"SJSA-1細(xì)胞：人骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：５-１：１０傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細(xì)胞懸液接種】１)無菌選取生長良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個(gè)相對穩(wěn)定的時(shí)間。【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí)，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；２)消毒動(dòng)物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?br /> 細(xì)胞培養(yǎng)過程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會(huì)全盤皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
我?？吹揭粋€(gè)比較復(fù)雜的四步消化法，這個(gè)挺有意思，我也是次聽說，應(yīng)該是網(wǎng)友自己發(fā)展出來的方法，很有參考價(jià)值。但我估計(jì)這個(gè)方法可能對付少數(shù)非常怪異的細(xì)胞才需要這么復(fù)雜的程序。我目前養(yǎng)過的近３００株細(xì)胞里面，還沒遇到這么怪異的。比如Caco２其實(shí)是很好消化的細(xì)胞，不需要胰酶孵育即可，只是有點(diǎn)成片分布。不要以為成片分布是自己沒養(yǎng)好，這個(gè)視細(xì)胞而定。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致，那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的，但如果消化方法正確，仍然成片分布，甚至完全吹打成單細(xì)胞懸液，貼壁后仍然成片分布，這是細(xì)胞的特性，是因?yàn)橘N壁過程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布，你的細(xì)胞之后會(huì)對你越來越不好；比較難消化的細(xì)胞(潤洗方法５min還不能消化)，就以colon cancer為例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞、Okayama University Medical School-23細(xì)胞、FHL124細(xì)胞
LS 123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS1034細(xì)胞、GRSL細(xì)胞、YTMLC-90細(xì)胞
SKMEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker256細(xì)胞、ST 486細(xì)胞、MC3T3-E1細(xì)胞
TE-671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM8細(xì)胞、P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞、ROS 17/28細(xì)胞
MLE-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA361細(xì)胞、Sp 2817細(xì)胞、TMK1細(xì)胞
RGCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES-1細(xì)胞、C81-61細(xì)胞、3T6 Swiss Albino細(xì)胞
PNT1/A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1599細(xì)胞、Hs729T細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞
OCI-Ly01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578Bst細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞、E6-1細(xì)胞
NCI-H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C 6細(xì)胞、BIC-1細(xì)胞、MDAMB134VI細(xì)胞
SK-Mel 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 683細(xì)胞、KYSE 140細(xì)胞、Murine Leydig Tumor細(xì)胞：-1細(xì)胞
LS180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW982細(xì)胞、MDA-MB453細(xì)胞、Hs 294T細(xì)胞
SW-1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat FHCRC細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞、JURKAT E-6.1細(xì)胞
AZ-521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADISON LUNG TA-109細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞、T98-G細(xì)胞
BPH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118MG細(xì)胞、MDA-MB-435-S細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞
PLA-802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-025細(xì)胞、H1930細(xì)胞、SK-ChA1細(xì)胞
NCI-H676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-SH細(xì)胞、OCILY-3細(xì)胞、BC-027細(xì)胞
NCI-H676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-SH細(xì)胞、OCILY-3細(xì)胞、BC-027細(xì)胞
CL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7404細(xì)胞、HEL-92細(xì)胞、MiaPaCa-2細(xì)胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1838細(xì)胞、H157細(xì)胞、SK 1細(xì)胞
Namalwa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 253細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、Mc Ardle 7777細(xì)胞
M-G63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMel-5細(xì)胞、SUIT-2細(xì)胞、HLE-B3細(xì)胞
H647ell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMMC-7721細(xì)胞、C3H10T1/2細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞
INS1-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA801-95D細(xì)胞、WEHI 3B細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞
NTC-200細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-05.04細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞
Nthy-ori 3.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL 1-5細(xì)胞、LLC-PK(1)細(xì)胞、IPEC1細(xì)胞
BT-325細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU601細(xì)胞、Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞
PANC-03-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-HME-1細(xì)胞、G 401細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞
NCI-H196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIE-115細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、L615細(xì)胞
UACC812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-719細(xì)胞、HAEC細(xì)胞、SW1990細(xì)胞
PK (15)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM07404D細(xì)胞、Hs-578T細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞
DMS-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U031細(xì)胞、AM38細(xì)胞、UMUC1細(xì)胞
