"LS513細胞：人盲腸癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３—１：４傳代，每周換液２次
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
細胞生長特性：貼壁生長
【細胞培養(yǎng)中原蟲的污染情況總結(jié)】原蟲：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞站優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，最終形成惡性循環(huán)。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況，取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細胞)，３７度試培養(yǎng)一段時間后觀察。如果沒有細菌生長就是操作的問題。也可以在培養(yǎng)基中事先加入雙抗(酸鏈霉素和芐青霉素)。但雙抗有時會影響細胞的狀態(tài)，所以在做轉(zhuǎn)染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結(jié)果。１)孵箱應(yīng)定期用三氧機消毒或者紫外光照射，并用酒精和新潔爾滅試擦孵箱同時孵箱內(nèi)的水應(yīng)是三蒸水；２)超凈臺\取材\器材\培養(yǎng)液\培養(yǎng)瓶\操作等因素；３)超凈臺的風機不能過大，風機到６-８格。否則也可能能致霉菌污染；４)無菌室經(jīng)甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的噴灑中和，約幾小時即可進入操作。
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
常規(guī)的細胞實驗(增殖，凋亡，遷移，分化之類的)，受消化影響不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用潤洗的方法消化的話(難消化細胞例外)。但少數(shù)實驗，比如病毒包裝，對細胞代數(shù)，對細胞狀態(tài)要求極高。這個時候，胰酶消化，就是潤洗，都會對細胞包裝病毒的能力有影響，傳代次數(shù)一多，細胞包裝能力就會逐漸下降(當然也有其它因素影響包裝效率)。這個時候都不用胰酶消化，用一些鹽溶液(不是EDTA液)即可。這些鹽溶液通過影響ECM相關(guān)酶的活性，來使得細胞脫離基質(zhì)附著表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA聯(lián)合作用。這里要明白，trypsin切割ECM的一些負責粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca離子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加溫和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者對付特別難消化的細胞，添加多一些EDTA，就是這個道理。一般不要試圖延長消化時間(如果１０min還消化不徹底的話)，而應(yīng)該想其它辦法；PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌，是常見的操作，因為Serum含有抑制trypsin的蛋白。但這里面也有學問可以講，對于一些難消化細胞，那么可以配制不含Ca，Mg離子的PBS，因為這些離子也會抑制trypsin的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細胞，不需要配制如此溶液。
HEK-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTPA細胞、VAESBJ細胞、NCIH747細胞
alphaTC clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L細胞、PK(15)細胞、Hs 683.T細胞
UCD-MLA-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-900細胞、L132細胞、SK MEL 5細胞
GM17346細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-375.S2細胞、Line 697細胞、NCIH2342細胞
LC-MS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1963細胞、SNU601細胞、NCI-H2170細胞
A-172 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-827細胞、COLO-824細胞、MEC1細胞
SUNE 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Buffalo Rat Liver-3A細胞、SUDHL6細胞、GLAG-66細胞
NHDF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 33細胞、UCLA-SO-M21細胞、D341 Med細胞
IPI-2I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KP-N-RT-BM-1細胞、Hs870T細胞、TE-14細胞
MDA-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS(TE85)細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞、OC 316細胞
THP-1(ATCC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J.E6-1細胞、BLO-11細胞、Vero 76細胞
Panc 2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-1細胞、SNU-368細胞、SKML-28細胞
3T3-F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRTEC細胞、SK-LU-1細胞、Panc 05.04細胞
CX-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA-Pa-Ca-2細胞、BV-2細胞、GM03320細胞
LIXC-002細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B4G12細胞、MRC9細胞、M059J細胞
SKBR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1846細胞、NCIH2085細胞、RT-BM-1細胞
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P30OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat-2細胞、H-4-II-E細胞、SK-MEL-5細胞
Jurkat E6.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1869細胞、H2291細胞、NCI522細胞
2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293A細胞、rUCMSCs細胞、NCM460細胞
CHP126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HC-11細胞、HCC2935細胞、LS174細胞
SUM 102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H660細胞、BC-009細胞、SK-LU-1細胞
H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HG2855細胞、SPCA-1細胞、MA-c細胞
DLD 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3細胞、MCF-12A細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞
EBC-1/original細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caki-2細胞、ACC-3細胞、AN-3細胞
OKT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TNC-1B12B4細胞、Experimental Mammary Tumour-6細胞、343 MG細胞
ST-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 756細胞、HEK-293-H細胞、JOSK-M細胞
