轉染：懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面，在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長，如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉染，其和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質體類的轉染試劑，脂質體轉染是基于電荷吸引原理，先形成脂質體-DNA復合物，散布在細胞周圍，然后通過細胞的內吞作用，將目的基因導入細胞內，而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍，所以，脂質體轉染時懸浮細胞的轉染效率要明顯低于貼壁細胞。其次，脂質體試劑的毒性較大，這就使得懸浮細胞的轉染更為困難了。另外，懸浮細胞不易培養(yǎng)，易死亡，也給細胞轉染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉染效率，可以使用非脂質體的轉染試劑，如納米材料的。也可以使用電轉染方法，針對懸浮細胞等難轉染細胞還是挺不錯的，電擊對細胞有一定的損傷，選用具有細胞膜修復功能的電轉染試劑，可以將電擊對細胞的傷害降到最低，懸浮細胞不易轉染，選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。
我?？吹揭粋€比較復雜的四步消化法，這個挺有意思，我也是次聽說，應該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價值。但我估計這個方法可能對付少數(shù)非常怪異的細胞才需要這么復雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實是很好消化的細胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個視細胞而定。如果和標準形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細胞的特性，是因為貼壁過程中重新聚集了。這個時候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細胞之后會對你越來越不好；比較難消化的細胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
Cloudman M3細胞系相關產(chǎn)品：Dami細胞、Hs600T細胞、H1650細胞
NCIH82細胞系相關產(chǎn)品：HT55細胞、NTera 2細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞
TE-13細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat clone A3細胞、HOS (TE85)細胞、NRK細胞
VK2/E6E7細胞系相關產(chǎn)品：ESC細胞、H660細胞、C17細胞
MARC 145細胞系相關產(chǎn)品：CoCL2細胞、CP70細胞、T-T細胞
WiDr細胞系相關產(chǎn)品：HPAF細胞、TOV-112細胞、L cell細胞
H1105細胞系相關產(chǎn)品：CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞
SHZ-88細胞系相關產(chǎn)品：PF382細胞、NCIH1648細胞、Metastatic Variant 522細胞
A2008細胞系相關產(chǎn)品：OsACL細胞、AU-Mel細胞、H-35 Reuber細胞
253J細胞系相關產(chǎn)品：GM3569細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞、RT4P細胞
FDCP1細胞系相關產(chǎn)品：RT4P細胞、CCRF/CEM細胞、COR-L23細胞
CNE1細胞系相關產(chǎn)品：OE33細胞、KMS-11細胞、HEK-293細胞
SUDHL-5細胞系相關產(chǎn)品：MX-1細胞、NCI-H929細胞、SKml2細胞
H-2122細胞系相關產(chǎn)品：SF126細胞、MDA231-LM2-4175細胞、TF1細胞
SNU398細胞系相關產(chǎn)品：G 401細胞、SKUT-1細胞、SK-N-BE(2)-C細胞
C3A細胞系相關產(chǎn)品：TCC-SUP細胞、GAK細胞、CII細胞
C3A細胞系相關產(chǎn)品：TCC-SUP細胞、GAK細胞、CII細胞
KYSE510細胞系相關產(chǎn)品：Eph4 1424細胞、AE1201細胞、Ramos 2G6.4C10細胞
KHYG1細胞系相關產(chǎn)品：no-11細胞、Michigan Cancer Foundation-12A細胞、P30OHK細胞
Tb 1 Lu細胞系相關產(chǎn)品：MCF.10A細胞、BEL 7402細胞、NHRF細胞
RPMI no. 8226細胞系相關產(chǎn)品：BHT-101細胞、G292細胞、Rat Basophilic Leukemia-1細胞
LSC-1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1703細胞、NIH 3T3細胞、CF-1 MEF細胞
CCD-33Co細胞系相關產(chǎn)品：HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞
190PT細胞系相關產(chǎn)品：Hs 888.T細胞、OCM1A細胞、Calu 3細胞
IPLB-SF 21細胞系相關產(chǎn)品：HITT15細胞、RIN Cl-5F細胞、CLL-CII細胞
RCC10 RGB細胞系相關產(chǎn)品：HCC1187細胞、HEC-1B細胞、Rat Skin 1細胞
TC-1 [Mouse lung]細胞系相關產(chǎn)品：Hs 274細胞、HuH-28細胞、NCIH2023細胞
