"DoTc2 4510細胞:人子宮頸癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2—1:3傳代,每周換液2—3次 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 細胞生長特性:貼壁生長 解凍細胞常見實驗問題分析及推薦解決方法:在解凍凍存細胞時,發(fā)現(xiàn)會出現(xiàn)存活率低、大量細胞碎片及生長緩慢等問題,究竟是什么原因?qū)е?,我們該怎么進行解決?以下是國內(nèi)外細胞培養(yǎng)專家針對解凍細胞實驗問題,總結(jié)的一些解決方案!出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下:1)解凍過程中細胞裂解,推薦的解決方案:可預期到一定量的細胞死亡,因此細胞的濃度應足夠高,考慮到這一損失。起始濃度為1*10(6)至1*10(7)細胞/毫升;2)解凍過程中的問題,推薦的解決方案:在-70℃至-80℃下保存冷凍的培養(yǎng)物,保存時間為1-5天,但這不是保存的方法。在37℃充分解凍后應立即開始培養(yǎng);3)對冷凍液過敏,推薦的解決方案:A.完全或部分更換培養(yǎng)基,減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在24小時后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。B.留出更多時間供培養(yǎng)物恢復。有時細胞需要幾周時間才能形成單層或密集的懸浮物,取決于冷凍時細胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長階段中的位置。冷凍的條件在對數(shù)期;4)被冷凍的原種細胞的年齡或冷凍時培養(yǎng)物的年齡,推薦的解決方案:解凍最近冷凍的細胞。細胞處于冷凍狀態(tài)的時間越長,存活率越低。檢查冷凍細胞的時間和方法。在冷凍時細胞應處于對數(shù)期。 懸浮細胞不容易轉(zhuǎn)染:懸浮細胞是指細胞生長不依賴支持物表面,在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如淋巴細胞。在實驗室經(jīng)常會遇到懸浮細胞的轉(zhuǎn)染,其和貼壁細胞轉(zhuǎn)染還是有很大不同的。目前大多數(shù)實驗室用的是脂質(zhì)體類的轉(zhuǎn)染試劑,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染是基于電荷吸引原理,先形成脂質(zhì)體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內(nèi)吞作用,將目的基因?qū)爰毎麅?nèi),而脂質(zhì)體復合物與貼壁細胞的接觸機會比懸浮細胞高出很多倍,所以,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染時懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率要明顯低于貼壁細胞。其次,脂質(zhì)體試劑的毒性較大,這就使得懸浮細胞的轉(zhuǎn)染更為困難了。另外,懸浮細胞不易培養(yǎng),易死亡,也給細胞轉(zhuǎn)染造成了一定的困難。為了提高懸浮細胞的轉(zhuǎn)染效率,可以使用非脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑,如納米材料的。也可以使用電轉(zhuǎn)染方法,針對懸浮細胞等難轉(zhuǎn)染細胞還是挺不錯的,電擊對細胞有一定的損傷,選用具有細胞膜修復功能的電轉(zhuǎn)染試劑,可以將電擊對細胞的傷害降到最低,懸浮細胞不易轉(zhuǎn)染,選對試劑及良好的細胞培養(yǎng)環(huán)境才是關鍵。 實驗室細胞培養(yǎng)基知識簡介:干粉培養(yǎng)基:以前大部分實驗室都是用干粉培養(yǎng)基,但配制過程就較為繁瑣,要溶解、調(diào)pH值,過濾,過程中可能會產(chǎn)生一些濃度誤差,而且有些實驗室的水質(zhì)并不理想,所以培養(yǎng)的效果會有差異。如果使用液體培養(yǎng)基,這種人為的誤差會減少,因為畢竟是大批量工業(yè)化生產(chǎn)的,批間差會很小。大家是不是感覺液體培養(yǎng)基會貴很多,以前是這樣,但現(xiàn)在大家都認同了;無血清培養(yǎng)基(Serum-Free Media),通常以SFM表示,顧名思義,就是在細胞培養(yǎng)中不需要添加血清,但是在某些應用中可能要添加生長因子或細胞因子。無血清培養(yǎng)基中添加了血清的主要成分:粘附因子、生長因子、必需的營養(yǎng)物質(zhì)和激素等,能減少上述血清帶來的不利因素,使細胞培養(yǎng)的條件更穩(wěn)定。但它也不是完美的,從有血清培養(yǎng)過渡到無血清培養(yǎng)的條件并不像想象中那么直截了當。處于發(fā)育的不同分化階段的細胞(例如干細胞與定向前體細胞相比)需要不同的配方,對生長因子和細胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時,也去除了一些血清蛋白具有的保護、解毒作用,因此對試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。另外,它的價格也比普通的培養(yǎng)基貴很多。 