"GAK細(xì)胞：人類惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：８.４ x １０^４ cells / sq.cm.
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
解凍細(xì)胞常見實(shí)驗(yàn)問題分析及推薦解決方法：在解凍凍存細(xì)胞時(shí)，發(fā)現(xiàn)會(huì)出現(xiàn)存活率低、大量細(xì)胞碎片及生長(zhǎng)緩慢等問題，究竟是什么原因?qū)е?，我們?cè)撛趺催M(jìn)行解決？以下是國(guó)內(nèi)外細(xì)胞培養(yǎng)專家針對(duì)解凍細(xì)胞實(shí)驗(yàn)問題，總結(jié)的一些解決方案！出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下：１)解凍過程中細(xì)胞裂解，推薦的解決方案：可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡，因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高，考慮到這一損失。起始濃度為１*１０(６)至１*１０(７)細(xì)胞/毫升；２)解凍過程中的問題，推薦的解決方案：在-７０℃至-８０℃下保存冷凍的培養(yǎng)物，保存時(shí)間為１-５天，但這不是保存的方法。在３７℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)；３)對(duì)冷凍液過敏，推薦的解決方案：A.完全或部分更換培養(yǎng)基，減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在２４小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物，取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的條件在對(duì)數(shù)期；４)被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡，推薦的解決方案：解凍最近冷凍的細(xì)胞。細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng)，存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問題，客戶遇到的問題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來說，針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)過程中生長(zhǎng)不好、甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)不好》可能原因：細(xì)胞本身的狀態(tài)》1)細(xì)胞傳代次數(shù)多，細(xì)胞老化；2)細(xì)胞的接種量：接種量過低，細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢；3)細(xì)胞傳代時(shí)間過晚：細(xì)胞中毒，影響傳代后的細(xì)胞生長(zhǎng)；4)胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng)或過短：時(shí)間過長(zhǎng)，細(xì)胞死亡；時(shí)間過短，細(xì)胞未完全分離而成團(tuán)，細(xì)胞死亡；5)細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇：慢凍速融。污染：1)支原體污染；2)霉菌污染；培養(yǎng)基或血清：1)更換血清或培養(yǎng)基之前未進(jìn)行驗(yàn)證；2)選擇的培養(yǎng)基是否合適；3)培養(yǎng)基配制是否準(zhǔn)確無誤；培養(yǎng)環(huán)境：1)CO2供應(yīng)是否正常；2)培養(yǎng)箱或搖床溫度控制是否正確；解決方法：根據(jù)以上四個(gè)方面的可能原因，做出針對(duì)性的解決方案》1)注意細(xì)胞的本身狀態(tài)：如傳代次數(shù)、接種量等；2)避免產(chǎn)生污染（用正規(guī)、合法、可溯源的血清）；3)要用合適的血清或培養(yǎng)基，經(jīng)過驗(yàn)證；4)注意實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境；二、培養(yǎng)細(xì)胞死亡》可能原因：1)培養(yǎng)箱內(nèi)無CO2；2)培養(yǎng)箱內(nèi)溫度波動(dòng)太大；3)細(xì)胞凍存或復(fù)蘇過程中損傷；4)培養(yǎng)液滲透壓不正確；5)培養(yǎng)液中有毒代謝產(chǎn)物堆積；解決方法：1)檢測(cè)培養(yǎng)箱內(nèi)CO2；2)檢查培養(yǎng)箱內(nèi)溫度；3)取新的保存細(xì)胞種；4)檢測(cè)培養(yǎng)液滲透壓；5)換入新鮮培養(yǎng)液。
其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞(絕大部分１min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去，胰酶潤(rùn)洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動(dòng)了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個(gè)細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑，這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-３細(xì)胞)，吹打不超過２０次后(一般１０次即可)，成小規(guī)模聚集(１０個(gè)細(xì)胞左右)，是正常的，不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。
SHG-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4細(xì)胞、A253細(xì)胞、SF295細(xì)胞
HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JurkatE6-1細(xì)胞、HGE細(xì)胞、OCI-Ly03細(xì)胞
TH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9(Hamprecht)細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞、SC1細(xì)胞
SW-839細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY19細(xì)胞、H-87細(xì)胞、Hi5細(xì)胞
H-441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：769-P細(xì)胞、OVCAR 5細(xì)胞、SUM-190PT細(xì)胞
NCIH2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03190細(xì)胞、RCF細(xì)胞、MN 60細(xì)胞
3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 361細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞、PC-3M-2B4細(xì)胞
B-cell with DC Morphology細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL2細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞、CA46細(xì)胞
NFS60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-125細(xì)胞、PLC PRF 5細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞
OVCA-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS細(xì)胞、NCC-IT細(xì)胞、Bowes melanoma cells細(xì)胞
SIRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-15細(xì)胞、RPE-hTERT細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞
HLMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN 7細(xì)胞、ML-2細(xì)胞、HPaSteC(HPSC)細(xì)胞
CAMA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-7702細(xì)胞、MX-1細(xì)胞、2V6.11細(xì)胞
GM00637F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMD-8細(xì)胞、H766T細(xì)胞、X63-Ag8細(xì)胞
CAKI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip 973細(xì)胞、159 PT細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞
L-6TG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-2003細(xì)胞、A875細(xì)胞、GS-9L細(xì)胞
L-6TG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-2003細(xì)胞、A875細(xì)胞、GS-9L細(xì)胞
Hepa 1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2122細(xì)胞、UCH-1細(xì)胞、OCM1細(xì)胞
TE-85 clone 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE6細(xì)胞、MRC-5細(xì)胞、FT-293細(xì)胞
CL1-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-1細(xì)胞、HEp-2細(xì)胞、SW 626細(xì)胞
Fao細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI #8226細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞、BEL 7402細(xì)胞
EC-9706細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-s細(xì)胞、BaF3細(xì)胞、G292細(xì)胞
MV4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBTr (NBL-4)細(xì)胞、AC16 [Human hybrid]細(xì)胞、SKLU01細(xì)胞
MHH-CALL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283MED細(xì)胞、W133細(xì)胞、BE(2)-C細(xì)胞