RIN14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞
C4-2 Bone metastatic細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-82細胞、SW-527細胞、NBL-7細胞
COV-434細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1376細胞、PNT-1A細胞、B16BL6細胞
NCI-441細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-996細胞、HCC-1569細胞、A 253細胞
Hs.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-526細胞、Hs 578Bst細胞、Nb 2細胞
HCC2157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR-32細胞、Panc10.05細胞、OV433細胞
SKRC 39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM1細胞、HOCF細胞、NCI H69細胞
PANC0504細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATN1細胞、HIT細胞、SK-MEL-24細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tsup-1細胞、P3X63Ag8細胞、HTori-3.1細胞
COLO-320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510A細胞、L-cell細胞、PK-15細胞
COLO201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duke University 4475細胞、BC-PAP細胞、Karpas422細胞
RGC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI7666細胞、RKO-AS45-1細胞、RCC10 RGB細胞
HNE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞
MKN28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112細胞、D324細胞、SKLU1細胞
SMA560細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225 K6細胞、CEM/0細胞、PECAPJ34細胞
Human Epithelioma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1171細胞、SNK6細胞、TEV-1細胞
BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UO-31細胞、MC-38細胞、NIH:OVCAR-8細胞
Okayama University Medical School-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC-316細胞、H-2108細胞、ELD-1細胞
COLO679細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EPC細胞、Hs-940細胞、SCH細胞
PG-4 (S+L-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SB細胞、MCF7細胞、COC1/CDDP細胞
PZ-HPV-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-216細胞、174xCEM.T2細胞、HEK-293FT細胞
2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOPC細胞、PK 15細胞、KY180細胞
BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L363細胞、OVISE細胞、H-358細胞
32D CL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H87細胞、Colo-201細胞、DAKIKI Clone 1細胞
B16 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品：As-PC1細胞、End1/E6E7細胞、H889細胞
OVCAR.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2052細胞、LCLC103H細胞、NS1-Ag4細胞
HOS-TE85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkMel31細胞、MS1細胞、OCI/AML-4細胞
NOMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-O細胞、CII細胞、HEK293T/17細胞
ME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE9細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、NCI-H2228細胞
RC-4B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-14B細胞、MDA468細胞、MonoMac1細胞
OVCAR432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU-65M細胞、Malme-3M細胞、H-2030細胞
Dakiki細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411N細胞、DU 145細胞、U031細胞
MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS411細胞、QGP1細胞、TE 85 ClF-5細胞
SIRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-15細胞、RPE-hTERT細胞、NIH 3T3細胞
H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞
KYSE 50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa S3細胞、HM1900細胞、Huh7.5.1細胞
Hs688(A)T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM266-4細胞、mousepodocyte細胞、HTR8/SVneo細胞
SUP-B15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK-92.05細胞、PC-3M 2B4細胞、Hs 742.T細胞
RWPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker-256細胞、mIMCD3細胞、P3-X63-Ag8.653細胞
MPC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL9細胞、MC 116細胞、H1355細胞
SKLU01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239細胞、MM-1S細胞、ATDC-5細胞
SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2347細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、TPC1細胞
Nb 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3F442A細胞、A-549細胞、G401細胞
MDA-MB-231 #4175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC 1細胞、KLE細胞、MOPC細胞
BPH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118MG細胞、MCF7ADR細胞、A-253細胞
UCD-MLA-144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-900細胞、P3-X63-Ag8.653細胞、Y3-Ag1.2.3細胞
SK-N-BE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-954細胞、GM15452細胞、Dx5細胞
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