JVM-2細胞系相關產(chǎn)品:3T3-L1 ad細胞、Caco-2 BBe細胞、SaOS-2細胞 MRC-5細胞系相關產(chǎn)品:Huh7.5細胞、SW 780細胞、ST2細胞 B-16細胞系相關產(chǎn)品:SU-86-86細胞、U-2 OS細胞、H1975細胞 NCI-H250細胞系相關產(chǎn)品:H-295細胞、H1341細胞、NCI-H226細胞 LL/2 (LLC1)細胞系相關產(chǎn)品:HeLa229細胞、ROS 17/2.8細胞、LAN6細胞 JIMT-1細胞系相關產(chǎn)品:TFK1細胞、H-1568細胞、BJA-B細胞 SK-N-BE(2C)細胞系相關產(chǎn)品:MOLP8細胞、INS1E細胞、LM2-4175細胞 SU8686細胞系相關產(chǎn)品:BRL3A細胞、PANC-28細胞、LuCL4細胞 WERI-Rb 1細胞系相關產(chǎn)品:C4-2細胞、RK13細胞、Y3-Ag1,2,3細胞 P3/ag細胞系相關產(chǎn)品:HECCL-1細胞、NCI-HUT-292細胞、B-cell with DC Morphology細胞 MGSMC細胞系相關產(chǎn)品:WM 115細胞、Hs675細胞、16HBE14o-細胞 hTERT-HPNE細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR-8/ADR細胞、LUDLU1細胞、Lewis lung carcinoma細胞 H-1954細胞系相關產(chǎn)品:OV 1063細胞、ZR75_1細胞、C-Lu65細胞 OCI-AML-2細胞系相關產(chǎn)品:PSN1細胞、DMS79細胞、KLE細胞 H-1954細胞系相關產(chǎn)品:OV 1063細胞、ZR75_1細胞、C-Lu65細胞 32D/cl3細胞系相關產(chǎn)品:H4-II-E-C3細胞、Hs746-T細胞、EM-3細胞 32D/cl3細胞系相關產(chǎn)品:H4-II-E-C3細胞、Hs746-T細胞、EM-3細胞 CMK細胞系相關產(chǎn)品:LS-411細胞、CV-1細胞、NCI-H128細胞 NCI-SNU-387細胞系相關產(chǎn)品:Scott and White No. 13細胞、SK-BR-3細胞、Y1細胞 COLO 394細胞系相關產(chǎn)品:HRPEpiC細胞、NPC-TW-039細胞、MHCC 97-L細胞 UCLA NPA-87-1細胞系相關產(chǎn)品:SNU-16細胞、MHCC97-L細胞、HCC78細胞 CHP126細胞系相關產(chǎn)品:HC-11細胞、HCC2935細胞、LS174細胞 Y3-Ag1,2,3細胞系相關產(chǎn)品:HO-8910細胞、CD18/HPAF細胞、LLC-MK2細胞 U251細胞系相關產(chǎn)品:Human Lung Microvascular Endothelial細胞:-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞 U-251細胞系相關產(chǎn)品:Hs 606細胞、293E細胞、CT26-clone 25細胞 ADR-RES細胞系相關產(chǎn)品:SG231細胞、B-16細胞、Hs600T細胞 BHK21細胞系相關產(chǎn)品:MHCC97細胞、H2135細胞、SU 86.86細胞 H-87細胞系相關產(chǎn)品:Panc813細胞、Karpas299細胞、ZR75-30細胞 NCI-SNU-761細胞系相關產(chǎn)品:293細胞、KM12細胞、SNU-182細胞 NK92-MI細胞系相關產(chǎn)品:MPP 89細胞、CHP 126細胞、BRL3A細胞 Wayne State University-Head and Neck 13細胞系相關產(chǎn)品:NU-GC-4細胞、ND7/23細胞、H1792細胞 BEP2D細胞系相關產(chǎn)品:HuT102細胞、HFL-I細胞、LS-1034細胞 Hs 636.T細胞系相關產(chǎn)品:EFO-27細胞、HCC1428細胞、PAa細胞 H-498細胞系相關產(chǎn)品:NHRF細胞、SNU368細胞、COLO 320 DM細胞 NTERA-2 cl.D1細胞系相關產(chǎn)品:GM02219細胞、HMC3細胞、B16/F1細胞 C2BBe 1細胞系相關產(chǎn)品:KYSE-510細胞、Hepa-RG細胞、130T細胞 CAL 51細胞系相關產(chǎn)品:Bac 1.2F5細胞、Hs27細胞、L540細胞 P3J.HR1K細胞系相關產(chǎn)品:H-510A細胞、B16BL6細胞、SUSM1細胞 SK-N-FI細胞系相關產(chǎn)品:Tb 1 Lu細胞、P3/X63/Ag8細胞、MCF 10A細胞 GB-1細胞系相關產(chǎn)品:DLD-1細胞、RPVSMC細胞、MOLT3細胞 NCI-H2110細胞系相關產(chǎn)品:E6-1細胞、G-292 clone A141B1細胞、Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞 MDA-MB-435 S細胞系相關產(chǎn)品:MDA231-LM2細胞、DHL6細胞、INS1E細胞 GM-637細胞系相關產(chǎn)品:BL1339細胞、CHAGOK1細胞、AsPC-1細胞 COLO 394細胞系相關產(chǎn)品:HRPEpiC細胞、NPC-TW-039細胞、MHCC 97-L細胞 H-1184細胞系相關產(chǎn)品:MES23.5細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞、MH-22a細胞 Psi2-DAP細胞系相關產(chǎn)品:Ca759細胞、UACC812細胞、TC-1[JHU-1]細胞 HCC-1937細胞系相關產(chǎn)品:RBMEC細胞、OE21細胞、MDAMB330細胞 FOXNY細胞系相關產(chǎn)品:B16/F1細胞、P815細胞、251 MG細胞 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