HEC-1-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBC939細(xì)胞、BrCL15細(xì)胞、KP-4細(xì)胞
L 929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUNE-1細(xì)胞、HPAF-II/CD18細(xì)胞、H711細(xì)胞
SKMES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THLE2細(xì)胞、HcerEpic細(xì)胞、hFOB1.19細(xì)胞
RPMI1846細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE50細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞、HASMC細(xì)胞
HKBML細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-1細(xì)胞、8226細(xì)胞、SW 962細(xì)胞
MESSADX5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MALME 3M細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞、P3-X63.Ag8.653細(xì)胞
769-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：143B細(xì)胞、MA 104細(xì)胞、RBE細(xì)胞
MRC-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh7.5細(xì)胞、SW 780細(xì)胞、ST2細(xì)胞
MES-23.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J.HR1K細(xì)胞、TMD-8細(xì)胞、RT4細(xì)胞
Nakata-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2172細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞、NCIADRRES細(xì)胞
HT-29/CX-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：231-luc細(xì)胞、PC-3/M細(xì)胞、HL60細(xì)胞
M14-MEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 361細(xì)胞、SW982細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞
Panc 2.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-1細(xì)胞、SNU-368細(xì)胞、SKML-28細(xì)胞
HuCCT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-98細(xì)胞、AR-42J細(xì)胞、RPMI1788細(xì)胞
OCI-AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PSN1細(xì)胞、DMS79細(xì)胞、KLE細(xì)胞
Hs840_T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIXC002細(xì)胞、578T細(xì)胞、EoL-1 cell細(xì)胞
HEL 299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2085細(xì)胞、MM.1S細(xì)胞、L-5178-Y細(xì)胞
SP-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FBHE細(xì)胞、U-226AR1細(xì)胞、BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞
CAL12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L6細(xì)胞、SEG1細(xì)胞、NCI H747細(xì)胞
OK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag123細(xì)胞、C-8161細(xì)胞、KU 812細(xì)胞
VAESBJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ELD-1細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞、MyLa2059細(xì)胞
Sp2/0-Ag14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL5細(xì)胞、OCI-Ly 8細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞
SW480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAEpiC細(xì)胞、SK-LMS-1細(xì)胞、TK-1細(xì)胞
MSTO-211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-748細(xì)胞、Bx-PC3細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞
LICR-HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK10a細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞、T-ALL 1細(xì)胞
LICR-HN6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK10a細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞、T-ALL 1細(xì)胞
SW 1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera2/D1細(xì)胞、Hs888T細(xì)胞、ECV 304細(xì)胞
HCC1171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wistar Institute-38細(xì)胞、MiaPaCa-2細(xì)胞、DSL-6A/C1細(xì)胞
CF Pac1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEND.3細(xì)胞、32D-Cl3細(xì)胞、HCC-1588細(xì)胞
Hs-343-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL83B細(xì)胞、RCK-8細(xì)胞、HCT FET細(xì)胞
OSC-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2_C細(xì)胞、MDA 1386細(xì)胞、CL 1-0細(xì)胞
P 815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SPCA1細(xì)胞、SNU354細(xì)胞、EU-3細(xì)胞
HEL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OSA細(xì)胞、MPP 89細(xì)胞、MDAMB175VII細(xì)胞
hFOB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep. No. 2細(xì)胞、NCI-446細(xì)胞、COV 504細(xì)胞
FHCRC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Metastatic Variant-522細(xì)胞、SupT1細(xì)胞、NCI-H2227細(xì)胞
NCIH441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASH-3細(xì)胞、HA細(xì)胞、A-204細(xì)胞
P388-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-I細(xì)胞、SU8686細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞
Hs_578t細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOZC-1細(xì)胞、MILE SVEN 1細(xì)胞、NCIH1876細(xì)胞
675T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-428細(xì)胞、VM-CUB-I細(xì)胞、FRTL 5細(xì)胞
B16/F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc_05_04細(xì)胞、Nakata-1細(xì)胞、SKNAS細(xì)胞
WM239細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03320D細(xì)胞、NPA-87細(xì)胞、Y3-Ag 1.2.3細(xì)胞
SKMEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker256細(xì)胞、RCS細(xì)胞、BEL 7404細(xì)胞
bEnd.3[BEND3]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSF2細(xì)胞、WILL-2細(xì)胞、H-650細(xì)胞
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