J45.01細胞系相關產(chǎn)品：H-87細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、KYSE0030細胞
HSC2細胞系相關產(chǎn)品：HUT125細胞、HEC251細胞、NKM-1細胞
HuTu-80細胞系相關產(chǎn)品：Alpha Mouse Liver 12細胞、3T3-L1 ad細胞、Vero from pool #76細胞
U-CH1細胞系相關產(chǎn)品：CAL33細胞、Rin-M-5F細胞、CT26WT細胞
B16-F1細胞系相關產(chǎn)品：Huh7.5.1細胞、PAN 02細胞、143B TK-細胞
LU451細胞系相關產(chǎn)品：J82 COT細胞、NCI-H1238細胞、MRC 5細胞
Murine Leydig Tumor細胞：-1細胞系相關產(chǎn)品：GH3細胞、DrG細胞、Hs 819.T細胞
Caco-2細胞系相關產(chǎn)品：M-1 myeloid leukemia細胞、HLF細胞、J774細胞
NW-MEL-38細胞系相關產(chǎn)品：LL/2(LLc1)細胞、D324 Med細胞、NCIH1944細胞
L-02細胞系相關產(chǎn)品：H4IIE細胞、H-2330細胞、ECC 12細胞
OSKM-1細胞系相關產(chǎn)品：CMEC/D3細胞、Hs 839.T細胞、CCD-841-CoTr細胞
OCI-AML5細胞系相關產(chǎn)品：JURKAT E-6.1細胞、HCe-8693細胞、GM07404A細胞
OVCA8細胞系相關產(chǎn)品：GM03320細胞、RCC-10細胞、hA549細胞
OCI-Ly01細胞系相關產(chǎn)品：Hs 578Bst細胞、COLO 699細胞、E6-1細胞
OCI-Ly03細胞系相關產(chǎn)品：L929細胞、A-253細胞、MC/9細胞
HSC6細胞系相關產(chǎn)品：HOP 92細胞、Dami細胞、SNU620細胞
RPMI7951細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-C細胞、HT144細胞、TGW-nu細胞
H-322細胞系相關產(chǎn)品：LOU-NH91細胞、NCI-H125細胞、KLM1細胞
CEK細胞系相關產(chǎn)品：BEAS 2B細胞、HS 445T細胞、Calu-1細胞
NU-GC-3細胞系相關產(chǎn)品：MGC803細胞、ACCM細胞、MC 116細胞
NCI-H157細胞系相關產(chǎn)品：Tu 212細胞、SUD4細胞、CAL 12T細胞
Intestinal Porcine Epithelial細胞：-1細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR-5細胞、A-101D細胞、FCCH1018細胞
2780CP細胞系相關產(chǎn)品：KOPN8細胞、TFH細胞、CHP-100細胞
HPAC細胞系相關產(chǎn)品：JVM-3細胞、H2198細胞、YES2細胞
CHL1細胞系相關產(chǎn)品：MBMEC細胞、NCI-H220細胞、MDA157細胞
COLO 320細胞系相關產(chǎn)品：THLE-2細胞、UM-UC-3細胞、NCI-H1876細胞
Roswell Park Memorial Institute 8226細胞系相關產(chǎn)品：Clone Y1細胞、H-2087細胞、SRA 01/04細胞
SUDHL16細胞系相關產(chǎn)品：NK92-MI細胞、ARO81-1細胞、NCIH146細胞
D324細胞系相關產(chǎn)品：IMR32細胞、NCI-H211細胞、RMC-1細胞
SW 954細胞系相關產(chǎn)品：A375-S2細胞、Mel526細胞、SUIT 2細胞
Jeko1細胞系相關產(chǎn)品：Mel-RM細胞、MMVECs細胞、ChaGo-K1細胞
MIA PaCa-2細胞系相關產(chǎn)品：NCI H82細胞、SP2細胞、DoTc2-4510細胞
H446細胞系相關產(chǎn)品：SUIT 2細胞、OV-CA 432細胞、SF 767細胞
LS123細胞系相關產(chǎn)品：HS-68細胞、A-172 MG細胞、HSMC細胞
TE 85.T細胞系相關產(chǎn)品：BE(2)M17細胞、RPTEC/TERT1細胞、GA-10 (Clone 4)細胞
U138細胞系相關產(chǎn)品：EJ-1細胞、SW-1353細胞、EC-9706細胞
MFE296細胞系相關產(chǎn)品：SU-DHL1細胞、CCD-841CoTr細胞、HBL1細胞
Colo320細胞系相關產(chǎn)品：PLC/PRF/5細胞、RBL-I細胞、TERT-RPE1細胞
Tb 1 Lu細胞系相關產(chǎn)品：MCF.10A細胞、BEL 7402細胞、NHRF細胞
Swiss-3T3細胞系相關產(chǎn)品：H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關產(chǎn)品：GM17219細胞、UACC-812細胞、D-324 Med細胞
H-295細胞系相關產(chǎn)品：RDES-1細胞、LOU-NH91細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞
HS-766T細胞系相關產(chǎn)品：SW-1353細胞、NCI-H2085細胞、C32r細胞
Vero 76細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-BE(1)細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞、WEHI 3B細胞
NCIH820細胞系相關產(chǎn)品：HBE細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、GTL 16細胞
TE-13細胞系相關產(chǎn)品：Jurkat clone A3細胞、MT4細胞、SuDHL 1細胞
LC1sq細胞系相關產(chǎn)品：T-24細胞、HUTU80細胞、SHG-44細胞
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