RSC96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞、H-322細(xì)胞、Y 1細(xì)胞
TM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRCEC細(xì)胞、NS653細(xì)胞、HSC-1細(xì)胞
HSC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc3_27細(xì)胞、NCI-H498細(xì)胞、HuTu-80細(xì)胞
H-526細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC-1細(xì)胞、GM05384細(xì)胞、Mono-Mac-1細(xì)胞
OVCAR.4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM細(xì)胞、BeWo細(xì)胞、MDCC MSB1細(xì)胞
HeLa S-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa 229細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞
KTA-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞、Colon-38細(xì)胞、HOS細(xì)胞
CA 46細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283 Med細(xì)胞、WERI-Rb 1細(xì)胞、Colo741細(xì)胞
HRA-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H441細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞、HL 60細(xì)胞
Y3-Ag1,2,3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO-8910細(xì)胞、CD18/HPAF細(xì)胞、LLC-MK2細(xì)胞
K7M2 wt細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caov-4細(xì)胞、J-774A.1細(xì)胞、Jeko1細(xì)胞
GM-215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2286細(xì)胞、KP-N-YN細(xì)胞、MonoMac 6細(xì)胞
Malme-3 M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-62細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞
Hs934T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit-225-K6細(xì)胞、hRPTC細(xì)胞、HEK293F細(xì)胞
BPH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118MG細(xì)胞、MDA-MB-435-S細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞
H2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC clone 6細(xì)胞、Med 341細(xì)胞、MKN74細(xì)胞
SNU449細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞、NCI-H1975細(xì)胞、HUC-1細(xì)胞
KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-ALL1細(xì)胞、H-2171細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞
Neukoplast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HKF細(xì)胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞
RPE D407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115F細(xì)胞、MGHU3細(xì)胞、SW-480細(xì)胞
TEV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4175細(xì)胞、Pan02細(xì)胞、Normal fibroblast-10細(xì)胞
H4IIEC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞、MM1-S細(xì)胞、HCC2108細(xì)胞
KOSC-2 cl3-43細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu6細(xì)胞、MDCC-MSB1細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞
SNU520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2170細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞、MPASMC細(xì)胞
NCIH1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-ES細(xì)胞、NR8383細(xì)胞、HLEC細(xì)胞
TM-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAC-P4C細(xì)胞、HEC-1-B細(xì)胞、CCD966SK細(xì)胞
3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 361細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞、PC-3M-2B4細(xì)胞
NCI-H1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L23細(xì)胞、Madison 109細(xì)胞、C643細(xì)胞
CA922細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT4細(xì)胞、Mv.1.Lu細(xì)胞、SK-N-SH細(xì)胞
CMT167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、LIM-1215細(xì)胞、MC/CAR細(xì)胞
ECC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-LON-HN6-R細(xì)胞、Z138細(xì)胞、MDA-MB436細(xì)胞
PC 61 5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE1-E6E7細(xì)胞、ST2細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞
PC 61 5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE1-E6E7細(xì)胞、ST2細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞
A-498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Raji細(xì)胞、HBSMC細(xì)胞、A2780/CP細(xì)胞
210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C32 [Human melanoma]細(xì)胞、QSG-7701細(xì)胞、NCIH650細(xì)胞
4T1-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-812細(xì)胞、IMR 90細(xì)胞、OVCA5細(xì)胞
SKN-SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs606細(xì)胞、GOS-3細(xì)胞、B16-F0細(xì)胞
University of Michigan-Renal Carcinoma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1376.T細(xì)胞、OVCAR 433細(xì)胞、PANC 1005細(xì)胞
MDA MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-G63細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞
GDM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7-GFP細(xì)胞、B16 melanoma F10細(xì)胞、UWB1289細(xì)胞
Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-8細(xì)胞、Human Embryo Lung-1細(xì)胞、LLC-PK(1)細(xì)胞
CAMA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 51細(xì)胞、TSU-Pr1細(xì)胞、H929細(xì)胞
Caco-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-1 myeloid leukemia細(xì)胞、HLF細(xì)胞、J774細(xì)胞
Malme-3 M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-62細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞
GM04154B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CG-4細(xì)胞、HCV-29細(xì)胞、SNU-354細(xì)胞
CCRF/CEM/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2(2-1)細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞、H661細(xì)胞
EMT-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLL2細(xì)胞、NS-20Y細(xì)胞、KYSE-50細(xì)胞
QGP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H220細(xì)胞、HT 1376細(xì)胞、SKMel-5細(xì)胞
THC-8307細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 123細(xì)胞、GM03573細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞
Caco-2/BBe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCMK-1細(xì)胞、OVCAR420細(xì)胞、IGROV細(xì)胞
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